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葡萄糖调节蛋白78在乳腺癌细胞侵袭及转移中的作用被引量：3: 2008年; 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在乳腺癌细胞(231)侵袭、转移过程所起的作用。方法构建GRP78真核反义表达载体,转染入231细胞,利用PCR和蛋白印迹方法检测转染有反义GRP78的231细胞和MCF-7细胞的GRP78表达情况;并用伤口愈合实验和体外侵袭实验证验转染细胞转移和侵袭的变化。结果转染反义GRP78的231细胞内GRP78RNA和蛋白表达明显低于未转染细胞;反义GRP78基因对乳腺癌细胞231细胞的侵袭和转移有抑制作用。结论GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,下调GRP78基因表达能明显抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移能力。GRP78为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。; 刘荣华王世宣马湘一罗丹枫王梅卢运萍马丁; 关键词：乳腺肿瘤葡萄糖调节蛋白78

二肽基肽酶对前列腺癌细胞系1E8侵袭转移的影响被引量：2: 2008年; 目的:探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。方法:用亚克隆技术构建DDPⅣ基因反义真核表达质粒,脂质体法将其分别转入高转移潜能的人前列腺癌细胞1E8,并应用脂质体介导的基因转摘要目的:探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。方法:用亚克隆技术构建DDP染技术,将重组质粒导入1E8细胞中,应用细胞增殖抑制试验(CCK-8)、蛋白印迹和体外侵袭实验等方法观察了1E8细胞转染前后,细胞生长、DDPⅣ蛋白表达以及细胞体外侵袭能力等指标的变化。结果:成功构建了反义DDPⅣ真核表达载体;将其转染入1E8细胞36h、48h后,反义DDPⅣ基因对前列腺癌细胞的侵袭和转移有促进作用;DDPⅣ基因表达下调能使1E8细胞的体内外侵袭能力增强。结论:DDPⅣ是前列腺癌的一个抑癌基因,在前列癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,下调DDPⅣ基因表达能明显促进前列腺癌细胞的侵袭和转移能力。提示DDPⅣ可作为前列腺癌抗侵袭治疗的分子靶点。; 刘荣华王世宣马湘一王梅卢运萍马丁; 关键词：前列腺癌肿瘤转移基因二肽基肽酶

卵巢上皮性癌中mTOR信号通路蛋白的表达及其临床意义被引量：3: 2011年; 目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义。方法:选取武汉同济医院妇产科2005～2008间手术切除并经病理证实的人卵巢上皮性癌63例,其中Ⅰ级12例、Ⅱ级15例、Ⅲ级23例、Ⅳ级13例,应用免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织中mTOR信号通路关键蛋白pm-TOR、pAKT的表达,分析其与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果:pmTOR在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级41.7%(5/12)、Ⅱ级53.3%(8/15)、Ⅲ级65.2%(15/23)、Ⅳ级69.2%(9/13),pAKT在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级33.3%(5/12)、Ⅱ级40.0%(6/15)、Ⅲ级52.2%(12/23)、Ⅳ级53.8%(7/13);各阳性表达率间无统计学差异(P>0.05),但其表达水平均随着卵巢上皮性癌病理级别的增高而升高,而与病理类型无关。结论:mTOR信号通路蛋白在卵巢上皮性癌的发生发展中起重要的作用,可能是卵巢癌治疗的潜在靶点。; 马湘一范良生刘荣华罗丹枫马丁; 关键词：卵巢上皮性癌 MTOR AKT 信号转导通路

活动后双下肢水肿2年,经量增多伴痛经3个月: 2014年; 1病历摘要患者,47岁,因活动后双下肢水肿2年,经量增多伴痛经3个月,于2014年8月12日入院。患者15岁初潮,平素月经规则,月经量中等。近3个月月经量较之前明显增多,伴经期下腹痛,于6月6日到外院彩超检查示：子宫肌瘤,见数个低回声团块,后壁见4.3 cm×4.0 cm不均质回声,左侧附件区囊性包块。心脏彩超检查示：子宫主动脉瓣二瓣化畸形并中度狭窄,轻度关闭不全,可疑升主动脉-左室通道增宽。; 刘荣华王世宣; 关键词：经量彩超检查中度狭窄

新型肿瘤导向肽TMTP1融合抗菌肽抑制裸鼠胃癌和前列腺癌移植瘤的生长与转移被引量：3: 2013年; 目的探讨新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽D（KLAKLAK）2偶联后对胃癌、前列腺癌生长与转移的抑制效应.方法建立人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型和胃癌裸鼠原位移植瘤模型,分别腹腔注射50 μmol/L磷酸盐缓冲液（对照组）、50 μmol/L TMTP1（TMTP1组）和50 μmoL/LTMTP1-GG-D（KLAKLAK）2[TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组],验证新型融合多肽TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2对肿瘤组织的亲和能力,测量瘤体大小,行形态学观察,采用原位细胞凋亡法检测肿瘤组织的凋亡并绘制生存曲线.结果在前列腺癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组裸鼠的中位生存时间分别为50、55和70 d（P ＜0.05）,肿瘤体积分别为（2.5±0.3）cm3、（1.8±0.2）cm3和（0.3 ±0.1）cm3（P ＜0.01）.在胃癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D （KLAKLAK）2组裸鼠的中位生存时间分别为25、30和45 d（P ＜0.05）,肿瘤体积分别为（3.8±0.4）cm3、（3.2 ±0.2）cm3和（0.4±0.1）cm3（p＜0.01）.在胃癌原位肿瘤中,对照组和TMTP1组裸鼠的胃组织可见巨大的原位肿瘤,而TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组原位肿瘤体积明显缩小.对照组和TMTP1组裸鼠的肝脏、脾脏和腹壁均可见白色转移灶,TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组裸鼠无肉眼可见转移灶.对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组细胞的凋亡率分别为（31.9±1.5）％、（37.2±2.3）％和（69.7±2.1）％（P＜0.01）.结论新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后可有效抑制肿瘤的生长与转移,有望成为一种新型的抗肿瘤药物.; 马湘一李姝罗丹枫刘荣华卢运萍王世宣马丁奚玲; 关键词：前列腺肿瘤靶向治疗抗菌肽裸鼠

GRP78在三种不同乳腺癌细胞的表达及其意义被引量：6: 2008年; 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在高低转移对的乳腺癌细胞的表达及其意义。方法:分别采用半定量RT-PCR,蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光方法检测GRP78在三种不同乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、435S和MCF-7)的mRNA蛋白表达及其亚细胞定位情况。结果:GRP78 mRNA和蛋白在(MDA-MB-231细胞的表达最高,其次为(MDA-MB-435S,在MCF-7的表达最低;共聚焦显微镜下观察到GRP78蛋白主要定位在细胞浆,在细胞膜以及细胞核内也有少量的表达。结论:GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用,其可作为抗乳腺腺癌治疗的一个新的分子靶点。; 刘荣华王世宣马湘一罗丹枫卢运萍马丁; 关键词：乳腺癌癌基因葡萄糖调节蛋白78

BAY11-7082对前列腺癌细胞内NF-κB及其生物学行为的影响被引量：1: 2012年; 目的:探讨BAY11-7082对前列腺癌细胞NF-κB表达及其生物学行为的影响。方法:应用CCK-8方法、蛋白印迹、NF-κB激活-核转运检测,细胞增殖抑制实验和集落形成实验方法观察BAY11-7082作用下前列腺癌细胞NF-κB蛋白的表达,细胞生长等指标的变化。结果:BAY11-7082对前列腺癌细胞转移有明显的抑制作用。BAY11-7082处理的前列腺癌细胞内NF-κB蛋白表达降低,减弱NF-κB的激活,细胞增殖和形成集落的能力下降。结论:BAY11-7082可抑制前列腺癌细胞NF-κB的激活与表达,提示NF-κB可作为前列腺癌基因治疗的重要靶点之一。; 钱敏王世宣王鸿雁卢运萍马丁刘荣华; 关键词：前列腺癌 NF-ΚB

雷帕霉素联合紫杉醇诱导卵巢癌细胞A2780和SKOV3凋亡及其分子机制被引量：21: 2007年; 背景与目的:研究表明,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在恶性肿瘤发生发展中起重要作用,本研究观察特异性mTOR抑制剂雷帕霉素联合紫杉醇对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的作用,并探讨其内在的分子机制。方法:A2780、SKOV3细胞经雷帕霉素和紫杉醇处理后,以MTT法检测细胞的增殖情况,金正均法计算q值判断两药的相互作用。以流式细胞仪检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测survivin的表达。结果:雷帕霉素联合紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖,且随时间延长抑制作用越显著,当两药合用72h时抑制率分别达到34.9%(A2780)和37.1%(SKOV3),与单独用药组相比差异有显著性(P<0.01),金正均法显示各时间点q值均>1.15,显示二者有协同作用。雷帕霉素和紫杉醇可使A2780和SKOV3细胞发生凋亡,并且在两者联用时凋亡率达到最高。经雷帕霉素和紫杉醇作用后的A2780和SKOV3细胞表达survivin较处理前明显下降。结论:体外雷帕霉素和紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖并诱导其发生凋亡,并可使survivin基因的表达下调,且两者联合应用时可显著增加其抑制作用,具有协同作用。; 马湘一王世宣刘琰刘荣华卢运萍马丁; 关键词：雷帕霉素紫杉醇 A2780细胞 SKOV3细胞凋亡

新型肿瘤导向肽融合抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤效应及机制被引量：1: 2013年; 目的将新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽相融合,以增强对肿瘤细胞的杀伤效应.方法验证新型多肽对肿瘤细胞的亲和能力,经融合多肽作用后,噻唑蓝（MTT）、流式细胞仪实验检测细胞的增殖与凋亡,Boyden小室分析对细胞侵袭转移能力的影响,Western blot检测细胞中活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、-8、-9的表达水平.结果薪型融合多肽具有对肿瘤细胞的亲和能力,20 μmol/L的融合多肽引起近100％ PE-3M-1 E8和95％ MKN-45细胞死亡,10 μmol/L的融合多肽诱导（82.15±1.20）％ PC-3M-1E8细胞及（84.27 ±3.20）％的MKN-45细胞发生凋亡,而其侵袭转移能力下降为（52.38±3.30）％、（46.16±2.70）％,其机制和细胞中的Caspase-3、-8、-9活化有关.结论新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后显示强烈的肿瘤细胞杀伤效应.; 马湘一杨书红刘荣华罗丹枫马丁奚玲; 关键词：肿瘤靶向治疗抗菌肽

30卷12期疑难病案: 2014年; 患者,21岁,G1P0,因孕76天,发现胚胎停育1天于2014年7月6日入院。患者既往月经规则,末次月经2014年4月20日。因＂血栓史＂一直在服用抗血栓药物,5月份停药1月。患者于今年5月下旬自查尿HCG阳性,于5月31日外院B超检查提示：宫内早孕,右侧附件囊肿,盆腔积液。; 刘荣华王世宣; 关键词：抗血栓药物附件囊肿彩超检查胚胎停育宫内早孕

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刘荣华

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