刘芸
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中山大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定被引量：6
- 2005年
- 目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白。方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素编码区基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆入pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α进行表达、纯化及活性测定。结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性。结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础。
- 杨芳何援利姜孝玉刘芸彭冬先宗利丽
- 关键词：人内皮抑素基因克隆纯化抗血管生成作用
- 纯钛微纳米复合形貌对成骨细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2015年
- 目的对比研究纯钛表面不同微纳米图案对成骨细胞生物学活性的影响,探讨微米与纳米结构在影响细胞行为当中的不同作用。方法制备4组纯钛微纳米复合表面形貌:喷砂(S)、喷砂-酸蚀(SLA)、喷砂-碱热(SAH)及喷砂-阳极氧化(SAN)。检测各组材料表面理化性能,扫描电镜观察各组材料表面形貌及细胞黏附形态,CCK-8法测定细胞在材料表面增殖能力,碱性磷酸酶(ALP)活性检测细胞在材料表面分化能力。利用单因素方差分析进行统计分析,最小有意义差异(LSD)t检验对同时间点不同组的CCK-8及ALP结果进行比较。结果 (1)粗糙度结果示:SLA组粗糙度大于其余3组,差异有统计学意义(F_(Ra)=38.449,P_(Ra)<0.001;F_(Rq)=29.564,P_(Rq)<0.001)。(2)扫描电镜示:S组仅形成弹坑状一级微米结构,黏附细胞伪足短小,SLA、SAH及SAN组分别修饰沟壑状、网状及管状二级纳米多孔图案,细胞于SAH、SAN组表面伪足更为伸展,其中SAH组表面细胞伪足生长进入孔隙形成机械锁结。(3)CCK-8结果示:第5天,SAH和SAN组细胞增殖A值(1.546和1.528)显著高于S组(1.31),差异有统计学意义(F=3.229,P=0.042);第7天时,SAH和SAN组细胞增殖A值(2.646和2.57)显著高于S组(2.24),差异有统计学意义(F=3.51,P=0.035)。(4)细胞分化检测示:接种7 d后,SAH组ALP活性(77.656)显著高于S、SLA及SAN组(53.132、51.052和62.207),差异有统计学意义(F=29.734,P<0.001);接种14 d后,SAH与SAN组ALP活性(104.107和109.963)显著高于S与SLA两组(82.885和73.303),差异有统计学意义(F=46.052,P<0.001)。结论钛片表面微纳米图案影响细胞伪足形态,促进细胞增殖及ALP活性,其中多孔形貌显著增加细胞活性,碱热处理表面早期ALP活性显著增加,且形成纳米网比纳米管更有利于形成机械锁结。
- 许嘉允邓飞龙庄秀妹欧阳江林刘芸王婧李夏晨
- 关键词：表面改性微纳米结构纯钛纳米管
- 牙周炎患者种植体即刻负载的研究进展被引量：1
- 2012年
- 即刻负载由于可以为患者提供即刻的功能和美观而成为近年来的研究热点。牙周炎患者作为一个广泛的特殊患者群体,长期以来学者在其种植修复方面持保守态度。然而近年来,随着种植技术的发展以及种植材料的进步,越来越多的学者对牙周炎患者采用即刻负载并获得了成功。有学者进一步指出:将即刻种植与即刻负载联合应用,可以在最短的治疗时间内获得最佳的疗效。本文就国内外学者对牙周炎患者即刻负载的研究进展作一综述。
- 刘芸邓飞龙
- 关键词：牙周炎
- 一种新的线纹芋螺毒素序列、制备方法及其应用
- 本发明涉及一种新的中国南海线纹芋螺毒素基因及其编码的多肽序列S6.8，该多肽的制备技术，以及该毒素在神经生物学研究和离子通道药物开发中的应用。本发明通过构建cDNA文库的方法，从中国南海线纹芋螺毒管中克隆得到的新的O－超...
- 徐安龙刘芸王磊董美玲
- 文献传递
- 前牙区即刻种植即刻修复病例报道
- 刘芸邓飞龙
- 人内皮抑素endostatin基因的融合表达纯化及活性测定
- 2005年
- 目的:获得有活性的人内皮抑素(endostatin)融合蛋白. 方法:从人胎肝组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出endostatin基因,定向克隆重组入pTRX表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,纯化,MTT法测定endostatin蛋白对人脐带静脉血管内皮细胞的抑制活性. 结果:RT-PCR获得endostatin基因,扩增产物在10 g/L 琼脂糖凝胶上显示为1条扩增条带,约573 bp,与预计大小一致.将PCR产物连入PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,阳性克隆经KpnⅠ,NotⅠ酶切鉴定、测序验证.构建pTRX-endo表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中的表达,经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,大小与预期相符合.重组蛋白经纯化,MTT 法测定重组人内皮抑素蛋白具有生物学活性.人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)受到明显抑制,具有剂量依赖抑制关系,ED50=550μg/L. 结论:人内皮抑素基因在原核细胞表达载体pTRX中获得成功表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)的增殖.
- 杨芳何援利刘芸
- 关键词：ENDOSTATIN基因活性测定BL21(DE3)人内皮抑素基因原核细胞表达
- 一种新的线纹芋螺毒素序列、制备方法及其应用
- 本发明涉及一种新的中国南海线纹芋螺毒素基因及其编码的多肽序列S6.8，该多肽的制备技术，以及该毒素在神经生物学研究和离子通道药物开发中的应用。本发明通过构建cDNA文库的方法，从中国南海线纹芋螺毒管中克隆得到的新的O-超...
- 徐安龙刘芸王磊董美玲
- 文献传递
- 单颗前牙种植全瓷修复的临床观察
- 目的：探讨单颗前牙种植全瓷修复的临床效果.方法：收集单颗前牙种植修复患者11例，行氧化锆基台与全瓷冠修复，通过回访观察种植体骨结合情况、义齿白色美学与牙龈粉红色美学效果.随访时间为1～3年.结果：1例患者因前伸(牙合)干...
- 刘芸邓飞龙
- 关键词：瓷基台前牙种植牙龈美学
- 人分泌型内皮抑素质粒的构建及序列测定被引量：4
- 2005年
- 目的 :旨在获得人内皮抑素 (endostatin)分泌型基因片段。 方法 :合成含信号肽的上游引物 ,用聚合酶链反应技术克隆人分泌型内皮抑素基因 ,10g/L琼脂糖凝胶电泳后回收 ,将其重组入PGEM T载体 ,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。 结果 :经Genbank分析证实 ,所获得的 6 4 5bp基因片段序列属于信号肽及人内皮抑素功能区段基因 ,翻译为蛋白质序列正确。 结论 :本研究为应用内皮抑素基因进行肿瘤的抗血管生成治疗奠定了基础。
- 杨芳何援利姜孝玉刘芸彭冬先宗利丽
- 关键词：内皮抑素基因聚合酶链反应
