王友如
- 作品数：22 被引量：57H指数：4
- 供职机构：湖北师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖北省教育科学“十二五”规划课题国家高技术研究发展计划国家级精品课程建设项目更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学医药卫生更多>>
- 一种优化的质粒转化简便方法被引量：1
- 2011年
- 目的:质粒DNA转化时,比较不同的冰浴时间、热休克时间、预培养时间对转化效率的影响。优化质粒DNA转化方法,缩短了转化时间,该方法可获得与常规转化方法相当的转化效率。方法:质粒DNA加入感受态细胞中,混匀冰浴5min,42℃热休克60s,接着冰浴1min,37℃预培养10min,涂布预热至37℃的平板。结果:操作时间由2h减至20min,转化效率没受影响。结论:该方法较标准的转化流程更加简便、省时、实用。
- 王友如
- 关键词：质粒感受态细胞
- 含VHb基因和GFMcryIA基因的双价基因植物高效表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 将人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体PGBI4ASVHBBt,vgbM基因表达盒中含2个增强子的35S启动子、Ω前导序列、Kozak序列、多联终止密码子及Nos终止子;Bt基因表达盒中,除含有以上提高转录和翻译的调控元件外,还包含有正确切割、加工序列、Poly(A)信号序列。利用根癌农杆菌介导转化烟草,获得了转基因植株;PCR及Southern blot检测,证实了双价基因在烟草基因组中的整合;Western blot检测证实了vgbM基因在转基因烟草中的表达;杀虫实验表明GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。
- 王友如崔洪志郭三堆
- 关键词：双价基因抗虫性活性蛋白
- VHb基因优化及其分别和Bt、Bt-CPTi基因构建的双价基因植物表达载体在烟草中的表达
- 增加作物产量是育种的重要目标之一，传统育种技术进一步提高作物单产上面临困难，而虫害又严重危害作物高产。基因工程可以打破物种间的界限而实现基因的转移，使传统育种技术难以实现的高产、抗虫等性状聚合于一个品种成为可能。已知透明...
- 王友如
- 关键词：BT基因转基因烟草
- 文献传递
- 省属师范院校非生物学类专业生物学教学的探索被引量：2
- 2011年
- 调查发现,我国某些省属院校非生物学专业毕业生的生命科学基础知识相当缺乏,这类高校普遍对在非生物学专业中开设生物学课程的重要性认识不足,缺乏相关的研究和支持。本研究首先阐述了在非生物学类专业开展生物学教学的重要性,然后以省属师范院校为例,分析了地方院校非生物类专业生物学教学开展缓慢的原因,提出了在地方院校非生物学类专业开设生物学课程的实施方案。
- 支立峰侯建军陈雄文王卫东王友如
- 关键词：生物学教学师范院校
- CaCl_2浓度对感受态细胞转化效率的影响被引量：14
- 2006年
- 对于E.coli菌株用8种不同浓度的CaC l2制备感受态细胞,然后转化各浓度的感受态细胞。实验结果表明,不同浓度CaC l2溶液处理所得到的感受态细胞,其转化效率有很大的不同。随着CaC l2浓度增高,转化效率也随之提高,在80m mol/L^100m mol/L时达到峰值,进一步提高CaC l2的浓度,转化效率急剧下降。还探讨了-70℃贮存时间对转化效率的影响。
- 王友如
- 关键词：质粒感受态细胞
- 浮萍rbcS启动子组织特性研究
- 2015年
- SSU5C启动子(全长1 438 bp)是从浮萍基因组中新克隆的一个rbc S(ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase small subunit)启动子。本研究将SSU5C启动子与GUS基因融合,成功构建植物双元表达载p SSU5C-IGUS,并利用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因植株,探究SSU5C启动子在烟草中的组织表达特点。GUS检测结果表明:在T1烟草的营养器官中,SSU5C启动子主要驱动GUS基因在烟草叶片和叶柄、茎等绿色组织中表达,而在根部不表达;在生殖器官中,GUS基因主要在花冠裂片以及花药和柱头中表达。本研究首次发现浮萍rbc S启动子不仅在绿色组织中表达,而且在生殖器官中的花冠裂片以及花药和柱头中表达,这一发现可为SSU5C启动子在植物基因工程中的应用奠定基础。
- 黄凤珍李倩王友如
- 关键词：浮萍GUS基因
- 含融合杀虫基因和VHb基因双价表达载体的构建
- 2010年
- 目的:探索分子育种的新途径,获得高产多抗虫谱的转基因植物。方法:将密码子优化后的透明颤菌血红蛋白(vgbM)基因与融合杀虫基因(GFMcryIA+CPTI)构建成双价基因植物高效表达载体pGBI4ABCVHB,基因表达盒中含2个增强子、35S启动子、Ω前导序列、Kozak序列、多联终止密码子及Nos终止子以及正确切割、加工序列、Poly(A)信号序列。结果:通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了转基因植株,结论:vgbM基因在转基因烟草中有效表达;融合杀虫基因也表达出活性毒蛋白。
- 王友如郭三堆
- 关键词：VHB基因抗虫性活性蛋白
- 浮萍中一个新rbcS基因启动子的克隆及分析被引量：6
- 2010年
- 为了分离组织特异性、诱导性的启动子,本研究根据新克隆的浮萍rbcS基因序列设计引物,采用改进的5'walking技术从浮萍基因组中克隆了一个新的rbcS基因启动子,命名为SSU5C基因启动子。序列分析表明:SSU5C基因启动子长度为1543bp,含有保守性元件TATA和CAATbox,并且含有水杨酸、脱落酸、赤霉素、茉莉酸甲酯等植物激素和葡萄糖等的保守顺式作用元件。Insilico分析初步推测SSU5C基因启动子受多种信号途径的协调调控。
- 王友如
- 关键词：启动子克隆
- 优化的VHb基因和GFMcryIA基因构建的双价基因在烟草中的表达被引量：3
- 2006年
- 利用人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白(VHb)基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了36株卡那霉素抗性植株。经转基因植株的PCR及Southernblot检测,证实了双价基因在35株烟草基因组中的整合。Westernblot检测证实了VHb基因的表达,杀虫实验证实GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。且转基因烟草平均每株干重比非转基因烟草植株高7%。本研究结果表明转基因育种技术在培育出既高产又具抗虫性的作物或经济作物新品种方面具有良好的应用前景。
- 王友如崔洪志郭三堆
- 关键词：双价基因烟草抗虫性活性蛋白
- 浮萍rbcS基因启动子的克隆及其功能分析
- 组成型启动子如CaMV(花椰菜花叶病毒)35S启动子和Ubiquitin(泛素)启动子等广泛应用于转基因植物外源基因的表达。组织特异启动子作为一类专一性启动子，能启动外源基因在植物发育过程中某一特定时空的表达，也能使目的...
- 王友如
- 关键词：浮萍组织特异性表达光调控顺式作用元件转基因植物外源基因
