马爱芝
- 作品数：7 被引量：63H指数：4
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划农业科技跨越计划项目更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 富集液中六六六(γ-BHC)脱氯基因的克隆、表达及降解试验被引量：11
- 2005年
- 从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp的基因片段 ,命名为linN ,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达 99% ,与linA1的同源性达 97%。将linN定向克隆到pET 2 9α表达载体中 ,转化至E .coliBL2 1,经IPTG诱导后可表达分子量约 17kD的蛋白 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右 ;诱导后转化子的降解能力明显提高 ,粗酶也有很好的降解效果 。
- 张国顺洪青马爱芝张晓舟李顺鹏
- 甲基对硫磷水解酶酶促反应体系建立及特性研究被引量：6
- 2003年
- 从甲基对硫磷降解菌DLL E4 (Pseudomonasputida)中提取水解酶 ,对其酶促反应进行研究 ,建立了反应体系 :4 74 μLNa2 HPO4 柠檬酸缓冲液 ,12 5 μL甲基对硫磷 ,1 5 μg粗蛋白 ,35℃水浴 5min。水解酶保持稳定的 pH值范围为 5 0～ 10 0 ,最适 pH为 7 0。该酶热不稳定 ,4 5℃ 30min处理 ,酶活下降 5 0 % ;10 0℃ 10min处理可完全灭活。测定了 11种金属离子、TWEEN 80、TritonX 10 0及EDTA对水解酶的作用 ,发现 2 0mmol·L-1CoCl2 对酶活有明显的抑制作用 ,而 2 0～ 0 0 2mmol·L-1的LiCl对酶活有促进作用 ,2mmol·L-1的TWEEN 80和TritonX 10 0可降低 80 %的酶活。
- 刘智马爱芝张晓舟张小华李顺鹏
- 关键词：甲基对硫磷水解酶酶促反应农药污染降解机理
- 六六六(HCH)降解菌Sphingomonassp.BHC-A的分离与降解特性的研究被引量：28
- 2005年
- 从长期受六六六污染的土壤中分离得到一株能以HCH为唯一碳源的高效降解菌株BHC-A。通过对其主要生理生化特征分析,以及16S rDNA序列的测定和同源性比较分析,将BHC-A鉴定为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonassp.)。BHC-A菌株在12h以内能够完全矿化浓度分别为5mg/L的α-、β-、γ-、δ-HCH4种异构体,特别是对β-HCH的降解在国际上也属少例。而前人所报道的γ-HCH降解菌Sphingomonas paucimobilisUT26菌株对β-HCH和δ-HCH不产生降解作用,即使经过24h的培养,对5mg/L的α-HCH的降解率也只有12.6%。在黄瓜的盆钵试验中发现,15d后BHC-A在土壤中对α、β-、γ-、δ-HCH4种异构体的降解率为84.3%,能够有效地消除土壤中六六六的污染,缓解植株受药害症状。
- 马爱芝武俊汪婷张国顺李顺鹏
- 关键词：降解
- 甲基对硫磷水解酶基因的克隆与融合表达被引量：24
- 2003年
- 利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL 1Peudomonasputida)中克隆了甲基对硫磷水解酶基因 (mpd)片段2 5kb ,并进行了测序。通过软件分析开放阅读框和启动子序列 ,表明该序列中最可能为甲基对硫磷水解酶结构基因的阅读框为 76 9～ 1 794区域。软件分析还表明该水解酶前端 4 5个氨基酸为典型的信号肽结构。通过PCR扩增了mpd结构基因 ,亚克隆到表达载体pET 32a中 ,构建了完整的融合表达载体pET MP。转化大肠杆菌BL2 1 (DE3) ,在IPTG的诱导下 2～ 4h甲基对硫磷水解酶表达可以达到最高水平 ;同时还研究了乳糖的诱导效果 ,2 %乳糖诱导 2h就可以起到很好的效果。通过PCR反应验证了mpd基因定位于DLL
- 刘智洪青徐剑宏武俊张晓舟张小华马爱芝朱军李顺鹏
- 关键词：鸟枪法基因分析基因定位
- 六六六农药残留降解菌及其生产的菌剂
- 本发明提供了一种高效降解农药六六六(HCH)的菌剂，所用菌株为BHC-A，经鉴定为Sphingomonas sp.，能以六六六(HCH)为唯一碳源和能源进行生长，并可在短时间内完全高效降解α-、β-、γ-、δ-HCH四种...
- 李顺鹏马爱芝武俊张国顺洪青何健管晓进
- 文献传递
- 六六六农药残留降解菌及其生产的菌剂
- 本发明提供了一种高效降解农药六六六(HCH)的菌剂，所用菌株为BHC－A，经鉴定为Sphingomonas sp.，能以六六六(HCH)为唯一碳源和能源进行生长，并可在短时间内完全高效降解α－、β－、γ－、δ－HCH四种...
- 李顺鹏马爱芝武俊张国顺洪青何健管晓进
- 文献传递
- HCH(六六六)降解菌Spingomonas sp. BHC-A的分离、鉴定和相关lin基因的克隆
- 马爱芝
- 关键词：HCH降解克隆
