刘军伟
- 作品数：10 被引量：20H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅资助项目国家重点基础研究发展计划浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- B7-H1在胰腺癌免疫逃避中的作用研究被引量：2
- 2009年
- 目的检测B7-H1和IL-10在胰腺癌组织中的表达情况，并分析两者表达水平的相关性，以探讨肿瘤局部IL-10的异常增高和B7-H1表达的关系。方法应用RT-PCR、Western blot和免疫组织化学法检测35例胰腺癌组织、相应癌旁组织和5例正常胰腺组织中B7-H1及IL-10的表达情况，并分析其相关性。结果在胰腺癌、癌旁和正常胰腺组织中，B7-H1和IL-10在mRNA及蛋白水平的表达呈现出明显由高至低的趋势，且两两之间比较均具有明显差异（P〈0．05），免疫组织化学结果也同样证实了胰腺癌中高表达B7-H1和IL-10，阳性率分别为60．5％±12．7％和65．3％±16．2％，而正常组织中未检测到表达。同时，相关性分析中显示肿瘤组织B7-H1高表达与IL-10水平呈明显正相关，分别表现在mRNA表达水平（P=0．008，r=0．841）和蛋白表达水平（P=0．007，r=0．838）。结论胰腺癌细胞上调表达B7-H1可能是肿瘤局部高浓度IL-10形成的原因之一，由此导致的抗肿瘤免疫能力降低可使肿瘤细胞逃避免疫系统的杀伤作用。
- 黄东胜刘军伟耿磊蒋国平沈国樑姚伟峰
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤逃逸基因
- LPS诱导胰腺癌细胞Panc-1表达B7-H1被引量：1
- 2011年
- 目的:研究胰腺癌细胞株Panc-1在应用脂多糖(LPS)刺激前后B7-H1表达的变化,并探讨其可能的分子机制。方法:LPS刺激以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的特异性抑制剂处理Panc-1细胞前后,应用Western blotting检测MAPKs信号通路中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)和c-Jun氨基端激酶(JNK)磷酸化水平的变化,real-time PCR和Western blotting检测B7-H1 mRNA和蛋白的表达变化。结果:LPS刺激后B7-H1的表达显著上调,p38、ERK和JNK的磷酸化水平也明显上调,加入MAPKs特异性的抑制剂后,LPS诱导的p38、ERK和JNK的磷酸化被抑制,并且在p38和ERK的抑制剂处理后,B7-H1的表达也明显被抑制,而在JNK的抑制剂处理后B7-H1的表达没有显著变化。结论:LPS可以诱导胰腺癌细胞株Panc-1表达B7-H1,并且p38和ERK的活化在LPS诱导的B7-H1的表达过程中起着重要作用。
- 马君黄东胜金洪传刘军伟沈国梁汪帆
- 关键词：B7-H1脂多糖类MAPKS
- COX-2调节HIF-1α和VEGF在人胰腺癌中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的检测环氧合酶-2、低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在胰腺癌组织中的表达情况，并进一步研究选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对胰腺癌BxPC-3细胞株中这3种蛋白表达的影响，探讨环氧合酶-2在胰腺恶性肿瘤血管生成过程中的作用及意义。方法应用Western blotting检测12例胰腺癌及相应癌旁组织中环氧合酶-2、低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子蛋白的表达情况，应用不同浓度（分别为DMSO组，50／μmol／L，100μmol／L组和200μmol／L组）尼美舒利作用于BxPC-3细胞24h后，提取细胞蛋白行Western blotting，观察3种蛋白表达水平的变化。结果12例胰腺癌组织标本中均检测到有环氧合酶-2蛋白的高表达，相比之下，癌旁组织中则相对低表达甚至未表达，低氧诱导因子-1a和血管内皮生长因子蛋白也存在相同情况，即在癌组织中的表达要明显高于癌旁组织。而在尼美舒利不同浓度作用于胰腺癌BxPC-3细胞后，可明显抑制3种蛋白的表达水平（P〈0．01），并呈剂量依赖性。结论胰腺癌组织中环氧合酶-2、低氧诱导因子-1a和血管内皮生长因子呈过量表达，提示环氧合酶-2可能与胰腺肿瘤血管生成有关，而选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利可抑制这3种蛋白的表达水平，这可能为其抗肿瘤新生血管形成的机制之一。
- 黄东胜刘军伟王高卿陈建锋耿磊谢海洋
- 关键词：胰腺肿瘤环氧合酶-2低氧诱导因子-1Α
- ADAM9在胃癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2011年
- 胃癌是现今发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一,手术切除是治疗胃癌的最主要的方法,但对于失去手术机会的中晚期患者,化学治疗仍然是最重要的方法.
- 陈建明庄时刚刘军伟屠世晔
- 关键词：胃癌化学治疗手术切除晚期患者病死率
- 硫氧化还原蛋白在胰腺癌中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨硫氧化还原蛋白在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况及其临床意义。方法分别采用RT—PCR和Western印迹检测胰腺癌及癌旁组织中硫氧化还原蛋白的mRNA和蛋白表达量。结果RT—PCR结果显示硫氧化还原蛋白mRNA在胰腺癌组织中过表达（RI=0．80±0．08），在癌旁组织中低表达（RI=0．39±0．15）；Western印迹结果同样提示硫氧化还原蛋白在胰腺癌组织中的表达（PrI=0．81±0．10）明显高于癌旁组织（PrI=0．30±0．11），两者相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。进一步结合临床资料分析，发现胰腺癌组织中硫氧化还原蛋白表达量与性别、病变部位和组织分化程度无关（P〉0．05），而与肿瘤TNM分期密切相关，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论硫氧化还原蛋白在缺氧和氧化应激环境下促进肿瘤细胞存活和胰腺癌的进展，在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的介导作用。
- 王建军黄东胜刘军伟谢海洋吴丽花严盛
- 关键词：胰腺肿瘤
- B7H1在胰腺癌panc-1细胞的表达及其功能研究被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨胰腺癌细胞株panc-1中B7同源物1(B7H1)的表达及其对T细胞增殖活化的调节作用。方法:分别应用RT-PCR和流式细胞术检测B7H1在γ-干扰素(IFN-γ)处理或B7H1小干扰RNA(siRNA)转染前后panc-1细胞中的表达。采用植物血凝素(PHA)刺激人外周血T细胞体外增殖,加入IFN-γ处理或B7H1-siRNA转染前后panc-1细胞混合培养72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测T细胞的增殖,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测共培养上清中的IFN-γ、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)的分泌。结果:panc-1细胞组成性表达B7H1。IFN-γ处理可以显著上调B7H1表达,抑制共培养T细胞的增殖和IFN-γ、IL-2分泌,但是促进IL-10的分泌。相反,应用B7H1-siRNA阻断B7H1表达后则显著促进T细胞增殖和IFN-γ、IL-2的分泌,但下调IL-10的分泌。结论:B7H1分子在体外通过抑制T细胞增殖和Th1类细胞因子分泌来下调T细胞功能。应用siRNA技术阻断B7H1有望成为治疗胰腺癌的新途径。
- 吴清松黄东胜刘军伟金洪传沈国梁
- 关键词：胰腺肿瘤RNA干扰T淋巴细胞细胞因子类
- PPARγ、STAT-3和BAD在肝细胞肝癌的表达及相互作用研究被引量：2
- 2007年
- 目的研究肝细胞肝癌中过氧化物酶体增殖物活化受体（peroxlsome proliferators activated receptorsγ，PPARγ）、信号转导和转录激活因子3（STAT-3）及bcl-2相关促凋亡蛋白（BAD）的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting技术分别对30例肝细胞肝癌,相应癌旁组织和正常组织包括部分硬化组织中上述动三种指标的mRNA及蛋白含量进行半定量分析,将结果与临床资料进行统计分析。结果PPARγ、STAT-3及BAD mRNA和蛋白在肝细胞肝癌,癌旁和正常组织中的表达有统计学意义,其中mRNA表达分别为PPARγ（χ^2=77.268,P〈0.05）,STAT-3（F=370.187,P〈0.05）,BAD（F=82.647,P〈0.05）,蛋白表达分别为PPARγ（χ^2=7,590,P〈0.05）,STAT-3（χ^2=22.419,P〈0.05）,BAD表达与组织分化程度有关（（F=141.625,P〈0.05）,其中mRNA分别为PPARγ（t=-2.628,P〈0.05）,STAT-3（t= -3.810,P〈0.05）,BAD（t=5,042,P〈0.05）,蛋白分别为PPARγ（M=0.000,P〈0.05）,STAT-3 （t=-3.759,P〈0.05）,BAD（M=61.500,P〈0.05）与肿瘤大小,瘤栓有无,微转移灶及是否发生复发转移等无关。PPARγ与STAT-3mRNA及蛋白表达均为正相关（r=0.750,P〈0.05,r=0.717,P〈0.05）。PPARγ与BAD mRNA蛋白表达均为负相关（r=-0.401,P〈0.05,r=-0.417,P〈0.05）。STAT-3与BADmRNA蛋白表达均为负相关（r=-0.617,P〈0.05,r=-0.485,P〈0.05）。结论PPARγ、STAT-3在肝细胞肝癌高表达而BAD低表达并与其组织分化和发展有关。
- 黄东胜刘新刘军伟陈建峰王建军王高卿王耀
- 关键词：肝细胞过氧化物酶体增殖物活化受体STAT-3BAD
- TRX与STAT-3在肝细胞肝癌高表达及相互作用研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究TRX、STAT-3基因及蛋白表达情况与肝细胞肝癌临床病理特征的关系，并分析二者之间的相互关系及在肝细胞肝癌中的作用。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blotting技术分别对30例肝细胞肝癌，相应癌旁组织和正常组织包括部分硬化组织中上述两种指标的mRNA及蛋白含量进行半定量分析，将结果与临床资料进行统计分析。结果TRX及STAT-3mRNA和蛋自在肝细胞肝癌、癌旁、正常组织差异表达具有统计学意义并与组织分化程度有关（P〈0．05）而与其它临床病理特征无明显相关，二者之间具有正相关性，mRNA结果为r：0．380，P=0．038；蛋白结果为r=0．468，P=0．009，（P％0．05）。结论TRX及STA-3在肝细胞肝癌高表达并与其发生发展有关，二者单独或二者之间共同的相互作用可能参与肝细胞肝癌恶化的调控，为肝细胞肝癌发生发展的途径研究提供了新的思路。
- 黄东胜刘新刘军伟陈建峰王建军高卿王耀
- 关键词：STAT-3
- AG1024对肝癌细胞系增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-IR）酪氨酸激酶阻断剂AG1024（3-溴-5-叔丁基-4-羟基苯叉苹果酸腈）对人肝癌癌细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用。方法采用MTT、流式细胞术、细胞侵袭实验、RT—PCR和Westernblot等方法检测在不同浓度（0～40μmol／L）的AG1024作用下，人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的细胞形态学及分子生物学特性的改变。结果MTT检测显示，AG1024剂量依赖性地抑制肝癌细胞的增殖。流式细胞术提示，AG1024明显促进肝癌细胞的凋亡。Transwell小室侵袭实验显示，AG1024能明显抑制肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的侵袭能力，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，肝癌细胞中IGF—IR呈高表达，不同浓度AG1024作用后，剂量依赖性地增加细胞色素C的表达。Western blotting结果显示，AG1024降低胞外途径信号调节激酶（extracellular signal—regulated kinase，ERK）的磷酸化水平，下调procaspase-3的表达，而总ERK保持不变。结论AG1024阻断胰岛素样生长因子1型受体，从而阻断其下游的信号传导途径，抑制肝癌细胞的增生，诱导凋亡。
- 黄东胜姚伟锋刘军伟沈国樑
- 关键词：肝细胞细胞凋亡受体酶抑制剂
- 小白菊内酯对胰腺癌细胞BxPC-3增殖和凋亡的影响及机制被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨小白菊内酯对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:应用MTT法观察不同浓度小白菊内酯对BxPC-3细胞增殖的影响;流式细胞术及DNA梯状电泳(DNA ladder)检测BxPC-3细胞凋亡的改变;Western blotting法检测不同浓度小白菊内酯作用下BxPC-3细胞COX-2蛋白水平的改变,RT-PCR法检测COX-2 mRNA水平的变化。结果:MTT、流式细胞术及DNA ladder显示小白菊内酯呈剂量依赖性地抑制BxPC-3细胞的增殖,并诱导其凋亡;Western blotting和RT-PCR法显示随着药物浓度的增加,COX-2蛋白及mRNA表达降低。结论:小白菊内酯对人胰腺癌BxPC-3细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,这种效应可能与COX-2表达有关。
- 黄东胜刘军伟陈建峰刘新王高卿王耀谢海洋
- 关键词：小白菊内酯胰腺肿瘤环加氧酶-2
