陈汉春
- 作品数：20 被引量：38H指数：4
- 供职机构：湖南医科大学分子生物学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金会项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用5-Fu治疗MT/p210^(bcr-abl)转基因小鼠的研究被引量：2
- 1999年
- 以５－氟脲嘧啶（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ，５－Ｆｕ）腹腔注射治疗了１２只携有金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）启动子和增强子序列、ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ（ｐ２１０）序列及ＳＶ４０剪切和Ｐｏｌｙ（Ａ）信号序列的转基因慢粒白血病（ｃｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉ－ａ，ＣＭＬ）ＭＴ／ｐ２１０ｂｃｒ－ａｂｌ小鼠，于治疗的第５ｄ及第１０ｄ从不同脏器提取总ＲＮＡ、ＤＮＡ及蛋白质，分别进行ＰＣＲ分析、ＲＴ－ＰＣＲ检测被转移基因的表达水平及免疫沉淀法分析ｐ２１０ｂｃｒ－ａｂｌ转基因产物的激酶活性．结果表明，被转移基因在脾脏和骨髓中表达水平较高，胸腺和肾脏中呈低水平表达．５－Ｆｕ活体治疗１０ｄ后。
- 陈汉春安德鲁.皮尔斯托尼.威顿
- 关键词：BCR-ABL转基因鼠5-氟脲嘧啶
- 羟基脲联合干扰素-α对K562细胞生长及凋亡相关基因表达的影响被引量：8
- 2000年
- 目的 观察羟基脲 (HU)及HU联合干扰素 α(IFN α)对慢性粒细胞性白血病 (CML)细胞株—K5 6 2细胞增殖、死亡及其相关基因表达的影响 ,进一步探讨化疗药物与细胞因子联合治疗CML的分子基础。方法 细胞计数及台盼蓝染色分析细胞增殖与存活率 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)分析 48h培养后的K5 6 2细胞中bcr abl、bax及c myc基因表达水平。结果 HU及HU联合IFN α均抑制细胞增殖和促进细胞死亡 ;与对照组比较 ,HU可以显著抑制bcr abl基因表达 (下调 17.5 % )和促进bax基因表达 (上调 12 .0 % ) ;IFN α呈剂量依赖性协同HU调节bcr abl(下调 35 .7% )和bax(上调 15 % )基因表达水平 ;HU及HU联合IFN α对c myc基因表达均呈现轻微抑制效应。结论 从调节细胞平衡的相关基因的表达水平进一步阐明了HU联合IFN α作用于白血病细胞的分子机制。
- 陈汉春罗志勇罗赛群汤立军彭兴华李晓林
- 关键词：羟基脲干扰素-Α基因表达慢性粒细胞性白血病
- IFN-α联合IL-6对CGL患者骨髓细胞生长及生长-凋亡相关基因表达的影响被引量：4
- 2000年
- 目的 探讨α干扰素 (IFN α)及IFN α联合白细胞介素 6 (IL 6 )对慢性粒细胞白血病(CGL)患者骨髓单个核细胞生长及bcr abl、bcl 2和c myc基因表达的影响。方法 以 2 0 0U mlIFN α或2 0 0U mlIFN α联合 10 0ng mlIL 6液体培养CGL慢性期患者骨髓单个核细胞 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)相对定量分析培养 2 4h的骨髓单个核细胞中 β actin、bcr abl、bcl 2和c myc基因表达水平。结果 IFN α明显抑制细胞生长 ,IL 6可在IFN α作用的基础上轻微降低IFN α对细胞生长的抑制程度 ;IFN α或IFN α加IL 6共同作用均抑制bcr abl和bcl 2基因表达 ;IFN α抑制c myc基因表达 ,IL 6则促进c myc基因表达。结论 IFN α及IFN α联合IL 6均抑制bcr abl和bcl 2等抗凋亡基因表达 ,并调节c myc基因表达水平。通过促进细胞凋亡而抑制恶性克隆增长是IFN α或IFN α联合IL 6治疗CGL的可能作用机制。
- 陈汉春汤立军彭兴华罗志勇罗赛群谭文斌
- 关键词：慢性粒细胞白血病骨髓IFN-ΑIL-6
- 人干细胞因子基因5′旁侧序列的克隆和功能研究被引量：4
- 2000年
- 人干细胞因子 ( human stem cell factor,h SCF)在多种哺乳动物干细胞的增殖、分化和移居中发挥重要作用 .利用改进的 PCR体系 ,从人类基因组 DNA中扩增出自 h SCF基因编码起始位点( + 1 81 )至 5′旁侧 - 1 1 90位点共 1 372 bp的片段 ,将其克隆至 p GEM- T载体中 ,经序列分析证明无误 .为探寻此片段中对转录调控起作用的具体区域 ,用基因缺失技术从 - 1 62 ( Bst X )位点向上游分别延伸至 - 2 73( Pst )、- 339( Sma )、- 381 ( Sac )、- 44 0 ( Eco R )、- 570 ( H inc )、-853( Bgl )及 - 1 1 90 ( Xho )等位点 ,共获 7个不同长度的 h SCF基因 5′旁侧序列片段 ,随后将这7个片段分别克隆入荧光素酶 ( luc)报告基因载体 p GL2 - Promoter.经阳离子脂质体包埋技术介导转染 He La细胞 ,培养 48h后检测 Luc活性 .结果表明 :h SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90～ - 853区域对luc表达有明显的增强作用 ,而 - 339～ - 2 73区域则显示有抑制作用 .分别以包含这两个区域的片段为探针进行竞争性凝胶阻滞实验 ,结果均出现一个或多个特异性滞留区带 ,说明这两个区域存在转录因子的结合位点 .实验结果表明 ,h SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90～ - 853区域富含 AT,是一典型基质结合区 ,而 - 339～ - 2 73区域为一新的沉默子 。
- 谭文斌聂怡玲郭小珊谭运年成光杰陈汉春朱定尔
- 关键词：人干细胞因子基因基因表达转录调控
- 病毒介导造血干细胞基因转移
- 1998年
- 造血干细胞（Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌ，ＨＳＣ）是体细胞基因治疗尝试的主要靶细胞之一。造血干细胞基因转移具极大的疾病治疗潜能，可应用于治疗造血细胞及非造血系统的遗传性和获得性疾病。由于造血系统的组织形式十分严密，在造血干细胞群体内以长期重建细胞（Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｒｅｐｏｐｕｌａｔｉｎｇｃｅｌ，ＬＴＲＣ）为靶细胞而进行的基因转移，能保证其被基因修饰的成熟终末细胞的连续补充。
- 陈汉春谢慎思朱定尔
- 关键词：病毒介导造血干细胞基因转移基因治疗
- HL-60细胞内同源盒HOXA1、cDNA基因的克隆被引量：3
- 1999年
- 目的：研究同源盒ＨＯＸ基因的表达在ＡＴＲＡ诱导白血病细胞分化中的作用。方法：利用我们建立的一种高效、简单的ｃＤＮＡ克隆方法－ＨＯＸ家庭基因指纹图技术，克隆ＨＬ－６０细胞内的ＨＯＸｃＤＮＡ基因。采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ技术初步探讨ＡＴＲＡ对所克隆的ＨＯＸ基因表达的影响。结果：筛选出一个在ＨＬ－６０细胞内有表达的同源盒基因一ＨＯＸＡＩ基因ｃＤＮＡ片段，初步研究证实，此基因的ｍＲＮＡ水平在ＡＴＲＡ的作用下被上调。结论：ＡＴＲＡ可诱导ＨＬ－６０细胞内ＨＯＸＡ１基因表达增强。提示在ＡＴＲＡ诱导细胞分化而治疗恶性肿瘤的分子机制中，包括上调ＨＯＸＡ１基因表达而致白血病细胞分化成熟。
- 王吉伟田菁燕陈汉春
- 关键词：同源盒基因CDNA克隆
- Hu联合GM-CSF对K562细胞生长-凋亡相关基因表达的影响被引量：7
- 2000年
- 目的：探讨羟基脲（hydroxyurea，Hu）及Hu联合粒系-巨噬系集落刺激因子（granulocyticmacrophagecolony－stimulatingfactor，GM－CSF）对慢性粒细胞白血病（chronicmyelogenousleukemia，CML）细胞株K562细胞生长及凋亡相关基因表达的调节效应。方法：以Hu及Hu联合GM-CSF培养K562细胞，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）来分析培养48小时后bcr-abl、bax、c－myc基因表达水平。结果：Hu显著抑制bcr－abl基因表达，促进bax基因表达，但对c－myc基因表达无影响。GM－CSF可部分桔抗Hu对bcr－abl、bax基因表达的调节效应，显著上调c－myc基因表达水平。结论：除直接细胞毒作用外，Hu可通过下调bcr－abl和上调bax基因表达水平而诱导细胞死亡或凋亡。由于GM-CSF有部分持抗化疗药物的效应，故临床上在采用Hu治疗CML患者的同时，宜慎重使用GM－CSF。
- 陈汉春public.cs.hn.cn罗志勇罗赛群汤立军王吉伟谭孟群
- 关键词：羟基脲慢性粒细胞白血病GM-CSF
- 干扰素-α信号转导研究进展
- 2000年
- 干扰素-α(interferon-α,IFN-α)是细胞因子超家族中IFN家族的成员,具有抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等多种生物学功能,已作为生物治疗剂而被广泛应用于人类疾病的临床治疗。IFN-α在其效应细胞内多种信号转导途径的交互作用导致了其生物学功能的复杂性和多样性。近年研究表明,IFN-α主要经JAK-STAT、IRF途径转导信号。明确各种信号转导途径及其信号转导分子之间复杂的网络联系,已成为探讨IFN-α的分子作用机制和拓宽其应用范围的重要研究领域。
- 陈汉春
- 关键词：干扰素-Α信号转导
- 化疗药物联合细胞因子对bcr-abl转基因小鼠骨髓细胞生长及转基因表达的影响被引量：2
- 1999年
- 应用Ｈｕ或５Ｆｕ和鼠干细胞因子（ｍＳＣＦ）及鼠白细胞介素３（ｍＩＬ３）培养含金属硫蛋白（ＭＴ）启动子和增强子序列、ｂｃｒａｂｌｃＤＮＡ（ｐ２１０）序列及ＳＶ４０剪切和Ｐｏｌｙ（Ａ）信号序列的转基因慢粒白血病小鼠骨髓细胞，观察化疗药物及细胞因子单独或联合应用对ＭＴ／ｐ２１０（ｂｃｒａｂｌ）转基因小鼠骨髓细胞生长的影响，并采用ＲＴＰＣＲ分析培养前后骨髓细胞中转基因的表达。结果表明，ｍＳＣＦ和ｍＩＬ３联合应用时，明显促进骨髓细胞增殖及集落形成；不加细胞因子培养，则细胞增殖和转基因表达均受抑制；Ｈｕ或５Ｆｕ与ｍＳＣＦ及ｍＩＬ３联合应用时，同样抑制细胞增殖及转基因表达。提示联合应用化疗药物及细胞因子治疗ＣＭＬ是具有极好应用前景的策略。
- 陈汉春
- 关键词：骨髓移植转基因小鼠
- 同源盒HOXA_1基因在髓系白血病细胞内的表达被引量：4
- 2000年
- 目的研究HOXA1基因在髓系白血病细胞内的表达及药物对其表达的影响。方法采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)技术,研究全反式维甲酸(ATRA)对HL60细胞内同源盒HOXA1基因表达的影响。同时对9例髓系白血病患者的HOXA1基因表达进行了检测。结果①ATRA可上调HL60细胞内HOXA1基因的表达。②所有受检白血病患者的HOXA1基因表达水平均比正常对照组高(P<0.01)。
- 王吉伟田菁燕陈汉春
- 关键词：髓系白血病同源盒基因表达
