王艳平
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划全国教育科学“十五”规划教育部重点课题更多>>
- 相关领域：生物学理学历史地理更多>>
- 嗜热酯酶APE1547催化活性的定向进化研究被引量：5
- 2006年
- 对来源于嗜热古菌Aeropyrum pernix的酯酶(APE1547)催化活性进行定向进化研究。利用APE1547特殊的稳定性,建立了准确的高通量高温酯酶筛选方法。对第一代随机突变库筛选获得了催化活性较野生型提高1.5倍的突变体M010,序列分析表明其氨基酸突变为R526S。从第二代突变库中筛选出的总活力提高5.8倍突变体M020,突变位点为R526S/E88G/A200T/I519L,其比活力与M010一致,但表达量比野生型提高约4倍。对M020酶学性质表征发现,其最适pH为8.5,比野生型向碱性偏移0.5;活性中心残基酸性基团的解离常数(pK1)由野生型的7.0提高至7.5。晶体结构分析表明,突变位点R526距离活性中心较近,将其突变为Ser降低了活性中心的极性,抑制了催化残基His的解离,使酸性基团的解离常数升高。
- 王秋岩杨广宇刘艳莉王艳平冯雁
- 关键词：定向进化嗜热酶解离常数
- 溶胶—凝胶法制备大面积三维有序大孔TiO_2薄膜
- 本论文的工作主要是以聚苯乙烯胶体晶体为模板,对溶胶配方做了改进,利用溶胶-凝胶法制备了大面积、三维高度有序、结构完整的大孔TiO_2薄膜,并对其生长条件进行了研究。结果表明:改进后的溶胶配比适中,因此浸渗时间为1min,...
- 王艳平
- 关键词：胶体晶体聚苯乙烯微球
- 文献传递
- 唐代编年体史书考论
- 在司马迁《史记》、班固《汉书》诞生后,纪传体逐渐成为历代编写正史的主要体裁。但魏晋南北朝时期私修史书比较发达,出现了大量编年体著作,所以研究者认为这一时期的编年体也有所发展。而唐代正式确立了设馆修史的制度,此后的官修正史...
- 王艳平
- 关键词：唐代编年体通史《春秋》学正统观
- 文献传递
- 长白山温泉无氧芽孢杆菌的分离鉴定被引量：7
- 2008年
- 【目的】对长白山温泉中嗜热微生物进行分离鉴定,并了解其生理生化特性。【方法】采用橄榄油富集培养基,稀释平板涂布法对长白山温泉样品进行分离得到一株嗜热菌CBS-5;在电子和光学显微镜下观察菌体形态和芽孢;应用生理生化试验、16SrDNA序列分析以及(G+C)mol%含量等方法对菌株特性进行鉴定。【结果】菌株CBS-5为革兰氏阳性菌,无鞭毛,产端生芽孢,最适生长温度为65℃,最适pH7.7左右,能以蔗糖、麦芽糖和乳糖等作为唯一碳源生长,具有酯酶和过氧化氢酶活性,对卡那霉素、红霉素和硫酸新霉素等抗生素均无抗性。Tm法测定该菌的(G+C)mol%含量为41.9%。脂肪酸成分分析表明在CBS-5中iso-15:0的含量最高,为24.20%,与无氧芽孢杆菌属成员一致。以该菌的16SrDNA序列为基础构建了系统发育树;16SrDNA序列同源性比对表明该菌与无氧芽孢杆菌属各种之间的同源性在95.1%-98.5%之间。【结论】菌株CBS-5(=JCM15484)是一株嗜热无氧芽孢杆菌,具有产酶活性,对于研究和开发化工、食品和环境保护方面的工业用酶具有重要价值。
- 刘东来蔡锦刚姚天羽王艳平孔庆阳冯雁
- 关键词：嗜热微生物脂肪酸成分
- 新型瞬时报告载体pRSET-EGFP的构建及表达
- 2004年
- 目的 :利用分子生物学技术和方法将pRSET -B质粒改建为带有绿色荧光蛋白 (GFP)突变体基因 (GFP -S6 5T)的新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并在E .coli.BL2 1中得到GFP基因的高效表达。方法 :PCR法从pEGFP质粒克隆GFP -S6 5TcDNA并在 5’末端引入KpnI的位点。将扩增出来的GFP -S6 5T基因和pRSET -B质粒用HindIII和KpnI双酶切后连接构成重组质粒。用化学法把重组质粒转化到E .coli.BL2 1中 ,培养发酵液OD540 =0 .4时加入IPTG诱导GFP -S6 5T基因转录和表达 ,合成绿色荧光蛋白。还对诱导条件进行了优化 ,发酵液OD540 =0 .4加入IPTG可以得到最优表达。结果 :通过Ni2 + 柱亲和层析 ,纯化得到绿色荧光蛋白 ,SDS-PAGE电泳检测 ,分子量为 2 7kDa ,与文献报道值一致。这说明Ni2 + 柱能够有效的纯化表达产物。结论 :成功构建了新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并且在E .coli.BL2
- 逯家辉孟庆繁高朝辉王艳平王校楠徐岩麻越佳杨亦代滕利荣
- 关键词：绿色荧光蛋白基因表达
- 长白山温泉嗜热菌的分离培养及多相分类学研究
- 本文根据长白山温泉群的环境及地质特点,利用传统可培养微生物的平板分离法结合高度稀释法,通过高温菌选择培养基从温泉水-泥混合样品中分离得到了8株不同嗜热程度的嗜热菌,分别命名为CBS-2 - CBS-9。通过16S rRN...
- 王艳平
- 关键词：嗜热微生物
- 文献传递
