黄勋 作品数:11 被引量:30 H指数:4 供职机构: 四川大学分析测试中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 化学工程 更多>>
同时检测脑积水脑组织中多种高能磷酸化合物的反相高效液相色谱法的建立 被引量:5 2004年 目的 建立能同时测定狗脑积水不同时期脑组织中肌酸 (Cr)、磷酸肌酸 (Crp)、磷酸腺苷酸 (ATP、ADP、AMP)含量的方法 ,了解脑积水不同时期脑组织的能量代谢受损状况。方法 采用反相高效液相色谱法同时测定狗脑积水脑组织中 Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量。色谱柱为 Inertsil ODS- 3C18(2 5 0 mm× 4 .6 mm i.d. 5μm )分析柱 ,流动相为 :KH2 PO4 缓冲液 (330 mmol/ L ) -乙腈 - TBA(4 5 mm ol/ L ) (94 :5 .5 :0 .5 ) (p H=6 .2 7) ,检测波长为 2 10 nm。结果 最低检测限为 3.5 5~ 5 .84μmol/ L ,Cr在 5 .6 9~ 36 4 0 .5 0μm ol/ L (r=0 .9993) ,Crp 3.4 7~5 5 5 .5 0μmol/ L (r=0 .9999) ,AMP在 2 .6 9~ 172 3.0 0μmol/ L (r=0 .9993) ,ADP在 2 .6 6~ 170 4 .0 0μm ol/ L (r=0 . 9999) ,ATP在 2 .94~ 1883.5 0μ mol/ L (r=0 .9999)范围内均具有良好的线性关系。回收率为 90 .10 %~10 7.0 0 % ,日内精密度为 1.5 8%~ 3.88% ,日间精密度为 1.99%~ 4 .2 4 %。应用该方法测定了 16只狗脑积水不同时期脑组织中 Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量 ,获得了良好的结果。结论 该方法准确、灵敏、快速 ,适合于脑积水脑组织中高能磷酸化合物的测定。 孙爱民 王恩任 毛伯镛 晁若冰 黄勋 许秀成关键词:反相高效液相色谱法 肌酸 磷酸肌酸 荧光素与牛血清白蛋白相互作用物的荧光光谱及测试应用 被引量:5 2006年 研究了荧光素与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的荧光光谱及其最佳测试条件和影响因素。在pH2.2,荧光素-牛血清白蛋白复合物的荧光强度最大,其激发波长(Ex)为467nm,发射波长(Em)为515nm。在BSA1.8~500mg/L范围内,该复合物荧光强度与BSA浓度成线性关系,F:25.776C+2.8082,r=0.9999。该法简单、快速、灵敏、稳定、成本低。 黄勋 孙爱民 丁雪琴 许秀成 方鲁延关键词:荧光素 血清白蛋白 荧光光谱法 用Fura-2测定人外周血中性粒细胞内游离钙浓度 被引量:1 2003年 本文用 2 - [6-双乙酸基 - 5 - ( 2 -双乙酸基 ) - 5 -甲苯氧乙氧基 ]- 2 -苯骈呋喃基 - 5 -恶唑羧酸五钾盐 ( Fura- 2 )建立了测定人外周血中性粒细胞内游离钙浓度的方法 ,并对一些测试条件进行了探讨。测定标本内中性粒细胞数以大约 10 6个 /m L为宜 ,在离心分离出中性粒细胞悬液时 ,标本制备好需静置 0 .5 h后才能上机测试 ,否则振荡形成的剪切应力将增大细胞内游离钙的浓度 ,p H偏离 7.4和受损细胞会极大增加细胞内游离钙的浓度。结果表明 ,正常人外周血中性粒细胞游离钙浓度为 3.95± 0 .76μg/L。对中性粒细胞内游离钙的测定有助于了解其功能状态。 黄勋 孙爱民 乔小蓉 陈槐卿 田卫 方鲁延 许秀成关键词:FURA-2 人外周血 游离钙浓度 中性粒细胞 高速离心法与水醇法制备止咳定喘口服液的比较研究 被引量:1 2004年 目的:比较高速离心方法与常规水醇方法对制备工艺的影响.方法:采用高速离心法与水醇法同时制备止咳定喘口服液,并测定其含量.结果:高速离心法缩短工艺流程,含量也明显高于常规水醇方法.结论:高速离心法可取代常规水醇制备方法. 方鲁延 孟莉 黄勋 丁雪琴 孙爱民关键词:高速离心法 水醇法 中药护肝灵对实验大鼠乙醇分解酶的影响 被引量:3 2006年 目的:探讨中药护肝灵对乙醇代谢相关酶的影响.方法:以乙醇灌胃法复制大鼠模型,分别以易善复及高、低剂量护肝灵处理,双波长法检测血中乙醇浓度,按试剂盒说明书检查肝匀浆中CAT含量,活性分光光度法检测肝匀浆ADH含量,荧光实时定量RT-PCR观察ADH和CYP450ⅡE1的mRNA表达.结果:与正常对照组相比,模型组血清乙醇含量显著升高(545.7±l08.85mg/L vs -51.4±2.83mg/L,P<0.05),ADH和CAT含量显著降低(667±272nkat/L vs 1884±650nkat/L,P<0.05:112±29nkat vs 255±43nkat,P<0.05).与模型组相比,中药护肝灵可以降低口服乙醇大鼠血中乙醇含量(低剂量:248.5±96.63mg/L;高剂量:-0.1±33.94mg/L;均P<0.01),提高肝组织ADH(低剂量:1184±422nkat/L:高剂量:1550±458nkat/L;均P<0.05)和CAT(低剂量:202±31nkat/L;高剂量:167±34nkat/L;均P<0.05)含量,造模后肝组织CYP450ⅡE1 mRNA显著下降(10±2 vs 15±2,P<0.01),护肝灵可使肝组织CYP450ⅡE1 mRNA表达进一步下降(高剂量:8±2,P<0.05).造模及药物处理后,ADH mRNA均无显著变化(P>0.05).结论:中药护肝灵可激活乙醇代谢相关酶,进而促进乙醇在体内的代谢. 潘年松 夏庆杰 黄勋 张立实关键词:乙醇 Ca^(2+)、Mg^(2+)对心肌肌球蛋白ATP酶活性的影响 被引量:2 2002年 目的研究Ca2 +、Mg2 +对心肌肌球蛋白ATP酶活性的影响。方法采用一种简便、快速的方法从心肌组织中提取肌球蛋白 ,根据酶反应ATP分解释放的无机磷含量检测Ca2 +、Mg2 +激活肌球蛋白ATP酶的Km值及最大反应速度Vmax,以及不同浓度的Ca2 +、Mg2 +、pH值对肌球蛋白ATP酶活性的影响。 结果Ca2 +、Mg2 +-肌球蛋白ATP酶Km值为 5 .2 7± 2 .1 0mmol、7.0 4± 2 .0 6mmol,Vmax分别为 :1 .1 0± 0 .1 3μmol·mg- 1 ·min- 1 、0 .61 7± 0 .0 9μmol·mg- 1 ·min- 1 ;Ca2 +较Mg2 +具有较大的酶激活能力 (P <0 .0 1 ) ,但Mg2 +的浓度影响着肌球蛋白ATP酶对Ca2 +的敏感性 ,当Mg2 +浓度大于 6mmol/L时 ,酶对Ca2 +的存在无反应 ;不同的pH值 ,对Mg2 +激活的酶反应影响较小。结论Ca2 +、Mg2 +对肌球蛋白ATP酶的作用机理不同 ,Mg2 +是维系肌球蛋白具有酶活性构象所必需 ,而Ca2 朱彬 万朝敏 刘荣韬 孙爱民 黄勋 王正荣关键词:CA^2+ MG^2+ 肌球蛋白 ATP酶 电解质紊乱 当归补血浸膏的定性定量分析 2004年 目的 快速简便的鉴别当归补血浸膏剂中的当归与党参、甘草与芍药。方法 用HPLC方法测定制剂中芍药苷和甘草酸的含量。薄层色谱法鉴别 4味药材。结果 薄层色谱上均鉴别出制剂和各自药材的特征斑点 ,而空白对照液无此斑点。高效液相色谱方法的建立 ,相关系数分别为芍药苷r=0 .9999,甘草酸r=0 .9996 ,平均回收率芍药苷 99.5 4 % ,RSD1.11%。甘草酸 98.79% ,RSD0 .6 0 %。结论 方法简便 ,结果准确。 徐宇 方鲁延 黄勋关键词:薄层色谱法 高效液相色谱法 “护肝灵”预防酒精性肝损伤与营养素数量变化的关系 被引量:1 2006年 目的观察“护肝灵”对酒精性肝损伤的影响。方法给大鼠连续口服乙醇42 d,取其股动脉血离心后测肝功能,取肝脏匀浆的测考乌斯亮兰蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶、维生素E。结果“护肝灵”低、中剂组均可提升考乌斯亮兰蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶、维生素E的含量。结论“护肝灵”缓解酒精性肝损伤过程中营养素的消耗。 潘年松 黄勋 张立实关键词:护理 酒精性肝损伤 营养素 护肝灵对酒精性肝损伤大鼠的保护作用 被引量:1 2007年 目的:探讨护肝灵对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法:乙醇灌胃法复制大鼠模型,护肝灵同步干预连续42d,检测肝组织MDA、SOD;HE染色光镜检查肝组织;放射免疫学检查血清TNF-α和IL-8。结果:护肝灵可使肝组织中升高的MDA值下降、使下降的SOD值升高;预防酒精性脂肪肝和轻型酒精性肝病的发生。结论:护肝灵可以预防乙醇诱导的大鼠肝脂肪变和轻微炎症改变,升高SOD、降低MDA含量是其机制之一。 潘年松 黄勋 王毅 张立实关键词:酒精性肝损伤 护肝灵对实验大鼠酒精性脂肪肝的影响与机制探讨 被引量:6 2007年 目的:探讨护肝灵预防酒精性脂肪肝的效果与机制。方法:EtOH灌胃法复制大鼠酒精性脂肪肝模型的同时,予护肝灵高、低剂量干预、易善复对照,均连续42d。双波长法检测血清E tOH浓度,常规检测ALT、ASL、γ-GT、TBIL;按试剂盒说明书检测肝组织TG和CAT含量;活性分光光度法检测肝组织ADH含量;肝组织油红O染色光镜下检查肝细胞脂滴面积大于30%的大鼠只数,同时用面积IOD值和积分光密度IOD值比较脂滴面积。结果:各组大鼠血清中的ALT、AST、ALT/AST、γ-GT,以及TBIL等值差异均无显著性(P>0.05)。护肝灵高剂量组、低剂量组均可阻止EtOH、TG含量升高(P<0.05)、阻止ADH和CAT含量减少(P<0.05);X200下见脂滴面积大于30%的大鼠只数为:正常组0只、模型组5只、低剂量3只、高剂量和对照组均为2只,即护肝灵可抑制脂滴面积大于30%的大鼠只数(P<0.05);可减少油红O染色光镜下肝细胞脂滴面积IOD值和积分光密度IOD值(P<0.05),高剂量已接近正常组(P>0.05)。结论:护肝灵可呈剂量正相关地预防酒精性脂肪肝的发生,其机制与阻止ADH和CAT含量减少、阻止EtOH、TG含量升高有关。 潘年松 黄勋 王毅 张立实