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重组腺病毒载体vAd-tat的构建及其在细胞中的表达被引量：7: 2009年; 目的构建含HIV-1tat基因重组腺病毒,观察在不同细胞中外源蛋白Tat的表达,作为DC抗HIV疫苗的基础。方法通过PCR扩增,获得HXB2tat的cDNA片段,定向克隆入腺病毒转移载体pTrack-CMV,线性化后转化含有腺病毒骨架pAd-easy-1的大肠杆菌BJ5183,获得同源重组的质粒prAd-tat,PacⅠ酶切纯化后转染293细胞,包装成具有感染力的复制缺陷型重组腺病毒vAd-tat。结果经PCR、酶切及DNA序列测定,插入片段大小、方向正确,获得具有感染力的含有HIV-1tat基因的重组腺病毒;通过Western blot方法检测,重组腺病毒在293细胞中表达出Mr为15000的蛋白。结论成功构建了含有HIV-1tat基因的腺病毒,并观察到该基因在细胞中的表达。; 王路白雪刘红亮张高红郑永唐; 关键词：HIV-1 TAT 293细胞腺病毒

HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达被引量：2: 2009年; 目的构建含有HIV-1C亚型gp120基因重组腺病毒载体，并在293细胞中表达gp120蛋白。方法PCR扩增，获得HIV-1C亚型gp120片段，定向克隆人腺病毒转移载体pTrack-CMV，线性化后转化至含有腺病毒骨架载体pAd-easy-1的大肠埃希菌BJ5183，获得重组子prAd—gp120，PacI酶切纯化后转染293细胞，包装成复制缺陷型重组腺病毒vAd—gp120。结果经PCR、酶切及DNA测序，插入片段大小、方向正确，获得了具有感染力的vAd—gp120重组腺病毒；通过Western印迹检测，重组腺病毒在293细胞中表达出分子量为120kD的蛋白。结论成功构建了含有HIV-1C亚型gp120基因重组腺病毒载体，并获得该基因的表达。; 白雪庞伟王路张高红郑永唐; 关键词：HIV-1 密码子优化腺病毒

HIV-1 C亚型密码子优化gp120负载人DC疫苗的构建及体外功能: 2010年; 目的构建HIV-1C亚型gp120负载人树突状细胞(dentriti ccell,DC)疫苗,并对其体外功能进行初步检测。方法利用Amaxa细胞核转染技术将pcDNA3.1-gp120质粒转染至人成熟DC,以Western blot检测gp120的表达。通过流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的变化、混合淋巴细胞反应、CD8+T细胞表面活化分子CD25的表达及其分泌IFN-γ的变化。结果通过Western blot检测,gp120在DC中得到了正确表达。经流式细胞仪检测,DC表面分子CD80表达率由刺激前的33.34%上升至43.20%,CD86表达率由刺激前的60.08%上升至90.34%;负载gp120DC刺激淋巴细胞增殖率为86.72%;CD8+T细胞表面分子CD25表达率由刺激前的5.27%上升至74.21%,IFN-γ的表达率达37%。结论负载了HIV-1gp120的人树突状细胞能够显著刺激淋巴细胞的增殖、增强CD8+T细胞表面活化分子CD25表达以及促进CD8+T细胞分泌IFN-γ,为下一步DC治疗性疫苗的体内研究奠定基础。; 白雪夏厚军戴正喜马建平李少遊郑永唐; 关键词：HIV-1 C亚型密码子优化 GP120

红厚壳、薏苡仁和海南粗榧提取物的体外抗HIV-1活性(论文摘要): 目的:研究红厚壳、薏苡仁和海南粗榧3种中药提取物的体外抗HIV-1活性。方法:采用细胞毒性实验、合胞体形成抑制实验、HIV-1感染细胞保护实验对3种中药的提取物进行体外抗HIV-1活性筛选;对初筛有活性的提取物采用HIV...; 李春艳白雪曾艳波戴好富彭芳郑永唐; 关键词：红厚壳海南粗榧提取物抗HIV-1

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白雪