刘珠果
- 作品数：54 被引量：71H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 中国南海石头鱼毒素NeoVTX的分离纯化、基因克隆及表达被引量：5
- 2014年
- 目的:分离并鉴定石头鱼粗毒液毒性成分,克隆其序列并进行原核表达。方法:利用SDS-PAGE及凝胶过滤HPLC分离石头鱼粗毒液,质谱鉴定其序列;利用RACE技术钓取毒素基因;将获得的毒素cDNA连入pET-22b(+)载体,转化宿主细胞大肠杆菌,经IPTG诱导表达,用亲和层析纯化目的蛋白。结果:从石头鱼粗毒液中分离到NeoVTX等多种蛋白质,克隆了NeoVTXα和β亚基的cDNA序列,获得了纯度为95%以上的重组α亚基蛋白。结论:中国南海石头鱼粗毒液的主要成分为NeoVTX,其α、β亚基序列与日本冲绳海域石头鱼NeoVTX的α和β亚基具有很高的同源性;大肠杆菌菌株可稳定表达α亚基。该工作为NeoVTX抗体制备奠定了基础。
- 张龙霄刘珠果郑兴戴秋云
- 关键词：毒素CDNA序列重组蛋白
- 刺毒鱼毒素研究进展被引量：6
- 2013年
- 刺毒鱼是具有发达棘刺的有毒鱼类,其由表皮组织转化而成的毒腺能分泌毒液,毒液通过棘刺注入猎物体内,引起剧痛、痉挛、红肿、呕吐、溶血、心肌麻痹和血压下降等症状。已发现的刺毒鱼毒素主要来自鲉鱼、鲶鱼、江魟、鲈鱼等,其毒性组分主要为具有溶血活性、酶活性及神经毒性的蛋白质或多肽。目前仅有一种石头鱼(stonefish)抗毒素用于临床。本文就刺毒鱼的种类、毒素生化及药理特征的最新进展作一简要综述。
- 张龙霄刘珠果戴秋云
- 关键词：毒素生化特征毒理
- 中国南海芋螺新毒素基因的发现
- ＜正＞芋螺属腹足纲软体动物,全世界约有500余种,遍布世界各暖海区,我国有芋螺100多种,主要分布在我国的西沙群岛、海南岛及台湾海域。芋螺毒素是由芋螺毒液管和毒囊内壁的毒腺所分泌,每种芋螺的毒液中含50—200个活性多肽...
- 刘珠果胡洁冯桂学徐宁于正吴晓玲赵重甲董铭心戴秋云
- 文献传递
- 表达SARS冠状病毒受体人ACE2转基因小鼠的建立被引量：3
- 2008年
- 目的:建立表达SARS冠状病毒的功能性受体人ACE2的转基因小鼠。方法:克隆人2型血管紧张素转换酶(hACE2)的cDNA,连入PCAGGS构建转基因表达载体,以显微注射的方法将5.6kb的转基因片段引入小鼠的受精卵。采用PCR、Southern印迹、RT-PCR、Western印迹、免疫荧光染色的方法对转基因小鼠进行鉴定。结果与结论:获得了在小鼠肺组织中表达有SARS病毒功能性受体hACE2的两个转基因小鼠系,证明了SARS病毒的S蛋白能很好地和转基因小鼠肺组织中表达的hACE2受体结合,这将为SARS的研究提供一种良好的感染动物模型。
- 刘珠果吴晓洁周艳荣杨晓黄培堂林福玉陈红星
- 关键词：SARS病毒基因表达
- IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响被引量：16
- 2005年
- 研究了IGF-I、bFGF、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应(1)20ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著的高于对照组和10、30、40、50、100ng·ml-1组[(85.3±2.11)%,(85.4±2.81)%;(71.1±1.91)%,(62.5±0.98)%;(77.5±2.5)%,(59.1±3.93)%;(61.9±1.72)%,(54.3±3.48)%;(58.6±4.26)%,(53.1±1.23)%;(44.4±5.10)%,(49.8±3.55)%;(33.9±3.48)%,(46.1±3.59)%,P<0.05),当IGF-I的浓度达到100ng·ml-1时,成熟率(33.9±3.48)%和卵裂率(46.1±3.59)%降低,与其它各组相比差异显著(P<0.05)。(2)20ng·ml-1的bFGF的成熟率(85.0±1.70)%和卵裂率(85.0±2.82)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(3)15ng·ml-1的TGF-α的成熟率(86.9±0.46)%和卵裂率(86.3±2.01)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(4)15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1bFGF联用组,卵母细胞成熟率和分裂率显著高于20ng·ml-1bFGF和20ng·ml-1IGF-I联合组;15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1IGF-I联合组;与20ng·ml-1bFGF、20ng·ml-1IGF-I和15ng·ml-1TGF-α三者联用组。[(89.2±1.44)%和(88.8±0.17)%.(75.6±0.98)%和(78.3±1.65)%;(77.2±2.54)%和(80.2±2.26)%;(76.4±1.28)%和(77.4±3.73)%,P<0.05]。
- 刘珠果尚书江阎新龙吴晓洁邓继先
- 关键词：BFGFTGF-Α卵母细胞体外成熟IGF-I猪卵母细胞
- 利用精子载体方法生产mt-PA转基因山羊
- 精子介导基因转移方法具有操作简单和适用范围广泛等优点,但该方法在不同动物以及不同研究者中的实验结果差异很大,甚至截然相反.本实验以标记的DNA片段为示踪材料,就精子与外源DNA相互作用的基本特征及影响因素进行了研究.结果...
- 叶华虎刘珠果卢建申林福玉周艳荣邓继先
- 关键词：精子载体法转基因山羊基因标记外源DNA
- 文献传递
- 三种α型芋螺多肽及其应用
- 本发明公开了一种α型芋螺多肽及其应用。本发明提供了七种多肽：多肽I：氨基酸序列如序列表的序列7所示，且最后一位氨基酸残基酰胺化；多肽II：氨基酸序列如序列表的序列8所示，且最后一位氨基酸残基酰胺化；多肽III：氨基酸序列...
- 刘珠果戴秋云孙婷吴巧玲胡洁于正
- 文献传递
- 新A超家族芋螺毒素Bt14.10的克隆及合成研究被引量：2
- 2014年
- 目的从我国南海西沙附近海域的桶形芋螺(Conus betulinus)中克隆出新型A-超家族芋螺毒素Bt14.10,并利用化学方法合成该毒素,鉴定其二硫键连接方式。方法提取桶形芋螺毒腺管基因组DNA,基于非翻译区及内含子序列设计合成引物进行PCR,获得Bt14.10的序列。采用Fmoc-固相法合成线性肽Bt14.10,通过空气氧化折叠获得含二硫键的折叠产物,利用两步折叠法测定其二硫键连接方式。结果发现一种新的A超家族芋螺毒素DNA序列Bt14.10,其编码的成熟肽序列为CAHSVPGMHPCKCNNTC-NH2,二硫键连接方式为"C1-C3,C2-C4"。结论BT14.10是一种新型A超家族芋螺毒素,具有A超家族芋螺毒素较为少见的ⅪⅤ型半胱氨酸骨架结构。
- 王菲张龙霄李靓刘珠果戴秋云
- 关键词：克隆内含子二硫键
- 强效无致瘾镇痛剂S0-3的发现、作用靶点及临床前研究
- 利用Race方法及ω-芋螺毒素信号肽保守序列,从中国南海线纹芋螺毒腺中获得新型ω-芋螺多肽SO-3的基因序列, 该肽含25个氨基酸残基(CKAAGKPCSRIAYN CCTGSCRSGKC-NH2)、三对二硫键.随后我们...
- 戴秋云周晓巍黄培堂卢柏松王红王菲董铭心刘珠果吴晓玲刘凤云周艳荣于芳赵东肖彩魏娟娟余硕李拓周志杰宁胡莹黄翠芬
- 马尔堡病毒GP蛋白高抗原性片段筛选及免疫性研究被引量：3
- 2017年
- 目的从马尔堡病毒GP蛋白上寻找与GP免疫原性相当的小片段用于疫苗设计,以克服全长蛋白缺陷。方法基于GP(aa:1~681)结构及功能分区,构建3个片段[GP1△(aa:25~239)、GPM(aa:250~520)、GP2△(aa:436~648)],经原核表达后免疫小鼠,不同时间检测血清特异抗体滴度,检测脾淋巴细胞增殖指数及测定细胞因子浓度。结果 ELISA检测结果显示,GP2△组与GP混合组(GP1△+GPM+GP2△)产生体液免疫能力相当,明显高于GP1△与GPM组(P<0.05);Con A非特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的SI值高于GP混合组(P<0.05),GP混合组特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的刺激指数(SI)值低于GP混合组(P<0.05);细胞因子检测中,GP2△组的白细胞介素2(IL-2)及干扰素γ(IFN-γ)浓度均高于对照组,低于GP混合组(P<0.05)。结论马尔堡病毒GP2△片段免疫小鼠能诱导与完整GP蛋白相当的体液免疫,同时也能诱导一定的细胞免疫,可用来替代完整GP用于疫苗设计。
- 李拓刘珠果张跃戴秋云
- 关键词：马尔堡病毒
