马向东
- 作品数：89 被引量：405H指数：10
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 基因体外诱变的一种新方法被引量：3
- 2004年
- 在PCR的过程中 ,采用 5 溴脱氧尿苷三磷酸 (BrdUTP)部分取代脱氧胸苷三磷酸 (dTTP)的方法 ,对克隆的野油菜黄单胞菌的α 淀粉酶基因进行了体外诱变。结果表明 ,BrdUTP浓度越高 ,诱变越强 ;浓度越低 ,诱变越弱。当BrdUTP浓度为dTTP的 0 1 %时 ,可以得到最多的正诱变结果。用LBSP鉴别培养基初筛 ,然后用Yoo改良法测定酶活 ,仅一轮诱变就获得了其表达产物α 淀粉酶的酶活分别降低了 5倍和提高了 2 0倍的两个突变基因。再以后者为PCR模板进行第二轮诱变 ,从而筛选到了α 淀粉酶的酶活提高 4 0倍的突变体。此诱变方法克服了用碱基类似物在体内诱变由于核酸复制酶等的校正作用而造成诱变无效的难题 。
- 马向东柯涛黄春华周俊初
- 关键词：PCR体外诱变Α-淀粉酶基因
- 一种简便快速筛选重组子的方法被引量：6
- 2005年
- 目的:根据碱裂解法抽提质粒DNA的原理,研究应用快检缓冲液方法挑取重组子克隆,从而获得简单易行,快速方便,节省时间,提高工作效率的筛选重组子的方法。方法:不需抽提质粒,只要将菌落接入快检缓冲液后直接进行普通琼脂凝胶电泳分析,就可以快速筛选出重组子。结果:结果和提取质粒酶切鉴定结果一致。结论:经实验证明用快检缓冲液方法筛选重组子是一种简单易行,快速方便,节省时间,提高工作效率并且可靠的方法。
- 崔锦李林珂马向东
- 关键词：重组子
- 基因体外诱变被引量：20
- 2002年
- 综述了基因体外诱变的一般方法和技术,并将其分为不依赖于PCR体外诱变和依赖于PCR体外诱变两大类。着重介绍了基因体外诱变最新突破即DNA Shuffling技术。
- 马向东黄春华周俊初
- 关键词：体外诱变
- 地衣芽孢杆菌WB-11菌株耐高温α-淀粉酶的酶学特性被引量：12
- 2004年
- 从地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis )中分离到一α 淀粉酶组分 ,经PAGE及SDS PAGE检测为电泳均一的纯酶蛋白。该酶最适反应温度为 95℃ ,5 0和 70℃条件下酶活性稳定 ,90℃保温 30min残余酶活力为 2 8 9%。该酶最适作用pH为 6 0～ 6 5 ,在pH 5 0～ 8 0内稳定。酶的相对分子质量为 6 5 90 0 ,等电点 6 94 ,对可溶性淀粉的Km 值为 0 4 1mg·mL-1 。Ca2 + 、Mn2 + 、Cu2 + 、Co2 + 及Ba2 + 对酶具有激活作用 ,其中Ca2 + 激活作用最显著 ,且以 4～ 8mmol·L-1 浓度为最适。Ca2 + 还能显著提高酶的热稳定性 ,4mmol·L-1 Ca2 + ,90℃保温 30min ,酶的残余活力提高至 83%。
- 陈红歌顾溯海任随周马向东贾新成
- 关键词：地衣芽孢杆菌耐高温Α-淀粉酶酶学特性
- 酵母菌3-磷酸甘油脱氢酶基因(gpd1)的克隆及其在高渗胁迫下mRNA转录水平的差异被引量：3
- 2005年
- YY、FHS和WFB是生产中常用的酵母菌株。在高渗胁迫下的生长速度依次为FHS、YY、WFB。克隆gpd1基因片段并测序,再与NCBI公布的gpd1序列(X76859)比较,WFB、YY、FHS的同源性分别为99·32%、99·83%、99·83%,YY、FHS菌株的gpd1序列与NCBI上的gpd1序列(X76859)对应的氨基酸序列完全一致,WFB与它们的同源性只有98·5%。用不同浓度的NaCl培养酵母细胞进行渗透胁迫处理,RNA点杂交显示YY、FHS菌株gpd1基因的mRNA表达量在NaCl浓度上升时候有上升的趋势;WFB菌株gpd1基因的mRNA表达量随NaCl浓度的上升逐渐降低。实验结果显示,gpd1基因mRNA转录水平与抗高渗能力相关。
- 张凡马向东余华顺姚娟郭永豪邢学森阎淳泰梁运祥
- 关键词：脱氢酶基因克隆甘油NCBI胁迫处理
- 一株极端嗜盐真菌的筛选及初步研究被引量：2
- 2018年
- 利用含10%Na Cl的查氏培养基从晒干海鱼上分离到一株极端嗜盐真菌.为了对真菌进行理化鉴定,对分离菌株MF1和购买的标准菌株Phialosimplex salinarum DSM 27530在不同培养基上的培养特征、显微形态特征、耐盐性和在15%Na Cl的条件下的碳源利用能力进行分析检测,发现分离菌株生长盐度范围为0%33%,最适生长盐度为15%,并能够在15%Na Cl的条件下利用淀粉、脂肪、木质素、脱脂奶粉或纤维素为唯一碳源生长,说明该菌株在该条件下产生了相应的酶系.随后,对分离菌株和标准菌株的8个位点基因序列进行克隆与测序,最后进行多基因联合系统发育分析,确定分离菌株MF1属于Phialosimplex.由于分离菌株具有极高的盐度耐受能力和在高盐环境下产生丰富酶系的特性,因此该菌株在耐盐机理和工业应用上具有潜在的研究和应用价值.
- 杜剑晖还萍李岭卓安爽晴江正兵马向东
- 关键词：系统发育
- 温度对大肠杆菌感受态细胞的影响被引量：9
- 2003年
- 在不同的培养温度下制备一系列大肠杆菌感受态细胞,并选取其中一组感受态细胞在4种不同的温度下保存,对培养温度与大肠杆菌感受态形成的关系以及感受细胞在不同保存温度下的保持情况进行了研究.结果表明,不同培养温度下大肠杆菌生长出现高峰期不同.其中,18℃和25℃,出现于对数期早期,而30℃和37℃则出现于对数期中后期.在25℃条件下转化效率最高.感受态细胞在4种不同温度条件下保存,受活菌数和感受态2种因素的影响程度都不同.转化效率在前期都有不同程度的提高,液氮条件下保存感受态细胞时间最长.
- 柯涛张勇法潘园园马向东
- 关键词：温度感受态细胞
- 赊店老酒优质人工老窖泥的培养方法被引量：3
- 2017年
- 通过对人工老窖泥原材料的筛选和配方的优选,赊店老酒制定了一套适应当地环境条件的人工优质窖泥的培养方法,培养出了优质窖泥。将人工窖泥用于新建窖池,效果十分显著。结果表明,投入新窖池生产后第一排就获得了优质酒,第一排产酒己酸乙酯达到了2.5 g/L左右,优质品率38%以上。人工窖泥能改善窖泥风味,增强窖泥的酯香味,减少新窖产酒的邪杂味和泥臭味,增加新酒中的主体香。说明采用此窖泥配方和工艺,可以为赊店老酒生产提供优质窖泥,为赊店老酒的扩大生产奠定了良好的基础。
- 郑彦平周业皓姜鹏徐树林马向东柯涛
- 关键词：浓香型白酒功能菌
- 香菇生料栽培的生物防治初报被引量：1
- 1993年
- 通过对香菇生料栽培培养基中微生物区系变化的分析和混合培养试验,发现编号为①、⑩的2种霉菌能抑制有害霉菌的生长。将2种霉菌进行生产性试验发现,①号霉菌还能促进香菇菌丝生长,提早出菇期,提高产量,是一株很有前途的生物防治菌,可作为生物防治菌进行香菇生料栽培。
- 马向东张春峨吴云汉
- 关键词：香菇栽培生物防治
- 类弹性蛋白ELPs融合表达在抗菌肽分离纯化中的应用(简报)被引量：6
- 2008年
- 抗菌肽（Antimicrobial polypeptides，AMPs）是两性带电分子，广泛存在于多种生物体内，具有广谱抗菌、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物学功能。一些抗菌肽不仅对耐药性的病原细菌有很好的抑制和杀灭作用，而且还对真菌、原生动物、病毒等有很好的抑制作用。近年研究还发现，某些抗菌肽还可选择性杀伤肿瘤细胞，
- 胡凡柯涛李鑫惠丰立徐丽马向东马立新
- 关键词：抗菌肽抑菌活性
