探讨银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)对于双酚A(Bisphenol A,BPA)活化RBL-2H3(简称:RBL)表达IL-4和TNF-α的影响。利用BPA激活RBL,通过测定β-氨基已糖苷酶和RT-PCR,研究EGB对于活化RBL脱颗粒以及表达IL-4和TNF-α的影响。结果显示,经BPA活化的RBL,加入EGB(浓度为160μg/ml)后,其β-氨基已糖苷酶释放仅为对照的45%,其IL-4mRNA表达量降低到对照的33.5%,TNF-αmRNA表达量降低到对照的26.8%。结果说明EGB极大地抑制了活化RBL的脱颗粒,同时对于活化RBL表达IL-4和TNF-α也具有极大的抑制作用,提示EGB治疗哮喘的作用与其抑制肥大细胞表达IL-4和TNF-α有关。
目的考察麻疹-流行性腮腺炎（流腮）-流行性乙型脑炎（乙脑）联合减毒活疫苗（Measles,Mumps and Japanese Encephalitis Combined Attenuated Live Vaccine;M-M-JEV）的稳定性。方法将M-M-JEV,37℃放置7d,检测病毒滴度;2-8℃放置0-25个月,检测外观、水分、病毒滴度、安全试验、异常毒性,0月和18个月时进行全检;（-30±2）℃放置0-30个月,检测外观、水分、病毒滴度、安全试验、异常毒性,0月、18个月、30个月时进行全检。结果所有检测结果,均符合2010年版《中华人民共和国药典》三部麻疹减毒活疫苗、流腮减毒活疫苗和乙脑减毒活疫苗的质量标准。结论 M-M-JEV有较好的稳定性。
目的:研究Synaptotagm inⅡ(简称Syt2)在RBL-2H3(简称RBL)中的表达及其在胞吐中的作用。方法:通过W estern b lot检测Syt2在RBL中的表达情况。用高保真酶扩增Syt2,与pEGFP-N1构建全长反义基因表达载体,电穿孔转染RBL,G418筛选获得稳定转染细胞。通过钙离子载体和抗原刺激,应用W estern b lot检测稳定转染细胞和对照细胞分泌的组织蛋白酶D,分析Syt2对胞吐的影响。结果:在RBL中检测到Syt2表达。构建了pEGFP-N1-Syt2-AS质粒,插入片段测序结果与GenBank登录号NM012665(rat Syt2)序列完全一致。经转染和G418筛选,获得了稳定转染细胞RBL-Syt2-AS,W estern b lot结果显示,两株RBL-Syt2-AS表达的Syt2均明显减少,分别只有对照的8%和10%。经刺激后,RBL-Syt2-AS分泌的组织蛋白酶D较对照明显增加。结论:Syt在RBL中表达,其对RBL溶酶体胞吐起负调控作用。
目的研制麻疹-流行性乙型脑炎(乙脑)联合减毒活疫苗(Measles and Japanese Encephalitis Combined At-tenuated Live Vaccine,M-JEV)。方法选用我国自主开发的麻疹病毒沪-191疫苗株和乙脑病毒SA14-14-2疫苗株,制备单价麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)和乙脑减毒活疫苗(Japanese Encephalitis At-tenuated Live Vaccine,JEV)原液,进行干扰试验、配比试验、保护剂筛选试验、稀释液筛选试验、冻干曲线的选择。结果确定了M-JEV的制备工艺,进行了M-JEV的中试。中试M-JEV经全面检定符合2005年版《中华人民共和国药典》三部单价MV和JEV质量标准。动物试验未见病毒间交叉干扰,未见加重反应,未影响小鼠的免疫应答,表现了良好的安全性和免疫原性。结论成功制备了M-JEV。
