许晓娟
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:安徽大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ突变体的构建及产物分析被引量:1
- 2010年
- 目的构建红色糖多孢菌糖基转移酶EryCⅢ失活突变体,为探索红霉素糖基结构修饰和合成新型红霉素衍生物打下基础。方法通过PCR扩增方法将eryCⅢ基因缺失130bp后,克隆至同源重组型质粒pWHM3上,构建pWHM3-ΔeryCⅢ,将其导入红色糖多孢菌A226中。经过两次同源重组,筛选出1株缺失EryCⅢ酶活性的红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ突变体。使用抑菌实验、薄层层析和质谱对其发酵产物进行分析,并通过回补实验进一步验证。结果与结论对红色糖多孢菌A226-ΔeryCⅢ染色体序列测定表明,eryCⅢ基因相应位点缺失130bp,突变菌株发酵产物对枯草芽孢杆菌无抑制作用,薄层和质谱结果表明突变菌株积累3-L-mycarose红霉内酯B(MEB),而并没有发现红霉素产物。回补验证发现eryCⅢ基因导入A226-ΔeryCⅢ使得其恢复了红霉素合成能力。所构建的红色糖多孢菌EryCⅢ失活突变体A226-ΔeryCⅢ,为探讨组合合成红霉素衍生物奠定基础。
- 许晓娟黄训端赵玮郭金华陈惠鹏曹诚张部昌
- 关键词:红色糖多孢菌糖基转移酶同源重组红霉素
- 糖多孢红霉菌糖基转移酶突变体的构建及其产物鉴定
- 红霉素(erythromycin)是一类应用于临床上的大环内酯类抗生素,由糖多孢红霉菌(Saccharopolyspora erythraea)发酵产生。它在保障人类健康方面发挥了重要作用,但令人困惑的是日益严重的耐药性...
- 许晓娟
- 关键词:糖多孢红霉菌糖基转移酶同源重组
- 文献传递