李艳红
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：广西壮族自治区南溪山医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SELEX技术筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌适配子的研究被引量：3
- 2013年
- 目的利用指数富集的配体进化技术(SELEX)筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的适配子,并研究适配子AM6与MRSA结合的特异性,为研发MRSA的特异性诊断试剂和靶向治疗药物打下基础。方法体外构建81个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库;通过反复的SELEX筛选获得MRSA的适配子并进行一级结构分析;利用荧光显微镜和PCR扩增法鉴定AM6与MRSA结合的特异性。结果经过20轮环筛选,获得了25个与预期大小相同的ssDNA序列,它们之间没有共同的保守序列;AM6仅与MRSA结合,而不与甲氧西林敏感葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)、甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSSCN)、大肠埃希菌结合。结论利用SELEX技术成功地筛选出MRSA的适配子,其中适配子AM6能特异性结合MRSA。
- 汪江波李赞东赵延斌侯德凤廖玲李艳红毛伟丽
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌适配子
- Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子的初步研究被引量：4
- 2012年
- 目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细胞和血管平滑肌细胞为反筛细胞,利用Cell SELEX技术筛选与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的寡核苷酸序列,并对最后一轮筛选结果进行克隆测序。结果 PCR的退火温度对PCR产物的量有显著的影响,退火温度由65℃提高为72℃时的产物量明显增加。利用生物素-链霉亲和素磁珠分离法获得了纯度高、产量大的ssDNA文库;经过18轮筛选后,成功获得了28个与预期大小相同的ssDNA序列。结论利用Cell SELEX技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子,为研发用于动脉粥样硬化的早期无创诊断试剂和靶向治疗药物奠定了基础。
- 汪江波李艳红严鹏科
- 关键词：CELLSELEX技术巨噬细胞源性泡沫细胞适配子
