付志平
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自噬在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的：研究自噬在吉西他滨（gemcitabine,Gem）诱导胰腺癌细胞SW1990凋亡中的作用,并以氯喹特异性抑制自噬,以探讨其可能机制。方法：采用CCK8法检测Gem对胰腺癌细胞增殖的影响,并用实时定量PCR检测自噬相关基因LC3的表达,以p62免疫荧光染色检测细胞内自噬泡,通过Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1的表达,并用AnnexinⅤ/PI流式细胞方法检测Gem诱导后细胞凋亡的变化。进一步通过氯喹抑制自噬,检测自噬抑制前后细胞增殖、自噬及凋亡的变化。结果：Gem对胰腺癌细胞SW1990增殖具有部分抑制作用,Gem作用能迅速激活细胞自噬从而产生耐药。LC3的mRNA表达升高1.4-2.2倍（P〈0.05）,LC3-Ⅱ蛋白水平升高1.5-2.7倍（P〈0.05）,Beclin 1蛋白含量升高1.2-1.3倍（P〈0.05）。Gem和氯喹联合用药组较Gem单药组细胞凋亡蛋白Caspase-3表达升高,细胞存活率从64.3%±3.1%降低为35.2%±3.4%（P〈0.05）。结论：自噬在Gem诱导胰腺癌细胞凋亡的过程中可能起到保护作用,氯喹抑制自噬后可增强Gem的促凋亡作用。
- 付志平杨卫平李科景晓乾汪炳瑞沈柏用彭承宏邱伟华
- 关键词：胰腺癌细胞自噬吉西他滨凋亡
- ShRNA靶向沉默FGFR3基因对人肝癌细胞Huh7增殖和迁移的影响
- 2014年
- 目的:研究成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)对肝癌细胞株Huh7增殖和迁移能力的影响。方法:以靶向沉默FGFR3的shRNA慢病毒表达载体、delta8.9和VSVG三质粒共转染293T细胞来包装慢病毒颗粒。选择Huh7细胞转导慢病毒载体。通过细胞增殖实验(CCK-8法)和transwell实验,分别评估沉默FGFR3对Huh7肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。裸鼠分别皮下注射pSilencer-FGFR3-shRNA1#组和pSilencer-NC组Huh7细胞后,监测肿瘤生长。Western印迹法检测下游信号蛋白p-AKT和p-ERK。结果:与NC组比较,RNAi组的细胞增殖能力显著下降(P<0.01),裸鼠皮下移植瘤体积较小[shRNA1#组:(210.2±94.6)mm3,NC组:(1 546.0±331.7)mm3,P<0.05];迁移能力亦显著下降[shRNA1#组:(6.3±1.2)个,shRNA2#组:(3.0±0.5)个,NC组:(36.7±4.4)个,P<0.001]。RNAi组p-ERK和p-AKT的蛋白质表达水平显著下降。结论:沉默FGFR3,可能通过抑制ERK和AKT通路,显著降低肝癌细胞的增殖和迁移能力。
- 李科杨卫平付志平汪炳瑞景晓乾沈柏用彭承宏邱伟华
- 关键词：肝细胞癌FGFR3基因SHRNA增殖迁移
- S腺苷甲硫氨酸在肝脏疾病中的研究进展及应用被引量：3
- 2014年
- 自1952年S腺苷甲硫氨酸（S．Adenosylmethionine．SAMe）的化学结构被阐明后．人们对其进行了广泛研究。SAMe是所有细胞中的重要中间代谢产物．特别是在甲基和丙氨基生物转化中起到了核心作用。在生物体代谢系统中．SAMe作为生理性巯基化合物的前体和甲基供体．在体内主要起着转甲基、转硫基和转丙氨基的作用。
- 付志平杨卫平邱伟华
- 关键词：肝脏疾病
- 3-氨基吡啶-2-甲醛硫代缩氨基脲对不同p53状态肝癌细胞中生长抑制及DNA损伤诱导基因45β的诱导差异及其机制
- 2013年
- 目的 探讨3-氨基吡啶-2-甲醛硫代缩氨基脲（Triapine）对不同p53状态肝癌细胞的生长抑制及DNA损伤诱导基因45β（GADD45β）诱导差异及其调控机制.方法 转染p53全序列建立Hep3B＋p53；体外合成GADD45β近端6个启动子序列群（-618 ～-314）,构建荧光素表达质粒,转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B＋p53；以实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）比较Triapine对GADD45β表达诱导及其近端启动子活性影响差异；进一步比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异；并通过半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3的表达变化测定细胞凋亡的发生和发展.结果 Triapine对Hep3B中GADD45诱导并不明显,Hep3B＋p53对Triapine敏感性明显增加,2.5、5.0μmol/L剂量下GADD45/甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）比值分别为0.0425和0.0704,并呈现出剂量-效应的正相关关系.荧光素分析提示Triapine作用Hep3B＋p53后的启动子核因子（NF）-κB（-618/＋6）和E2F-1（-470/＋6）活性较Hep3B明显增强约1.3倍和0.7倍.Triapine能够更加明显地抑制Hep3B ＋p53的DNA合成能力和细胞克隆形成能力,5μmol/L Triapine对Hep3B ＋p53DNA合成的抑制率为40.89％,对细胞克隆形成能力的抑制率达到68.16％,与Hep3B比较差异有统计学意义（P＜0.05）.Triapine作用后Hep3B＋p53的Caspase-3能迅速激活,活性高峰提前出现于6h.结论 p53在核糖核苷酸还原酶抑制剂化疗药物对肝癌细胞的GADD45诱导中具有重要作用,其作用机制可能是增强转录调节因子的表达水平.
- 葛覃房嫣杨卫平付志平李科佟辉施敏敏邱伟华
- 关键词：肝癌P53启动子
