秦晓永
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 抗凝蛋白EH体外活性检测条件的建立被引量：5
- 2011年
- EH蛋白是一种水蛭素衍生物,它是在水蛭素的N端引入了一小段寡肽,该寡肽可被凝血因子XIa(factor XIa,FXIa)和Xa(factor Xa,FXa)裂解释放水蛭素的抗凝血酶活性。比较在不同条件下FXa裂解EH蛋白的效果,包括裂解时间(2h,4h,6h,8h,10h,20h)、裂解温度(25℃,37℃,40℃),FXa与EH蛋白摩尔比(1∶300,1∶180,1∶60),反应溶液(水、生理盐水、裂解缓冲液)。分别采用凝块法和TH生色底物法检测EH蛋白经FXa裂解后的体外抗凝血酶活性。FXa对EH的裂解活性在一定条件下与反应时间和温度成正比,裂解活性随FXa的摩尔数增加而增强。反应溶液对其裂解活性影响较弱,其中生理盐水为最适裂解溶剂。最终确定EH体外活性检测时最适裂解条件为:用生理盐水稀释EH样品,FXa与EH的摩尔比为1∶180,在37℃裂解6h。此法裂解EH蛋白,操作方便,所测活性重现性好,适合作为EH蛋白质量控制中活性测定的方法。
- 秦晓永于爱平王文文毕建进郭晓军袁洪水吴祖泽靳继德朱宝成
- 关键词：水蛭素抗凝活性
- 低出血抗凝新药EH的发酵、纯化及质量检测
- 本论文建立了EH的工程菌高密度发酵及蛋白分离纯化工艺,用所制得的蛋白冻干品研究并建立了部分质量控制标准,为EH新药的申报提供了坚实的基础。主要内容如下：
建立了低出血抗凝新药EH的高密度发酵及其分离纯化工艺。1...
- 秦晓永
- 关键词：抗凝水蛭素发酵纯化
- 文献传递
