刘博 作品数:5 被引量:3 H指数:1 供职机构: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市浦江人才计划项目 上海市基础研究重大(重点)项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
溶瘤腺病毒靶向杀灭葡萄膜黑色素瘤的实验研究 2014年 葡萄膜黑色素瘤是成人最严重的原发性恶性肿瘤之一.传统的治疗方法,包括手术、放射治疗和化学治疗效果都不是很理想.溶瘤腺病毒H101,能够特异性地在p53突变的肿瘤细胞中复制并杀伤肿瘤细胞,同时对正常细胞影响较少,且已由中国国家食品药品监督管理总局批准上市.为了研究H101对葡萄膜黑色素瘤的治疗效果,通过体外感染葡萄膜黑色素瘤细胞,发现H101能够显著抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖并促进细胞凋亡,抑制细胞周期,而对正常的ARPE-19细胞没有影响.在体内实验中,建立了SP6.5细胞的荷瘤小鼠模型,在H101治疗后抑制了肿瘤的生长,延长了动物寿命.上述结果表明,溶瘤腺病毒H101治疗葡萄膜黑色素瘤是一种可行的方法. 刘博 陈泓宇 王静宜 黄蓉双 陈颖 姚玉亭 宋欣 徐晓芳 贾仁兵 张赫 葛盛芳 范先群关键词:葡萄膜黑色素瘤 溶瘤腺病毒 H101 靶向敲除JARID2基因对葡萄膜黑色素瘤细胞生长与转移的影响 被引量:2 2015年 目的探讨JARID2基因在葡萄膜黑色素瘤细胞生长和转移中的作用。方法采用real-time PCR检测葡萄膜黑色素瘤细胞系OM431和SP6.5中JARID2 mRNA的表达。利用shRNA敲除OM431和SP6.5的JARID2基因,构建稳定转染细胞系sh SP6.5和sh OM431,Western blotting检测JARID2蛋白表达变化,观察靶向敲除JARID2基因对葡萄膜黑色素瘤细胞生长、转移及体外克隆形成的影响。结果 OM431和SP6.5细胞中JARID2 mRNA呈过表达。Western blotting检测结果显示:与OM431和SP6.5细胞比较,sh OM431和sh SP6.5细胞中JARID2蛋白表达显著减少。靶向敲除JARID2基因的葡萄膜黑色素瘤细胞的生长受到抑制,细胞转移数量减少,体外克隆形成率降低。结论 JARID2基因在葡萄膜黑色素瘤细胞的生长、转移和克隆形成能力中起着重要的作用。 刘博 邱纯 李鹏 毕建军 吴晴 钮蓓蓓关键词:葡萄膜黑色素瘤 肿瘤转移 miR-126慢病毒表达载体构建及其对脐静脉内皮细胞增殖的影响 2014年 目的:构建miR-126的慢病毒表达载体,包装生产重组慢病毒,转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),研究高表达miR-126对HUVEC增殖的影响.方法:从293TN细胞中提取人基因组DNA为模板,PCR扩增miR-126前体序列并克隆至表达载体(pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP),构建miR-126的慢病毒表达载体.使用脂质体转染的方法将miR-126慢病毒表达载体以及慢病毒包装质粒混合物(LPPM)共转染293TN细胞,进行慢病毒包装并测定病毒滴度.使用重组慢病毒Lv-miR-126和对照病毒(Lv-Control)感染HUVEC 72 h后通过Real Time-PCR和免疫印迹检测细胞内miR-126与血管内皮生长因子(VEGF-A)相对含量;MTT检测HUVEC增殖活性的变化.结果:成功调取miR-126前体序列并克隆至表达载体.成功进行了Lv-miR-126重组病毒的生产和滴度测定.Lv-miR-126感染HUVEC后,能够明显增强细胞内miR-126的相对含量,VEGF-A的表达水平则显著降低,蛋白含量下降约60%;同时明显抑制HUVEC的增殖活性,基因干预后48、72 h,细胞增殖活性均明显低于相同时间点对照病毒感染组,差异有统计学意义.结论:在HUVEC中过表达miR-126,可抑制VEGF-A表达,并且抑制内皮细胞增殖. 刘博 邓伟峰 吕慧关键词:MIR-126 慢病毒表达载体 脐静脉内皮细胞 细胞增殖 血管内皮生长因子 丹参酮ⅡA下调血管内皮生长因子及其受体抑制斑马鱼血管发育 被引量:1 2014年 目的:研究丹参酮ⅡA对斑马鱼血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR2)和血管发育的影响.方法:将丹参酮ⅡA处理的胚胎作为实验组,以0.5%二甲基亚砜(DMSO)作为对照组.受精后24 h(24 hpf)观察药物对转基因斑马鱼血管发育的影响,荧光显微镜观察新生血管状态,记录血管长度.分别从0、6、12和24 hpf时相的药物处理后的斑马鱼胚胎中提取总的RNA,采用实时定量RT-PCR方法检测VEGF及VEGFR2的表达变化.结果:丹参酮ⅡA可明显抑制斑马鱼血管发育,且在100 μg/ml和200 μg/ml浓度下可发挥抑制作用,无浓度递增关系.实验组较对照组VEGF及VEGFR2表达量降低,在药物作用的12 hpf和24 hpf具有显著性差异.结论:丹参酮ⅡA可下调VEGF及VEGFR2的表达,抑制斑马鱼血管发育. 刘博 吕慧 王国坤 吴峰 李松华 秦永文关键词:血管生成 血管内皮生长因子 斑马鱼 独眼畸形三倍体死胎一例 2024年 独眼畸形通常由于胚胎两眼原基未完全分离或者前脑中部发育障碍,导致两侧原始视泡向中线融合引发,是前脑无裂畸形相关面部畸形中最严重的一种表现。报告1例妊娠16周独眼畸形死胎病例,该例孕妇妊娠14+3周时行胎儿颈后透明层检查发现头颅内异常液性暗区,妊娠终止后引产儿面部可见单眼眶及其上方的前额鼻肉柱,经基因组拷贝数变异测序(copy number variation sequencing,CNV-seq)分析发现染色体三倍体变异、嵌合比约32%的X染色体嵌合重复以及嵌合比约32%的Y染色体嵌合缺失。独眼畸形的病因具有异质性,目前其发病机制尚未明确,妊娠期影像学检查和产前诊断为常用检查方法,在诊断后应尽早终止妊娠,减轻孕妇身心损害及社会医疗经济负担。 罗停 刘博 周仲民 侯舒惠 刘瑾钰 彭梅关键词:眼畸形 胎儿 产前诊断 三倍体 死胎