吕洋
- 作品数：46 被引量：40H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞培养基及其用途
- 本发明涉及细胞培养基及其用途。其中，培养基包含：基础培养基，该基础培养基为AminomaxC-100培养基；bFGF；以及DMOG。利用本发明的细胞培养基对分离的毛乳头细胞进行体外培养，能够有效地使得毛乳头细胞扩增，从而...
- 裴雪涛陈琳岳文习佳飞师伟姚海雷吕洋张秀媛谢小燕刘大庆
- 神经元限制性沉默因子对人胰岛素基因转录调控作用的研究被引量：5
- 2007年
- 为了研究神经元限制性沉默因子(NRSF)调控神经元及胰岛细胞中神经特异性基因的表达,进一步寻找胰岛细胞中可能存在的其他NRSF调控基因.先用生物信息学手段对相关基因进行了分析.筛选及序列比对发现,人胰岛素核心启动子区有一段与NRSE相似的序列,提示,它可能受NRSF调控.构建了含NRSF基因的慢病毒载体,将其稳定转染于INS-1细胞.构建了3种荧光素酶报告载体:含有人胰岛素启动子-荧光素酶(hInsP-LUC)的慢病毒载体,pGL3-Basic载体和含有2拷贝NRSE样基序-荧光素酶(NRSE-LUC)的报告载体.利用稳定转染及瞬时转染实验观察NRSF对报告载体中荧光素酶活性的影响.利用电泳迁移率变动分析实验观察NRSE样基序与NRSF蛋白的结合情况,并通过竞争结合实验、引入特异性抗体实验证实探针与蛋白质结合的特异性.RT-PCR检测证实,感染空病毒的INS-1细胞不表达NRSF,感染含目的基因慢病毒的INS-1细胞能表达NRSF.将含有hInsP-LUC的慢病毒载体稳定转染于上述2种细胞,荧光素酶活性分析结果显示,NRSF的过表达能明显降低胰岛素启动子的活性.瞬时转染hInsP-LUC报告系统于上述2种细胞,结果也显示NRSF能明显抑制胰岛素启动子-荧光素酶的活性.将含有NRSE-LUC的报告载体瞬时转染于上述2种细胞,结果表明过表达NRSF的INS-1细胞组的荧光素酶相对值比对照组有明显下降.电泳迁移率变动分析实验进一步证实,此NRSE样序列可以与NRSF蛋白特异结合,这种特异结合可以被标准的NRSE序列所竞争.结果表明,人胰岛素启动子中含有NRSE样序列,该序列通过与NRSF蛋白结合从而抑制人胰岛素启动子的转录活性.这一研究工作有助于进一步了解NRSF在胰岛细胞中的调控作用.
- 刘庆斌李艳华杨印祥袁红丰张锐秦立蓬吕洋张赛男孙迪金陈琳白慈贤南雪王韫芳裴雪涛
- 关键词：胰岛素启动子
- 泊洛沙姆188对体外三维培养脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响被引量：1
- 2018年
- 目的观察泊洛沙姆188（P188）对体外三维（3D）培养诱导脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响。方法将分离的脐血单个核细胞分别接种于细胞瓶和细胞培养袋中，后者采用WIGGENS摇床模拟生物反应器进行3D培养。在巨核细胞诱导培养基中加入P188体外培养14d，观察细胞形态、计数细胞数并计算细胞存活率，采用流式细胞术观察巨核细胞表面标志表达情况。结果与采用传统的细胞培养瓶二维（2D）培养诱导巨核细胞相比，2D＋P188培养组巨核系CD41＋、CD41＋／CD61＋、CD61＋细胞数明显增加（P值均〈0．01）；在3D培养中加入P188，细胞体积变大，核形状不规则，胞质含紫红色颗粒，细胞分化更接近成熟。2D培养、3D培养及3D＋P188培养组组间巨核细胞表面标志CD41、CD41／CD61、CD61表达水平差异有统计学意义（P值均〈0．01）。LSD—t检验两两比较显示，与2D培养相比，3D培养诱导巨核细胞存活率及细胞数均降低（P值分别为0．018、0．027），3D＋P188培养组细胞数、细胞存活率与2D和3D培养组比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。而3D培养组巨核细胞CD41／CD61表达水平为（36．30±1．27）％，高于2D培养组的（23．95±1．34）％（P=0．002），3D＋P188培养组CD41／CD61表达水平更高[（59．45±1．20）％]。结论3D培养有利于巨核系祖细胞诱导分化，但细胞存活率低，加入P188，细胞生存状态好，且诱导效率更高。
- 陈琳岳文谢小燕张秀媛吕洋刘大庆习佳飞曲洺逸范增房芳裴雪涛
- 关键词：巨核细胞泊洛沙姆诱导分化
- 细胞培养基及其用途
- 本发明涉及细胞培养基及其用途。其中，培养基包含：基础培养基，该基础培养基为AminomaxC-100培养基；bFGF；以及DMOG。利用本发明的细胞培养基对分离的毛乳头细胞进行体外培养，能够有效地使得毛乳头细胞扩增，从而...
- 陈琳裴雪涛岳文习佳飞师伟姚海雷吕洋张秀媛谢小燕刘大庆
- 文献传递
- 一种竹笋提取物复合制剂及其中竹笋提取物的制备方法
- 本发明公开了一种具有改善贫血功能竹笋提取物复合制剂及其制备方法，由竹笋提取物、补铁剂及其它助剂配制而成，其中：所述竹笋提取物是固形物、提取液或干粉，由新鲜竹笋或笋干水提醇提得到；所述补铁剂为铁卟啉或血红素铁。采用以上设计...
- 裴雪涛师伟陈琳吕洋岳文白慈贤南雪施双双张赛男何丽娟任祥亮管利东
- 文献传递
- 神经元限制性沉默因子在NTera2/CloneD1细胞向神经元分化模型中表达的检测
- 2011年
- 目的:建立NTera2/CloneD1细胞向神经元分化的模型,检测神经元限制性沉默因子(NRSF)经分化培养基诱导后表达的变化。方法:收集正常培养的NTera2/CloneD1细胞及经全反式维甲酸(RA)、阿糖胞苷(AraC)、尿苷分阶段诱导共28 d的细胞,显微镜下观察诱导前后细胞的形态学变化;免疫荧光法检测NTera2/CloneD1细胞诱导前后干性标志Nestin、Sox2和成熟神经元特异性标志NF-200、β-tubulinⅢ的表达情况;应用RT-PCR和免疫荧光法对NRSF进行mRNA和蛋白水平的检测。结果:显微镜下观察到正常培养的NTera2/CloneD1细胞呈克隆样生长,经分化培养基诱导后的NTera2/CloneD1细胞表现出典型的神经元样细胞形态。免疫荧光检测表明,未诱导的NTera2/CloneD1细胞表达神经干细胞的标志Sox2、Nestin,不表达成熟神经元特异性蛋白NF-200、β-tubulinⅢ;而经RA等诱导分化的细胞则不表达Sox2、Nestin,表达NF-200、β-tubulinⅢ。RT-PCR和免疫荧光检测显示,NRSF在诱导分化后的NTera2/CloneD1细胞中的表达量显著降低。结论:建立了NTera2/CloneD1细胞向神经元分化的模型,NRSF在诱导后的NTera2/CloneD1细胞中表达量显著下调,提示NTera2/CloneD1细胞在诱导过程中可能通过下调NRSF,使受到NRSF负性调控的神经元特异性蛋白启动表达并上调,进而实现NTera2/CloneD1细胞向神经元的定向分化。
- 张静王思涵张博文姚海雷陈琳吕洋南雪岳文李艳华裴雪涛
- 关键词：神经元分化神经元限制性沉默因子
- 神经元限制性沉默因子与胰岛素在成年小鼠胰腺中的表达
- 2011年
- 目的:观察神经元限制性沉默因子(NRSF)在正常成年小鼠胰腺组织中的表达情况。方法:以6～8周BALB/c小鼠胰腺为实验材料,制备冰冻切片,与地高辛标记的NRSF cDNA探针进行原位杂交,观察mRNA表达,并结合免疫组织化学方法检测NRSF和胰岛素的表达。结果:原位杂交显示,NRSF mRNA仅表达于胰腺组织外分泌部腺泡腺细胞中,胞浆呈蓝紫色,与免疫荧光组织化学检测NRSF蛋白表达的部位一致,而胰岛细胞中无NRSF mRNA及蛋白的表达。免疫酶组织化学染色显示,胰岛大部分细胞中表达胰岛素,胞浆染成黄棕色,而腺泡腺细胞则不表达胰岛素。结论:NRSF与胰岛素不存在共定位关系,即成年小鼠胰岛细胞不表达NRSF,而表达胰岛素。提示NRSF蛋白表达的消失可能是建立完全分化成熟、具有完好分泌反应的胰岛细胞所必需的。
- 陈琳郭小丽岳文吕洋谢小燕姚海雷陈海旭南雪李艳华裴雪涛
- 关键词：神经元限制性沉默因子胰岛素胰岛细胞原位杂交
- 白扁豆提取物、其提取方法及其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用
- 本发明公开了白扁豆提取物及其提取方法与应用。其目的是提供一种白扁豆提取物及其提取方法与其在制备抗辐射皮肤损伤药物中的应用。该白扁豆提取物是将白扁豆粉碎后，先对其用生理盐水进行提取，再将提取物用饱和硫酸铵进行盐析，最后经脱...
- 裴雪涛师伟任祥亮岳文白慈贤南雪施双双陈琳吕洋
- 文献传递
- 诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种诱导间充质干细胞和脂肪干细胞分化为神经元的方法及其专用培养基。该培养基是添加有体积/体积百分比浓度8－12％胎牛血清的DMEM培养基。该方法步骤：1)合成抑制神经元限制性沉默因子基因表达的小干扰RNA或构...
- 裴雪涛杨印祥李艳华刘庆斌陈琳管利东吕洋
- 文献传递
- 一类饱和胺类化合物在制备外周血造血干细胞动员药物中的应用
- 本发明提供了一类饱和胺类化合物的新用途，即其在制备外周血造血干细胞动员药物中的应用。实验证明，该化合物(代号TA01)能够有效的动员骨髓中的造血干细胞，是一类新型的造血干细胞动员剂。本发明将在外周血造血干细胞动员药物的研...
- 裴雪涛师伟李艳华任祥亮吕洋施双双陈琳南雪岳文
- 文献传递
