顾文佳
- 作品数：9 被引量：30H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NRSE/RE-1序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系
- 2009年
- 目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中的表达。结果诱导分化后的胚胎干细胞表达多种成熟神经元标志,11种含NRSE/RE-1序列基因随诱导分化的进程表达量升高。结论鼠胚胎干细胞可通过序贯诱导分化为神经细胞,NRSE/RE-1序列可能是胚胎干细胞向神经元诱导分化的主要调控位点。
- 张涛顾文佳刘晓玉庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞神经元细胞分化
- 重度颅脑损伤合并失血性休克的急诊室救治被引量：16
- 2002年
- [目的 ]回顾 12例重度颅脑损伤 ,合并失血性休克患者的急诊室抢救。 [方法 ]采用甘露醇颈动脉输注及高渗盐水静脉输注 ,边降低颅压边抗休克。 [结果 ]入院 2 4h内仅 1例患者死亡。最终死亡率为 5 8.3%。 [结论 ]甘露醇颈动脉输注及高渗盐水静脉输注应成为重度颅脑损伤合并失血性休克早期救治的首选方案。
- 陈卫东顾文佳
- 关键词：重度颅脑损伤合并症失血性休克急救高渗盐水甘露醇
- 诱导小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的方法
- 本发明涉及的是一种诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)向神经细胞分化的方法，该方法采用原代鼠胚成纤维细胞(PMEF)作为饲养层，取mESCs接种于饲养层上，接种于神经干细胞、mESCs培养液的混合液及神经干细胞培养液培养；逐...
- 庞希宁顾文佳李晓丰刘朝阳施萍
- 文献传递
- 诱导胚胎干细胞向神经细胞分化的研究
- 目的:该实验拟摸索出一种简便有效、无毒性的体外大比例诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞的方法,并进一步通过基因芯片分析证实诱导结果,筛选神经细胞分化主导基因.结论:1.该实验摸索出的'序贯诱导法'可以将ESCs大比例诱导成为...
- 顾文佳
- 关键词：胚胎干细胞神经细胞诱导分化
- 文献传递
- 序贯法诱导小鼠胚胎干细胞向神经元样细胞的分化被引量：2
- 2009年
- 背景:目前小鼠胚胎干细胞体外向神经方向诱导分化的研究报道诸多,但其分化的过程很难控制,很多实验的操作方法复杂,分化比率也很低。目的:建立一种稳定、高效、简便的实验方法,将小鼠胚胎干细胞诱导分化为神经细胞。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-08/2008-01在中国医科大学发育生物学教研室完成。材料:小鼠胚胎干细胞系AB2.1,由美国南加州大学医学院惠赠。方法:在饲养层细胞上培养小鼠胚胎干细胞,采用"序贯诱导法",优化实验条件,将小鼠胚胎干细胞向神经方向诱导,对诱导后细胞进行成熟神经细胞标志物鉴定,并用流式细胞仪测定诱导分化比率。主要观察指标:①倒置荧光显微镜下观察小鼠胚胎干细胞形态特征。②优化序贯诱导法的3个实验条件。③实验条件优化后诱导至第10天分化细胞的形态特征。④诱导后第10天细胞免疫荧光法和蛋白免疫印迹检测神经细胞特异性标志物的表达。⑤蛋白免疫印迹检测诱导分化第4天和第10天细胞的神经细胞β-微管蛋白J1的表达。⑥流式细胞仪检测神经元特异性核蛋白阳性细胞百分比。结果:①生长于饲养层上的未分化鼠胚胎干细胞聚集呈圆形或椭圆形集落样生长,细胞排列紧密,集落边界清楚。②优化后的"序贯诱导法"在诱导时首次接种所用培养液的血清浓度为12.5%,小鼠胚胎干细胞首次接种最佳密度为1.0×108L-1,完全更换为无血清培养液的时间为第5天。③诱导至第10天分化细胞出现的突起可达胞体长度的10倍以上。也有小部分分化细胞胞体呈多边形,有多个短突起,仅有一个细长突起,出现突触样结构和生长端样结构,类似神经元。④诱导后第10天细胞免疫荧光法检测神经元特异性标志物巢蛋白、神经细胞β-微管蛋白J1、神经元特异性核蛋白、神经细胞黏附分子1表达阳性,神经胶质细胞标志物胶质细�
- 李晓丰顾文佳刘朝阳张涛刘晓玉庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞神经元诱导分化
- NRSE/RE-1 dsRNA诱导小鼠胚胎干细胞分化为NSE阳性的神经元样细胞被引量：1
- 2009年
- 应用电打孔的方法将化学合成的NRSE/RE-1d sRNA转染小鼠胚胎干细胞,在去除LIF的条件下,直接接种培养,观察其分化情况,并对分化结果进行相关检测.结果显示分化细胞呈明显的神经样改变,免疫荧光显示NSE阳性率为(82.3±8.1)%.说明通过转染NRSE/RE-1d sRNA能有效地诱导小鼠胚胎干细胞向神经元细胞分化.
- 李宏图顾文佳孟凡彪马兰兰庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞SRNA神经元样细胞
- 小剂量HHT为主联合化疗治疗成人慢性难治性特发性血小板减少性紫癜被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨以小剂量高三尖酯碱 (HHT)为主联合化疗治疗成人慢性难治性特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的疗效及副作用。方法 :选择对皮质激素及脾切除术无效的 10例ITP患者给予 1～ 5个疗程的联合化疗。结果 :10例患者有 6例显效 ,其中 2例基本治愈 ;2例获良效 ;1例进步 ;1例无效。副作用 :有 2例出现手指麻木 ,1例出现轻微脱发 ,1例出现轻度骨髓抑制。结论
- 曲东霞顾文佳
- 关键词：特发性血小板减少紫癜联合化疗
- 诱导胚胎干细胞向神经细胞分化方法的研究与探讨被引量：9
- 2004年
- 胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,分析了一些方法的原理并初步探讨其相关的分子机制,并提出一些可行性新方法。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化因其体外的可操作性、来源的广泛性及质量可控性将有可能成为临床上治疗神经系统疾病的有效方法。
- 顾文佳庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞神经细胞分化ES细胞神经系统疾病
- 序贯培养法诱导小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的研究
- 2009年
- 目的诱导小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化。方法通过"序贯培养法"诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,并应用RT-PCR、免疫荧光、端粒酶活性及基因芯片等对诱导结果进行检测。结果分化细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、低分子量神经微丝蛋白(NF-L)、神经细胞粘附分子1(NCAM1)、微管相关蛋白Tau等多种神经元标志物,免疫荧光显示NSE阳性率为(81±9.2)%,而神经胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)几乎不表达。基因芯片分析结果显示,在3张芯片中有8179个基因共表达,另有998个基因的表达完全不同,且有多种神经元基因的标志物表达明显升高。结论通过"序贯培养法"能有效地诱导小鼠胚胎干细胞向神经元分化。
- 顾文佳李宏图刘晓玉庞希宁
- 关键词：胚胎干细胞神经细胞诱导分化小鼠
