孙中锋
- 作品数：16 被引量：52H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 吉林省猪源戊型肝炎病毒全基因序列的克隆及分析
- 目前，戊型肝炎病毒HEV不仅发生于亚洲、非洲和拉丁美洲等许多发展中国家。
在许多发达国家本土也存在HEV感染。世界大部分学者研究证实人源HEV与猪源HEV病毒在基因水平上比较接近，而且猪源HEV可以实验性跨种间...
- 屈勇刚金宁一孙中锋朱光泽
- 关键词：戊型肝炎病毒全基因序列基因克隆
- 文献传递
- 戊型肝炎病毒快速多联RT-PCR检测方法的建立及全基因克隆
- 本研究首先设计了针对HBV、HCV、HEV保守区基因序列的六对引物,经反复试验建立用于HBV DNA及HCV和HEV RNA检测的特异敏感免疫捕获多联RT-PCR方法,此方法与临床应用的检测试剂盒对比,具有操作简便、敏感...
- 孙中锋
- 关键词：戊型肝炎病毒全基因
- 文献传递
- 长春地区人群HEV流行特点及病毒基因型分析被引量：4
- 2007年
- 目的探讨长春地区戊型肝炎病毒(HEV)在人群中的感染情况及戊型肝炎病毒系统进化关系。方法用抗-HEV抗体试剂盒检测人血清中的抗体;对部分血清和粪便标本用逆转录聚合酶链式反应的方法(RT-PCR)检测HEV RNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序,然后将序列进行分析。结果长春地区各年龄组共4944份人血清中有1127份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为22.79%;其中男性阳性率为34.27%,女性阳性率为10.88%。20岁以下人群感染率为1.00%左右,自20岁起男性和女性分别以每年接近10.00%和3.00%的速度平稳上升。戊肝感染者中男性与女性的抗体阳性率之比为3.3:1,随着年龄上升,人群中戊肝感染者的抗体水平也缓慢上升。我们从急性戊肝患者血清中检测到1份HEV RNA阳性样本,从急性戊肝患者粪便中检测到2份为HEV RNA阳性样本,序列分析显示从我们克隆出的3株HEV的核苷酸序列的同源性为91.2-99.1%,该3株序列在ORF 2区438bp同1-4型间核苷酸同源性分别为:77.8%-82.3%、77.2%-78.1%、77.2%-99.1%、85.2%-95.2%;结论HEV在各年龄段人群中均有流行,但在年龄段20岁人群后的流行率呈逐年增长趋势,说明长春地区HEV感染主要发生在成年后。人感染的HEV的基因序列与猪群戊型肝炎病毒的基因Ⅳ型同源性最高。由进化关系看在长春地区人HEV与猪HEV不能分为不同的两支,说明长春地区人HEV和猪HEV很可能是由同一支分支进化而来。
- 朱光泽刘铁梅孙中锋屈勇刚王铁峰金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒基因型聚合酶链反应
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫苗的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段。将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEA-ORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXI中,构建重组质粒pVAXI-SEA-ORF6,转化大肠杆菌。经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达。通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性。结果表明,所构建的重组质粒pVAXI-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础。
- 韩贞珍金宁一沈国顺庄天中孙中锋李臻付延军李太元李红文郑敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- 长春地区戊型肝炎病毒在动物群中的流行病学研究
- 为探讨长春地区戊型肝炎病毒(HEV)在动物群中的感染情况及戊型肝炎病毒系统进化关系,应用抗-HEV 抗体试剂盒检测猪、牛、羊、鹿、鸡、马血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链式反应的方法(RT-PCR)检测 HEV R...
- 朱光泽刘铁梅孙中锋屈勇刚王铁峰金宁一
- 文献传递
- 戊型肝炎病毒感染在鹿和牛群中的血清流行病学调查
- 为了解戊型肝炎病毒在我国鹿群和牛群中的流行情况,收集15个鹿场798份鹿血样和长春地区的牛血样80份,常规分离血清,采用北京万泰生物药业有限公司提供的抗HEV抗体酶联免疫试剂盒(双抗原夹心法),对血清样品进行抗HEV总抗...
- 屈勇刚李红文孙中锋朱光泽夏志平金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒血清流行病学鹿群牛群
- 文献传递
- 长春地区人与猪戊型肝炎病毒分子流行病学及部分基因序列分析被引量：12
- 2006年
- 目的 分析长春地区猪和人群流行的戊型肝炎病毒的系统进化关系。方法 参照文献设计引物．对长春地区猪和人群流行的8株HEV（其中3株来源于人，5株来源于猪）进行RT-PCR，并将RT-PCR产物克隆到PMD18-T载体。筛选阳性重组质粒测序，测序结果采用Clustal X v．1．8进行多重比对分析，并与基因1～4型HEV代表株的核苷酸及氨基酸进行同源性比较。绘制遗传进化树。结果 本研究获得的8株HEV核苷酸同源性在91．2％～99．1％。推导氨基酸同源性在97．4％～100％之间；基因1～4型内各株序列间同源性分别为：87．9％～100％,100％，85．9％～96．6％。84．8％～100％。结论 研究表明获得的长春各株病毒均属基因4型。由进化关系看长春地区猪HEV与人HEV可能由同一毒株进化而来。
- 孙中锋金宁一朱光泽屈勇刚李红文金扩世田明尧
- 关键词：戊型肝炎病毒系统进化分析同源性
- 我国部分地区鹿、牛群中戊型肝炎病毒血清流行病学调查被引量：7
- 2006年
- 目的调查我国部分地区鹿和牛群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法采集我国某地区13个鹿场780份鹿血,2个散养鹿群18份血和长春地区牛血80份,分离血清。应用抗HEV抗体酶联免疫试剂盒(双抗原夹心法)对血清样品进行抗HEV抗体检测。用χ2检验分析不同养殖场鹿血清HEV抗体水平。结果798份鹿血清抗HEV抗体阳性率为43.61%。13个集约化养殖鹿场中有5个鹿场的血清样品抗体呈阳性,阳性率分别为48.02%、47.25%、60.69%、41.94%、40.91%;其余8个鹿场的血清样品均为阴性。两个散养鹿群的抗体阳性率分别为40.00%和46.15%。80份牛血清样品的抗体阳性率为20%。结论我国鹿群尤其是散养鹿群普遍存在HEV感染。牛群也存在较高的HEV感染率。
- 李红文金宁一屈勇刚朱光泽孙中锋王全凯
- 关键词：戊型肝炎病毒血清流行病学
- 猪戊型肝炎病毒的分离及鉴定
- 本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪抗HEVIgM抗体,对IgM抗体阳性猪的胆汁通过逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-Nested-PCR,RT-nPCR)检测病毒核酸,采取核酸阳性的胆汁用于HEV的分离.结果...
- 金扩世夏志平朱光泽田明尧屈勇刚孙中锋金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒病毒分离
- 戊型肝炎病毒在长春地区动物群中的流行病学研究被引量：6
- 2007年
- 目的分析戊型肝炎病毒(HEV)在长春地区动物群中的感染情况及戊型肝炎病毒系统进化关系。方法用抗-HEV抗体试剂盒检测长春地区猪、牛、羊、鹿、鸡和马血清中的抗体;对部分血清用RT-PCR检测HEVRNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序及序列分析。结果493份猪血清中有427份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为86.61%;有5份为HEVRNA阳性,5株克隆的核苷酸序列的同源性为91.2%～99.1%,该5株克隆的序列在ORF2区348bp与1～4型间核苷酸同源性分别为77.8%～82.3%、77.2%～78.1%、77.2%～99.1%和85.2%～95.2%;266份牛血清中有122份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为45.86%;93份羊血清中有7份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为7.53%;798份鹿血清中有348份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为43.61%;369份鸡血清中有18份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为4.88%;197份马血清中有31份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为15.74%。结论HEV在多种动物群中均有流行,但在猪群中的流行率明显高于其他动物群。猪感染的HEV的基因序列与人群中散发性戊型肝炎病毒的基因4型同源性最高。进化关系表明,在长春地区猪与人HEV应划为一个分支。
- 朱光泽刘铁梅孙中锋屈勇刚王铁峰金宁一
- 关键词：戊型肝炎病毒基因型流行病学
