孔祥平
- 作品数：48 被引量：137H指数：7
- 供职机构：解放军第458医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肝再生增强因子cDNA的克隆及其酵母双杂交载体的构建被引量：1
- 2003年
- 目的 :获取人肝再生增强因子 (hALR)阅读框的cDNA及构建其酵母双杂交系统的“诱饵”质粒。方法 :利用RT PCR方法 ,从人胎肝组织中扩增出一约 380bp的DNA片段 ,重组入pGBKT7载体中 ,构建成pGBKT7 hALR ,然后研究此重组质粒在酵母AH10 9中的表达情况并用于筛选人肝cDNA文库。结果 :获得的 378bp的DNA序列与文献报道的人ALR序列一致 ;转化的酵母菌在选择性培养基SD Trp上培养 6 5小时 ,长出约Φ1mm大小的白色菌落 ,而在SD Trp His上不生长 ;酵母提取液的Westernblot分析 ,证实ALR基因在AH10 9以融合蛋白的形式表达 ,并具有免疫活性 ;初步得到hALR相互作用的阳性克隆。结论 :pGBKT7 hALR对宿主菌AH10 9没有毒性作用 ,也没有自身激活报告基因 ,可作为酵母双杂交系统中的“诱饵”质粒。
- 陈思强佟明华孔祥平姚汝华易学瑞潘韵
- 关键词：肝再生增强因子酵母双杂交系统克隆
- 慢性乙型肝炎患者的心理特点与护理对策被引量：1
- 2005年
- 目的探讨慢性乙型肝炎患者的心理特点与护理对策。方法对临床首次确诊的慢性乙型肝炎病毒感染者,未经抗病毒治疗的病人315例进行焦虑自评问卷调查。结果免疫耐受期(40.27±6.30)与免疫清除期(41.52±5.30)病人的焦虑状况明显高于残余整合期(36.87±5.49);以21～40年龄段焦虑水平最高。结论护士应掌握免疫辨证各期特点,了解病人心理,进行有针对性护理,以达到最佳的治疗效果。
- 杨永红伍伟玲罗显荣程涛孔祥平
- 关键词：慢性乙型肝炎心理护理
- 自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化临床研究
- 目的:探讨自体骨髓干细胞(BMSC)移植对肝硬化失代偿期患者的治疗作用。方法:23例肝硬化失代偿期患者无菌抽取骨髓60～100ml,分离纯化BMSC,然后经肝动脉导管注入肝脏。术后定期检测肝功能,并观察同期的症状体征和不...
- 欧阳石程涛李灼亮刘树人肖必佟明华余宙耀孔祥平
- 关键词：骨髓干细胞肝硬化
- 文献传递
- 复制型HBV转基因小鼠遗传稳定性研究被引量：19
- 2008年
- 目的：提高复制型HBV转基因小鼠的遗传稳定性。方法：应用回交传代及双杂交育种法，经荧光定量PCR、ELISA和化学发光法研究HBV基因在小鼠体内的复制与表达。结果：HBV转基因小鼠已稳定传至第23代，血清HBsAg达4122．31±2044．74IU／ml，93．93％的转基因小鼠血清HBVDNA达10^4-10^4copies／ml，表达复制水平较早期有显著提高并稳定传代；雌雄小鼠之间表达水平无显著性差异。结论：该转基因小鼠经过培育传代，已成为一个高表达且遗传稳定的复制型HBV小鼠模型。
- 孔祥平吴庆洲罗显荣胡莲美李秀梅易学瑞佟明华周军辉刘光泽
- 关键词：稳定性
- 肝再生增强因子的免疫组化定位及其在肝炎病患者血清水平观察被引量：7
- 2002年
- 目的 :探讨肝再生增强因子 (ALR)的组织分布 ,观察肝炎病患者血清ALR的水平。方法 :取鼠、人胎儿系列新鲜组织固定后 ,石蜡包埋切片 ,以SABC试剂盒进行免疫组化染色定位 ;用ELISA法检测肝炎病患者血清ALR水平。结果 :免疫组化染色结果显示 ,ALR在组织细胞中呈胞浆、胞膜型分布 ,尤以睾丸、肝脏染色最深 ;慢性肝炎患者血清ALR水平升高非常显著 (P <0 0 1) ,急性肝炎患者血清ALR水平升高显著 (P <0 0 5 ) ,急、慢性肝炎患者ALR无显著差异。结论 :ALR主要分布肝脏和睾丸组织 ,既无种族特异性 ,也无器官特异 ;肝脏是ALR作用的靶器官 ,其本身也可产生ALR。
- 杨联萍邹清雁曾平鲁易学瑞李茹冰郑茉丽孔祥平
- 关键词：肝再生增强因子免疫组化单克隆抗体肝炎
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙型肝炎病毒药物的效应研究
- 目的：研究高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝病毒药物的效应评价。方法：选用抗乙肝药物拉咪呋啶、大剂量重组乙肝蛋白疫苗,α-1b型干扰素和RNA干扰在转基因小鼠进行药效及作用机制评价。结果：咪呋啶、重组乙肝疫苗、α-1b型...
- 刘光泽孔祥平任向荣李秀梅胡莲美黄黎珍顾为望
- 关键词：HBV转基因小鼠模型RNA干扰抗乙肝病毒药物药效评价
- 文献传递
- HBsAg负载的树突状细胞疫苗对慢性乙型肝炎的治疗作用
- 目的探讨HBsAg负载的体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)疫苗对CHB的疗效。方法采用随机对照的方法,将204例患者随机分为3组,比较HBsAg负载的DC疫苗回输、干扰素和拉米夫定三种方法治疗前...
- 刘树人张雁李灼亮余宙耀孔祥平
- 关键词：树突状细胞慢性肝炎乙型拉米夫定
- 文献传递
- C基因型HBV转基因小鼠的制备被引量：3
- 2008年
- 目的:建立C型HBV转基因小鼠,为乙肝防治研究提供实验动物模型.方法:采用受精卵显微注射法,制备HBV转基因小鼠,用PCR,ELISA,荧光定量PCR和免疫组化的方法研究HBV基因在转基因小鼠体内的整合、复制和表达情况.结果:注射受精卵2840枚,筛选注射后成活的受精卵共2256枚,注射成活率79.4%.注射后受精卵共移植假孕雌鼠85只,其中有42只怀孕,假孕雌鼠妊娠率49%,共产下F0代小鼠168只,PCR检测共有14只小鼠阳性,其中ELISA检测血清HBsAg阳性5只,HBeAg均阴性.荧光定量PCR血清HBV DNA显示,2只小鼠的拷贝数分别为3.12×105copies/L,1.98×105copies/L,经传代产下F1代小鼠61只,PCR检测HBV DNA阳性5只,ELISA检测HBsAg阳性4只,其中肝脏HBsAg免疫组化阳性2只,HBcAg均阴性,且肝组织表达HB-sAg为胞浆型.结论:构建的C型HBV基因不但可以在转基因小鼠体内进行复制表达,而且可以遗传给下一代小鼠.
- 尤玉琴黄黎珍刘光泽佟明华李秀梅胡莲美顾为望孔祥平
- 关键词：血清DNA
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗病毒药物拉米夫定评价的研究
- 2005年
- [目的]探讨乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠模型筛选抗HBV药物的可行性。[方法]用公认抗HBV复制药物拉米夫定对我们建立高复制HBV转基因鼠进行实验,选我们建立的1.3copy高复制HBV转基因小鼠20只,随机分成两组,每组10只。采用灌胃针灌胃法给药。对照组灌喂生理盐水,实验组灌喂拉米夫定,剂量为100mg/kg,每天2次,连续灌21d,每7d采血1次。荧光定量PCR检测血清中HBVDNA。[结果]实验组用拉米夫定前小鼠血清HBVDNA5.50±0.42(拷贝数log10数值),3周后HBVDNA已显著降低(4.63±0.57),4周后,小鼠血清HBVNDA为4.08±0.51,停药1周后,再次检测血清HBVDNA,小鼠血清HBVDNA又恢复正常水平(5.70±0.39)。[结论]我们建立的高复制HBV转基因小鼠模型验证了拉米夫定对HBV复制的抑制程度和持续时间,表明该模型可应用于抗HBV药物的筛选、评价研究。
- 刘光泽黄黎珍顾为望任向荣陈文吟孔祥平
- 关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠拉米夫定
- D-氨基半乳糖与脂多糖对小鼠肝脏损伤后再生修复的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察部分肝切除联合D-氨基半乳糖(D-GaIN)、脂多糖对肝损伤后再生修复的影响。方法 40只BALB/c雄性小鼠随机均分为2组。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组:腹腔注射D-GaIN(500 mg/kg),1 h后注射脂多糖(50μg/kg);肝脏部分切除组:生理盐水代替D-GaIN和脂多糖,同样方法注射;两组小鼠在第2次腹腔注射24 h后行肝脏1/3切除。观察两组小鼠术后肝脏体质量比值、肝再生率、肝细胞损伤、增殖与肝卵圆干细胞增生。结果肝脏部分切除组术后第9天肝大体结构基本恢复正常,肝再生率为(22.26±105.93)%,而D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组第14天肝质量较术前仍偏小,肝再生率为(9.49±32.55)%,P<0.001。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组术后肝窦和中央静脉充血,库普弗细胞增多;肝脏部分切除组术后第7天有明显肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝细胞增殖甚少。D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝脏术后第3天开始出现肝卵圆干细胞增生,从汇管区开始向肝小叶内延伸以修复损伤。结论 D-GaIN联合脂多糖可部分抑制肝部分切除后小鼠成熟肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝部分切除可诱导肝卵圆干细胞增生。
- 李劲张健刘光泽刘犇孔祥平
- 关键词：D-氨基半乳糖脂多糖肝切除肝再生
