龚卫娟 作品数:121 被引量:347 H指数:10 供职机构: 扬州大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
bcr-abl和IL-7共表达基因疫苗诱导小鼠免疫保护的实验研究 慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)具有特征性的bcr-abl融合基因。我们曾发现用 pVbcr-abl和pVbcr-abl/mIL7基因疫苗免疫小鼠的SP2/0/bcr-abl移... 钱莉 刘伟 蒋桂花 龚卫娟 季明春文献传递 可溶性HLA-A2-IgGFc融合蛋白在昆虫细胞的表达及鉴定 2009年 目的利用杆状病毒-昆虫细胞表达体系制备可溶性HLA-A2与免疫球蛋白IgGFc段的融合蛋白。方法首先将可溶性HLA-A*0201和IgG3分子Fc段的cDNA基因插入杆状病毒表达载体pFastHTa,形成重组载体pFHT-sHLA-A*0201-IgGFc。将该重组载体转化DH10Bac大肠杆菌,sHLA-A*0201-IgGFc基因同源重组入菌体内杆粒(Bacmid)中。抽提阳性杆粒,转染昆虫细胞Sf9,72 h收集病毒上清。再将病毒上清感染Sf9细胞,96 h收集细胞并裂解,SDS-PAGE观察其表达。细胞裂解液经Ni+-NTA树脂纯化Western-blot法鉴定其蛋白质序列,间接ELISA法鉴定是否形成正确构象。结果融合蛋白不仅与HLAⅠ类分子的构象特异性抗体(W6/32)结合,还与羊抗人IgG抗体结合。结论所制备可溶性HLA-A2-IgGFc融合蛋白序列正确,并在体外形成正确空间构象。 王丽珩 龚卫娟 肖炜明 丁岩冰 田芳 季明春关键词:融合蛋白 解剖学和外科学课程整合创新研究与实践 被引量:8 2013年 扬州大学医学院在医学教育中实施了解剖学与外科学的课程整合,将研究型教学模式引入课程整合改革中,在课程整合创新研究与实践中取得了初步成效。 王正兵 吴洪海 龚卫娟 吴庚华 朱云详 孙振华 贾筱琴关键词:课程整合 解剖学 外科学 HLA-A^*0201/CAP-1四聚体在结直肠癌研究中的应用 2014年 目的:应用HLA-A*0201/CAP-1四聚体,分析HLA-A*0201+CEA+结直肠癌患者的外周血及癌旁肠系膜引流淋巴结的特异性CTLs的数量。方法:分离健康人(18例)PBMC和结直肠癌(23例)患者PBMC以及癌旁肠系膜引流淋巴结的淋巴细胞,应用流式细胞术,以HLA-A*0201/CAP-1和HLA-A*0201/FLUmp四聚体检测CAP-1和FLUmp特异性CTLs的频率。结果:在25例HLA-A*0201+个体中,结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/FLU四聚体+CD8+细胞的频率分别为(0.671±0.421)%和(0.564±0.408)%,两组之间无显著差异(P=0.525)。结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率分别为(2.409±2.385)%和(0.020±0.021)%,两组之间有显著差异(P=0.008)。结论:HLA-A*0201+结直肠癌患者HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率升高,说明CEA特异性CTLs在结直肠癌患者的免疫监视功能中具有重要的作用。对存在针对肿瘤抗原的特异性CTLs却无法阻止肿瘤进展的具体机制需要更加深入的研究。 钱亚云 季明春 刘延庆 龚卫娟关键词:细胞毒T细胞 结直肠癌 bcr-abl基因疫苗对小鼠SP2/0/bcr-abl移植瘤的影响 被引量:9 2006年 为了研究bcr-abl融合基因疫苗对小鼠SP2/0/bcr-abl移植瘤的影响,采用pVbcr-abl、pVbcr-abl/mIL7两种质粒分别免疫BALB/c小鼠,然后用SP2/0/bcr-abl细胞攻击免疫小鼠,观察疫苗对SP2/0/bcr-abl移植瘤生长的影响,检验其是否具有免疫保护作用。结果表明用基因疫苗免疫的两个实验组与两个对照组(空白对照组和空载体对照组)相比,在移植肿瘤形成时间、肿瘤表面破溃时间、肿瘤体积、荷瘤生存期等指标上均存在明显差异。pVbcr-abl/mIL7免疫小鼠组的荷瘤生存时间比pVbcr-abl免疫组相对延长。常规病理学分析发现,对照组小鼠的移植瘤组织比较致密,瘤细胞体积较大,形状不规则,而两个免疫组的肿瘤组织较为疏松,肿瘤细胞体积相对较小,并有大量炎性细胞浸润。两个对照组小鼠的肝脏组织内发现有大量肿瘤转移灶,而两个免疫组小鼠则未发现。结论接受bcr-abl基因疫苗免疫的小鼠被诱导产生较强的特异性免疫保护力,对SP2/0/bcr-abl移植瘤的体内生长有一定抑制能力。 姜扬文 钱莉 蒋桂花 刘伟 龚卫娟 季明春关键词:慢性粒细胞白血病 BCR-ABL融合基因 基因疫苗 NOD鼠体内CD_4^+NKG2D^+T细胞与CD_8^+T细胞间关系 2016年 目的探讨NOD鼠体内CD_4^+NKG2D^+T细胞与CD_8^+T细胞间关系。方法动态监测NOD鼠外周血中CD_4^+NKG2D^+T及CD8+NKG2D^+T细胞在不同周龄频率。利用IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,对其外周血中CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T及CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率进行分析。将磁珠分选所得CD_4^+NKG2D^+T细胞分别与经CFSE标记的纯CD_4^+NKG2D-T细胞、CD_8^+T细胞共培养4 d,检测体系中CD_4^+NKG2D-T细胞、CD_8^+T细胞CFSE的荧光强度变化。结果 NOD鼠外周血CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T及CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率均随其1型糖尿病疾病进程发展逐渐升高,且二者之间呈正相关。IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,外周血中CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T细胞频率随CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率降低显著下降。与单独培养的CD_4^+NKG2D-T细胞相比,加入CD_4^+NKG2D^+T细胞的培养体系中,CD_4^+NKG2D-T细胞增殖加快。但CD_4^+NKG2D^+T细胞对CD_8^+T增殖作用不明显。结论 NOD鼠体内存在着一群与1型糖尿病疾病进程正相关的CD_4^+NKG2D^+T细胞,且该群细胞极有可能是通过直接作用于CD_4^+NKG2D-T细胞而间接对CD_8^+T细胞产生作用。 王宇航 马旻轩 徐娅雯 李凯 潘兴元 钱莉 龚卫娟 季明春关键词:CD8^+T细胞 NOD鼠 RANTES拮抗剂的研究进展 被引量:3 2006年 RANTES具有多种生物学活性,不仅对多种细胞有趋化作用,还能增强细胞毒作用。人们试图采用RANTES类似物开发RANTES拮抗剂,RANTES拮抗剂对治疗慢性炎症、减轻移植排斥反应、抑制HIV感染等方面有重要意义。以下就RANTES拮抗剂的研究进展作一综述。 姚玲 龚卫娟 季明春关键词:RANTES 拮抗剂 稳定表达BCR-ABL融合基因片段的鼠SP2/0细胞系的建立 <正>BCR-ABL融合蛋白存在于90%以上的CML患者体内,它与恶性转变及恶性克隆的维持密切相关。而P210BCR-ABL的抗原性限定在其融合位点内,这段氨基酸序列在正常细胞中不存在,因此该序列可作为肿瘤特异性抗原。我... 钱莉 刘伟 蒋桂花 龚卫娟 季明春文献传递 BCR-ABL融合蛋白融合区B细胞表位预测 2006年 以BCR-ABL融合蛋白氨基酸序列为基础,采用EMBOSS软件及DNAstar软件结合Hopp and Woods亲水性参数、Janin可及性参数、极性参数、柔韧性参数及二级结构方案对慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合蛋白(p210^(BCR-ABL))融合区的B细胞表位进行预测。结果表明:BCR-ABL蛋白融合区位于B细胞表位内,该表位含有α-螺旋和无规则卷曲结构。BCR-ABL融合蛋白融合区B细胞表位预测的研究对应用合成肽抗原制备融合区单克隆抗体具有重要的指导意义。 张保平 龚卫娟 潘兴元 季明春关键词:慢性粒细胞白血病 BCR-ABL融合蛋白 B细胞表位 MICA基因多态性及血清可溶性MICA浓度与结肠癌的相关性研究 被引量:4 2010年 目的 观察主要组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(major histocompatibility complex class Ⅰ chain-related gene A,MICA)全长多态性与结肠癌的发病是否关联,以及血清可溶性主要组织相容性复合体Ⅰ类相关抗原A(major histocomptctibility complex class Ⅰ chain-related antigen A,MICA)浓度与结肠癌发病及病程的相关性.方法 应用聚合酶链反应-序列特异性引物及DNA测序分型方法,分析江苏扬州地区117例结肠癌患者和113名健康个体的MICA基因全长多态性及其编码分子第129位氨基酸残基的变化.血清可溶性MICA浓度通过酶联免疫吸附试验方法测定.结果 结肠癌患者和正常群体胞外区和跨膜区MICA等位基因的分布差异均无统计学意义,MICA跨膜区等位基因在不同病期结肠癌患者的分布差异亦无统计学意义.而结肠癌患者群体内MICA第129位氨基酸残基为蛋氨酸的频率显著降低;可溶性MICA浓度在Duke's C和D期患者血清内显著升高.结论 MICA等位基因多态性与结肠癌的发病及进展没有关联,但血清可溶性MICA浓度的检测可作为判断结肠癌预后的指标之一. 龚卫娟 肖炜明 龚春香 田芳 季明春关键词:MICA基因 遗传多态性 结肠癌