张素华
- 作品数：10 被引量：11H指数：3
- 供职机构：潍坊医学院基础医学院山东省高校免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-1β反义RNA肝癌特异性表达载体对肝癌恶性生物学行为的影响
- 目的:构建小鼠IL-1β反义RNA表达载体,探讨靶向阻断IL-1β后对肝癌细胞浸润与生长行为的影响及分子机制。方法:RT-PCR分别扩增小鼠IL-1β1(264bp)和IL-1β2(284bp)基因片段,首先经
- 刘艳艳梁淑娟肖伟玲王焕芹李青春张素华
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- pLIVE-mIL-1β在小鼠肝癌细胞中的稳定表达对
- 目的:利用可以在实验动物肝脏中达到高效、持续、特异性表达的载体系统pLIVE Vector,构建小鼠IL-1β真核表达载体pLIVE-mIL-1β,转染小鼠Hepa1-6肝癌细胞,观察目的基因的稳定表达及对细胞增殖和NK...
- 王焕芹梁淑娟肖伟玲刘艳艳李青春张素华
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- AFP启动子调控的IL-1β表达对肝癌细胞生物学行为的影响
- 目的建立能够在肿瘤细胞中特异性表达高水平促炎性细胞因子IL-1β的真核表达载体,转染小鼠肝癌细胞建立皮下荷瘤模型,研究IL-1β对肝癌发生发展的影响,从而为肝脏肿瘤免疫逃逸机理的研究提供实验依据。
- 李青春梁淑娟刘艳艳王焕芹肖伟玲张素华
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- 人caspase-1真核表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的构建人caspase-1真核表达载体,观察其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法分离人外周血淋巴细胞,LPS刺激提取细胞总RNA,RT-PCR方法分别扩增caspase-1两片段S_1、S_2,利用重叠延伸PCR方法(SOE)获得caspase-1全长序列,将其克隆入pIRES_2-EGFP载体,进行茵落PCR、限制性酶谱分析、DNA序列测定。通过jetPEI方法转染HepG2肝癌细胞,倒置相差荧光显微镜下观察其表达情况,RT-PCR分析caspase-1的表达水平。结果从外周淋巴细胞中经RT-PCR分别扩增出365bp和883bp片段,纯化后的PCR产物通过SOE扩增得到一1234bp的条带,与预期序列长度一致。SOE产物与pIRES_2-EGFP经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后连接,茵落PCR鉴定获得数个阳性克隆,质粒经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ限制性酶谱分析酶解出1234bp条带,DNA序列分析证实重组载体中的DNA序列与GeneBank中人caspase-1序列完全一致。将该载体转染至HepG2细胞中,经RT-PCR证实,与转染pIRES_2-EGFP空载体的对照组细胞相比,caspase-1水平明显升高。结论本研究成功构建人caspase-1表达载体pIRES_2-EGFP-caspase-1,该载体能够在人肝癌细胞中高效表达外源基因。
- 李青春张素华马晓君肖伟玲梁淑娟
- 关键词：肝肿瘤真核表达载体CASPASE-1
- IL-1β对NK细胞干扰素应答效率的调控作用及机制研究
- 目的:探讨促炎性因子IL-1β在肿瘤局部微环境中的表达,对NK细胞杀伤活性及其干扰素应答效率的影响和主要的分子机制。方法:构建人和小鼠的IL-1β真核表达载体和反义表达载体.将其转染人和小鼠肝癌
- 梁淑娟肖伟玲刘艳艳王焕芹李青春张素华
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- 肝癌细胞特异性IL-1β反义RNA对小鼠移植肝癌的抑制被引量：6
- 2009年
- 目的:构建肝癌细胞特异性小鼠IL-1β反义RNA表达载体,观察其对H22肝癌细胞小鼠移植瘤生长的影响及其相关机制。方法:构建由AFP最小启动子和CMV增强子嵌合序列调控的携IL-1β反义RNA表达载体pafpIRES2-antiIL-1β1和pafpIRES2-antiIL-1β2,经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定进行鉴定。反义RNA表达载体转染小鼠H22肝癌细胞,分H22/mock组、H22/antiIL-1β1组、H22/antiIL-1β2三组,RT-PCR检测IL-1β的表达水平。以转染后的H22细胞皮下接种建立荷肝癌小鼠模型,观察移植瘤体积和重量,MTT法检测荷瘤小鼠脾脏中分离的NK细胞对H22细胞的杀伤活性。结果:经质粒PCR、限制性酶谱分析、序列测定证实成功构建能够在肝癌细胞中特异性表达IL-1β反义RNA的表达载体pafpIRES2-anti-IL-1β1和pafpIRES2-antiIL-1β2,转染H22细胞后细胞中IL-1β表达水平明显下降,以pafpIRES2-antiIL-1β2更为显著。成功建立荷肝癌小鼠模型,与H22/mock组小鼠相比,H22/antiIL-1β2组小鼠移植瘤体积较小,生长显著减慢(P<0.05)。H22/anti-IL-1β1、H22/antiIL-1β2组荷瘤小鼠的NK细胞对H22细胞的杀伤活性明显增强(P<0.05或P<0.01)。结论:成功构建的肝癌细胞特异性IL-1β反义RNA表达载体可有效抑制小鼠移植肝癌的生长,其机制与靶向阻断IL-1β表达、上调NK细胞的杀伤活性有关。
- 刘艳艳梁淑娟王焕芹张素华肖伟玲吴慧娜
- 关键词：肝癌白细胞介素1Β反义RNANK细胞
- 干扰素作用机制及面临的问题被引量：3
- 2009年
- 干扰素（IFN）是一类多功能细胞因子，具有抗病毒、抗增殖、抗肿瘤和免疫调节等多种功能。深入了解IFN的主要分类、活化诱导与信号转导、生物学活性及IFN抵抗的产生机制，可为IFN的临床应用及解决面临的问题提供有力依据。
- 张素华梁淑娟
- 关键词：肿瘤干扰素类生物因子细胞凋亡抗药性
- AFP启动子调控的小鼠IL-1β重组载体的构建及其在肝癌H22细胞中的表达被引量：3
- 2009年
- 目的:构建小鼠甲胎蛋白(AFP)启动子调控的小鼠IL-1β(mIL-1β)重组真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,并检测其在真核细胞内的表达。方法:重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)获得含小鼠AFP最小启动子及巨细胞病毒(CMV)增强子区(ECMV)的嵌合基因,将其克隆至pIRES2-EGFP载体,构建肝癌细胞特异性表达载体pafpIRES2-EGFP。RT-PCR扩增小鼠IL-1β基因,克隆至pafpIRES2-EGFP,进行酶谱分析及DNA序列测定。利用jetPEI法将其分别转染H22细胞和YAC-1细胞,倒置相差荧光显微镜下观察,RT-PCR分析mIL-1β表达水平的变化。结果:SOE-PCR方法获得长度为537bp的AFP和ECMV嵌合基因,克隆后经限制性酶切和DNA序列分析确认成功构建了小鼠肝癌细胞特异性表达载体pafpIRES2-EGFP。PCR扩增小鼠IL-1β基因后将其克隆至pafpIRES2-EGFP,获得AFP启动子调控的小鼠IL-1β重组真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,细胞转染分析证实,该载体能够在小鼠肝癌细胞中特异性高效表达,RT-PCR检测可见转染细胞中mIL-1β水平明显升高。结论:成功构建真核表达载体pafpIRES2-EGFP-mIL-1β,该载体能够在小鼠肝癌细胞中特异性表达IL-1β。
- 李青春梁淑娟王雪净刘艳艳王焕芹张素华
- 关键词：IL-1ΒAFP启动子组织特异性肝癌
- 干扰素作用机制及面临的问题研究进展
- 干扰素(interferon IFN)最早于1957年由Isaacs和Lindenmann发现。半个世纪以来,科学家们已经将干扰素逐步延伸为一个由诸多分子组成的细胞因子家族,目前根据IFN的来源及作用,将天然产生的干扰素...
- 张素华梁淑娟
- 文献传递
- 小鼠IL-1β对肝癌细胞生物学行为的影响及逃逸机制研究
- 目的:构建小鼠促炎性因子IL-1β的真核表达载体,转染小鼠H22肝癌细胞,建立小鼠体内荷瘤模型,研究IL-1β主导的促炎性微环境对肝癌细胞生长、转移及NK细胞免疫活性的影响。
- 肖伟玲梁淑娟刘艳艳王焕芹李青春张素华
- 文献传递
