陈敏
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 核桃粕源抗氧化活性肽的酶解制备及活性分析
- 2024年
- 目的:深度利用核桃粕蛋白。方法:采用分级分离法从核桃粕中提取蛋白质后,分别用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,并比较分析胰蛋白酶酶解物(trypsin hydrolysate,TH)、木瓜蛋白酶酶解物(papain hydrolysate,PH)、中性蛋白酶酶解物(dispase hydrolysate,DH)、碱性蛋白酶酶解物(alcalase hydrolysate,AH)和风味蛋白酶酶解物(flavourzyme hydrolysate,FPH)的抗氧化活性;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和羟自由基清除率为检测指标分析不同浓度AH的体外抗氧化性;采用LC-MS/MS技术鉴定AH中所有肽的序列,并利用PeptideRanker、BIOPEP-UWM数据库和分子对接工具AutoDock1.5.6筛选潜在的核桃抗氧化活性肽;将上述两条肽分别与Keap1蛋白进行计算机模拟分子对接,并利用斑马鱼胚胎氧化损伤模型,对人工合成的两条抗氧化活性肽的抗氧化活性进行分析。结果:5种酶解物中抗氧化活性较好的AH对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的最佳清除率分别为(71.56±0.75)%,(60.63±0.45)%,(98.63±0.06)%。LC-MS/MS鉴定并通过计算机分析预测得到两条活性最优的肽,即:ALWPF和PLRWPF;两条抗氧化活性肽均能与Keap1蛋白的活性部位结合,其结合能分别为-9.2,-9.6 kJ/mol。ALWPF和PLRWPF肽处理斑马鱼胚胎的安全质量浓度范围分别为0~50,0~30μg/mL。结论:从核桃粕中鉴定出两条抗氧化肽,其对斑马鱼胚胎具有保护作用。
- 倪策曹天红陈敏陈敏吴昊吴昊
- 关键词：核桃蛋白酶解工艺抗氧化活性
- 重组艰难梭菌毒素B对小鼠结肠癌CT26细胞的诱导凋亡作用
- 2009年
- 本文探讨了重组艰难梭菌毒素B(rTcdB)对小鼠结肠癌CT26细胞的诱导凋亡作用。采用不同浓度rTcdB处理CT26细胞,通过MTT法检测细胞增殖抑制率;比色法测定Caspase3活性;细胞形态学和流式细胞技术检测细胞凋亡。结果表明,rTcdB显著抑制了CT26细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性;Caspase3活性在处理6h后显著升高,至18h达到最大值,与对照组相比差异显著,具有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜观察到典型细胞凋亡形态学变化,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)异位到了膜外侧,细胞膜呈明亮的绿色荧光;通过流式细胞仪检测结果表明,细胞凋亡率呈时间-剂量依赖性增加。实验结果表明,重组艰难梭菌毒素B能够诱导小鼠结肠癌CT26细胞凋亡。
- 陈敏曹延粉李杉孙丽华刘婷婷王菊芳
- 关键词：艰难梭菌细胞凋亡
