汪媛媛
- 作品数:5 被引量:8H指数:1
- 供职机构:福州大学更多>>
- 发文基金:福建省医疗器械与医药技术重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种桔霉素-蛋白偶联抗原的双交联化学合成法及其抗桔霉素单克隆抗体的制备方法
- 本发明涉及了一种桔霉素-蛋白偶联抗原的双交联化学合成法及其抗桔霉素单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。该方法用桔霉素先与双交联试剂(C<Sub>2</Sub>H<Sub>3</Sub>O)-(CH<Sub>2</Su...
- 李泳宁郭养浩汪媛媛
- 肺炎球菌表面蛋白A(PspA)的克隆表达及交叉免疫作用被引量:1
- 2009年
- 本工作从中国临床最常见的5种荚膜血清型肺炎链球菌(FY01,FY05,FY6B,FY19F,FY23F)克隆获得编码PspA蛋白N端α-螺旋区的基因片段。分别将5种PspA基因片段克隆到表达载体pET-27b(+)上,成功构建重组质粒pET-pspA,转化大肠杆菌BL21(DE3)。经乳糖诱导表达和亲和层析分离,获得高纯度重组蛋白。通过家族专属引物PCR的方法鉴定这5种荚膜血清型肺炎球菌的PspA蛋白所属家族,并进一步根据基因测序结果通过生物信息学方法鉴定了所属支系。FY01 rPspA、FY6B rPspA、FY19F rPspA同属于家族Ⅰ支系1,FY05 rPspA属于家族Ⅰ支系2,FY23F rPspA属于家族Ⅱ支系3。以FY01 rPspA免疫小鼠,在20μg/mL免疫剂量时抗体滴度达到1:210000,显示了重组蛋白较好的免疫原性。Western blotting交叉免疫反应性研究表明,抗FY01 rPspA抗血清与FY01 rPspA、FY6B rPspA和FY19F rPspA反应性较好,而与另外两种重组蛋白几乎无反应,提示PspA交叉免疫作用仅限于本支系内。动物保护实验表明,FY01 rPspA免疫的小鼠对FY6B、FY01两种菌的攻击具有较好的保护作用,对FY05、FY23F的攻击未见明显的保护作用。本研究成果对于研制高效肺炎球菌疫苗具有重要的指导意义。
- 林子琳林海英汪媛媛白锴凯郭养浩
- 关键词:家族支系克隆表达
- 双交联法制备桔霉素-蛋白质偶联抗原及抗体被引量:7
- 2010年
- 以1,4-丁二醇二缩水甘油醚(双环氧试剂)为偶联剂,合成桔霉素-蛋白质偶联抗原CIT-BSA,经过HPLC分析、紫外扫描和红外光谱鉴定表明,偶联物成功制备,CIT/BSA的偶联比为8.16.通过免疫BALB/C小鼠,获得抗桔霉素多克隆抗体,经间接ELISA检测,效价达到1.1×105.间接竞争ELISA表明,桔霉素(CIT)的最低检测浓度为10μg/L,其线性范围为10~250μg/L,IC50为100μg/L.分析了不同方法制备的偶联抗原的免疫原性,实验表明,桔霉素抗原决定簇C7位置的羧基保留是获得针对桔霉素特异性抗体的必要条件.为快速检测桔霉素的酶联免疫检测技术的建立和检测试剂盒的研制提供技术依据.
- 汪媛媛李泳宁郭养浩
- 关键词:桔霉素抗原抗体
- 一种桔霉素-蛋白偶联抗原的双交联化学合成法及其抗桔霉素单克隆抗体的制备方法
- 本发明涉及了一种桔霉素-蛋白偶联抗原的双交联化学合成法及其抗桔霉素单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。该方法用桔霉素先与双交联试剂(C<Sub>2</Sub>H<Sub>3</Sub>O)-(CH<Sub>2</Su...
- 李泳宁郭养浩汪媛媛
- 文献传递
- 抗桔霉素单克隆抗体的制备及免疫学检测技术研究
- 汪媛媛
- 关键词:桔霉素抗原单克隆抗体酶联免疫检测