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TGF-β1在人支气管上皮细胞恶性转化中的作用被引量：6: 2002年; 目的　研究人支气管上皮细胞恶性转化过程中 ,TGF β1表达水平的变化及其对细胞生长、增殖的影响 ,为进一步研究辐射诱发肿瘤发生的机理奠定基础。方法　在 2 4孔板中按 5× 10 4细胞 /孔分别接种对数生长期的BEP2D及BERP35T 2细胞 ,用一定浓度的TGF β1处理 ,计数 ,绘制细胞生长曲线 ,同时于光镜下观察细胞形态及生长状况。用westernblot方法检测胞浆内及分泌到培养液中的TGF - β1的丰度。结果　两种细胞胞浆内的TGF β1表达水平无明显差异 ,但BERP35T 2细胞分泌到培养液中的TGF β1丰度约为BEP2D细胞的 5倍。TGF β1对两种细胞的生长均有抑制作用。在相同的浓度下 ,TGF β1对BERP35T 2细胞的生长抑制作用较BEP2D细胞弱。结论　在辐射诱发人支气管上皮细胞恶性转化过程中TGF β1对其生长抑制作用减弱。; 霍艳英张开泰李邦印段瑞峰胡迎春项晓琼谢玲吴德昌; 关键词：TGF-Β1 人支气管上皮细胞恶性转化肿瘤发生

α粒子诱导人支气管上皮细胞转化相关基因的分离与克隆被引量：5: 1999年; 目的探索α粒子照射诱导人支气管上皮细胞转化的相关基因，并加以克隆。方法采用了ｍＲＮＡ差异显示技术，通过辐射诱发转化细胞与同代未经照射细胞的对比，找出差异ｃＤＮＡ片段。结果克隆出２ｇｓ３，５ｇｓ１，５ｇｓ２，２ｇｄ１，６ｇｄ１５个差异片段，测序，经文献检索发现除５ｇｓ１外均为新序列，已登录到ＥＭＢＬ库中。结论发现了细胞转化早期的新序列的４个ｃＤＮＡ片段，生物学特性与功能有待研究。; 周晓吴德昌程书钧胡迎春舒为群李刚; 关键词：人支气管上皮细胞 MRNA差异显示

PCR快速筛选质粒cDNA文库方法的建立被引量：8: 1999年; 目的　建立一种快速、有效地筛选质粒ｃＤＮＡ文库的方法—ＰＣＲ法。方法　将质粒ｃＤＮＡ文库重组子进行矩阵排列，然后用特异引物进行ＰＣＲ逐级筛选以获得目的克隆。结果　经两轮筛选（约１周的时间）获得４株阳性克隆。结论　ＰＣＲ矩阵筛库法不仅适用于常规ｃＤＮＡ克隆的筛选，还适用于筛选较短的ｃＤＮＡ片段，比常规的筛库方法更为灵敏、特异、高效。; 胡迎春张开泰吴德昌李刚项晓琼; 关键词：PCR 质粒 CDNA文库全长克隆

BEP2D细胞恶性转化不同时期差异表达基因的筛选: 2003年; 目的　筛选并鉴定α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞 (BEP2D)恶性转化不同时期差异表达的基因。方法　抑制消减杂交 (SSH) ,cDNA芯片。结果　利用SSH构建了BEP2D细胞 3个恶性转化不同时期差异表达基因的文库 ,BEP2D细胞的文库有 4 16个克隆 ,R15H2 0细胞的文库有 30 1个克隆 ,R15H35细胞的文库有 5 86个克隆 ,经cDNAMicroarray验证发现 :BEP2D细胞文库来源的芯片与 3代细胞探针杂交后的阳性信号率为 90 4 %、2 1 6 %和 19 7% ;R15H2 0细胞文库来源的芯片的阳性信号率为 8 6 %、93 8%和 31 6 % :R15H35细胞文库来源的芯片的阳性信号率为 2 3 5 %、18 2 %和 90 7%。结论　联合应用SSH和cDNAMicroarray是筛选和鉴定不同样本中差异表达基因的快速和有效方法 ;经cDNAMicroarray鉴定出的 3个文库中差异表达的cDNA可能代表了α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化相关的基因。; 范保星张开泰孙敬芬项小琼谢玲胡迎春王升启吴德昌; 关键词：表达基因抑制消减杂交永生化人支气管上皮细胞癌症

辐射诱发BEP 2 D恶性转化中Smad 7对TGF-β/SMADs信号通路的调控被引量：6: 2003年; 目的　研究BEP 2D细胞经辐射诱发恶性转化过程中 ,作为SMAD蛋白家族的抑制分子 ,Smad 7对TGF β SMAD介导信号通路的调控。方法　用Northernblot检测TGF β刺激之后 ,永生化BEP 2D细胞及辐射诱发恶性转化的BERP 35T 2细胞中Smad 7mRNA的表达水平。人工合成SMAD结合元件 (SBE)重复序列 ,同报告基因碱性磷酸酶融合。构建好的载体同Smad 7真核表达载体共转染 ,TGF β刺激 ,通过报告基因的表达丰度来检测Smad 7对TGF β SMADs介导的信号通路的调控。结果　Northern杂交结果表明 ,永生化细胞Smad 7基因对TGF β刺激的应答正常 ,恶性化细胞的应答降低。基因转染的结果表明 ,永生化细胞中SBE的基础活性较恶性化细胞高 ;TGF β刺激之后 ,永生化细胞中SBE活性显著增强 ,恶性化细胞变化不明显 ;同Smad 7真核表达载体共转染之后 ,两种细胞中SBE活性均显著降低。结论　在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中 ,Smad 7基因对TGF β信号通路的反馈调节作用发生紊乱 ,使TGF β信号通路持续处于抑制状态 ,TGF β对细胞的负性调控作用减弱 ,细胞进一步向恶性化发展。; 霍艳英张开泰李邦印段瑞峰徐勤枝胡迎春项晓琼李刚吴德昌; 关键词：BEP2D 恶性转化 TGF-Β SMADS 信号通路

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胡迎春