马金骏
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：江苏省高技术研究计划(农业)项目上海市科委重大科技攻关项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 菜薹雄性不育相关基因的ISSR分子标记筛选被引量：10
- 2009年
- 菜薹(Brassica campestris L.ssp.Chinensis var.utilis Tsenet Lee)属于十字花科芸薹属,原产中国,是华南地区重要的特产蔬菜之一。利用分子标记技术进行菜薹雄性不育相关基因的定位对菜薹品质创新和选育新品种具有重要意义。目前尚未见有利用ISSR分子标记技术进行菜薹雄性不育分析的研究报道。利用ISSR技术对菜薹雄性不育系及其保持系的基因组DNA进行比较分析;结果显示100个ISSR引物中,只有引物UBC843的扩增结果在两系之间表现出了差异性,找到了不育系和保持系间的特异扩增片段。回收该特异扩增片段并进行克隆测序,测序结果表明该片段全长为462bp。与白菜其它育性相关序列比较,同源性均低于50%。根据测序结果设计了一对特异引物,将其转化为更稳定的SCAR标记。经F2群体验证,ISSR引物扩增得到的特异片段很有可能来自核DNA。
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- 关键词：菜薹雄性不育分子标记
- 菜薹细胞质雄性不育相关基因orf224的克隆
- 2009年
- 利用分子标记技术克隆菜薹雄性不育基因,为利用菜薹不育性提供依据。采用同源序列的候选基因法,通过检索NCBI核酸数据库,获得细胞质雄性不育(CMS)相关的基因或开放读码框序列。根据保守区设计1对特异引物,对不育系和保持系的基因组DNA进行PCR扩增。结果表明:特异引物在不育系中扩增出1条675 bp的片段。序列分析表明该片段与Pol型胞质不育orf224基因同源性为100%。CMS特异扩增结果证明试验所用的菜薹其不育类型为胞质Pol型。
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- 关键词：菜薹细胞质雄性不育克隆
- RAPD、ISSR、SRAP技术构建不结球白菜杂交种指纹图谱
- 利用RAPD、ISSR和SRAP三种标记技术,对由双亲及其F1组成的两个组合进行分析。结果表明有3个RAPD引物、3个ISSR引物和3对SRAP引物可扩增出“新夏青2号”双亲的互补特征带,将其双亲和F1区分出来;对“新绿...
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- 关键词：不结球白菜指纹图谱引物筛选
- 文献传递
- RAPD、ISSR、SRAP技术构建不结球白菜杂交种指纹图谱
- 利用RAPD、ISSR和SRAP三种分子标记技术,对两个不结球白菜杂交组合及其各自亲本进行分析。结果表明3个RAPD引物、3个ISSR引物和3对SRAP引物可扩增出组合1双亲的互补特征带,将双亲和F区分开来;3个ISSR...
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- 关键词：不结球白菜RAPDISSRSRAP指纹图谱
- 文献传递
- 不结球白菜ISSR反应条件的优化
- 本文通过单因素试验确定了 Taq DNA 聚合酶、dNTP、引物和 Mg4种因素在不结球白菜 ISSR 反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计,从4种因素3个水平对不结球白菜 ISSR 反应体系进行了优化...
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- 文献传递
- RAPD、ISSR、SRAP技术构建不结球白菜杂交种指纹图谱
- 利用RAPD、ISSR和SRAP三种标记技术,对由双亲及其F组成的两个组合进行分析。结果表明有3个RAPD引物、3个ISSR引物和3对SRAP引物可扩增出"新夏青2号"双亲的互补特征带,将其双亲和F区分出来;对"新绿"的...
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- 关键词：不结球白菜RAPDISSRSRAP指纹图谱
- 文献传递
- RAPD、ISSR、SRAP技术构建不结球白菜杂交种指纹图谱
- 利用RAPD、ISSR和SRAP三种分子标记技术，对两个不结球白菜杂交组合及其各自亲本进行分析。结果表明3个RAPD引物、3个ISSR引物和3对SRAP引物可扩增出组合1双亲的互补特征带，将双亲和F1区分开来;3个ISS...
- 马金骏冒维维朱玉英陈学好薄天岳
- 关键词：不结球白菜杂交组合
- 文献传递
- 不结球白菜ISSR反应条件的优化被引量：2
- 2007年
- 本文通过单因素试验确定了Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和Mg^(2+)4种因素在不结球白菜ISSR反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计,从4种因素3个水平对不结球白菜ISSR反应体系进行了优化,确立了适合不结球白菜的ISSR反应体系,并在10个不结球白菜品种中进行了验证。在20μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶1U、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.25μmol/L、1×PCR buffer、Mg^(2+) 2.5 mmol/L、模板DNA 30 ng。通过梯度PCR测验和总循环次数梯度处理试验,确定了适宜的退火温度和总循环数。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行不结球白菜种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。
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- 关键词：不结球白菜ISSR单因素试验
- 正交设计优化菜薹ISSR反应体系研究被引量：10
- 2006年
- 菜薹原产中国,是华南地区重要的特产蔬菜之一。目前,分子标记技术已广泛应用于多种作物研究,但在菜薹上的应用研究刚刚起步。ISSR主要是由单一引物且以重复序列为主要引物序列的PCR标记,其反应条件受模板DNA、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTP和引物等因素的影响。正交试验设计能明确各因素间的互作效应,建立最优化的反应体系。本研究利用正交试验设计,从Taq DNA聚合酶、dNTP、引物、Mg2+4种因素3个水平对菜薹ISSR反应体系进行了优化,确立了适合菜薹的ISSR反应体系并在7个菜薹品种中进行了验证。在20μl反应体系中,含Taq DNA聚合酶1U、dNTP250μmol/L、引物0.25μmol/L、1×PCRbuffer、Mg2+2.5mmol/L、模板DNA30ng。通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行菜薹种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。
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- 关键词：CAMPESTRIS正交设计
- 菜薹抽薹性状的ISSR和SRAP分析被引量：5
- 2009年
- 以早抽薹品种CT07和晚抽薹品种T0601为亲本构建F2分离群体,采用分离集团混合分析法(Bulkedsegregant analysis,BSA)筛选与菜薹抽薹基因连锁的分子标记。用45条ISSR(Inter-simple sequence repeat,简单重复序列间扩增)引物和20对SRAP(Sequence related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)引物组合进行PCR扩增筛选,其中UBC834、UBC876、E13M4和E5M7对亲本和DNA池的扩增图谱表明,4个引物的差异条带均出现在早抽薹品种CT07和早现蕾(抽薹)池中。经F2代群体单株验证,4个标记均与早抽薹基因相连锁,且标记E13M4最近,距离为16.8 cM,这为菜薹抽薹基因的定位和分子标记辅助育种奠定了基础。
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- 关键词：菜薹ISSRSRAP
