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猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育与鉴定: 从临床表现为断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,用猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代,培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG...; 刘长明张超范危艳武谭斌陆月华谷守林; 关键词：猪圆环病毒2型; 文献传递

猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育和鉴定: 从临床表现为断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,用猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代,培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG...; 刘长明张超范刘焕章危艳武谭斌陆月华谷守林符芳崔尚金; 关键词：猪圆环病毒2型; 文献传递

PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及应用: 本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法,研制成PRRSV-IPMA试剂盒。对试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等指标进行了试验,并与进口试剂盒进行了...; 谭斌刘长明危艳武张超范冉多良刘永刚陆月华; 关键词：抗体检测试剂盒; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制被引量：6: 2006年; 对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制目前尚未完全阐明,有报道认为病毒中和抗体对抗感染不起保护性作用,甚至起负作用。近年来的研究结果表明,中和抗体在保护性免疫中起重要作用。文章针对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与清除,病毒抗原表位与中和抗体的产生机制,病毒感染动物免疫应答反应模型,病毒中和抗体在保护性免疫中的作用等内容做一综述。; 谭斌刘长明冉多良危艳武张超范; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒中和抗体保护性免疫

猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究: 以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染...; 刘长明危艳武张超范谭斌陆月华孔宪刚; 关键词：猪圆环病毒2型生物学特性; 文献传递

PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用被引量：33: 2006年; 建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比较。结果显示，用该试剂盒检测PRRSV人工接种猪血清样品，第1周抗体阳性检出率为50％，从第2周起抗体阳性检出率均为100％，而对照组猪血清抗体检测均为阴性。该试剂盒重复性好，-20℃保存18个月稳定，与其他病毒参考血清无交叉反应，与国外IDEXX ELISA试剂盒的符合率为83．3%。用该试剂盒对采自黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场的520份正常猪血清样品进行了抗体检测，结果，4个猪场阳性率高达90％以上，仅有2个猪场为阴性，其余猪场阳性率为10％～57%。; 谭斌刘长明危艳武张超范刘永刚冉多良; 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒

猪圆环病毒2型遗传标记毒株的构建及生物学特性鉴定被引量：8: 2006年; 以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ限制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明,在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原,其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致。鉴于新病毒基因组内插入一个SalⅠ酶切位点,用PCR与限制性片段长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别。新毒株经细胞连续传60代,体外培养增殖性能稳定,毒价可达10^(6．6)TCID_(50)/mL。取病毒培养物经静脉和滴鼻途径接种35日龄抗体阴性仔猪4头,接种后表现出体温升高、进行性消瘦、被毛粗糙及体表淋巴结肿胀症状,迫杀后多种脏器中均能检测到病毒抗原与核酸。研究表明,利用感染性分子克隆手段构建带有遗传标记的PCV2新毒株,为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、分子诊断等研究奠定了基础。; 刘长明危艳武张超范谭斌陆月华孔宪刚; 关键词：猪圆环病毒2型生物学特性

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)持续感染与保护性免疫应答机制: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是以母猪生殖障碍和仔猪严重呼吸困难导致的高死亡率为特征的一种高度接触性传染病。本病于1987年首次在美国发现,又称'蓝耳病',已流行于世界许多国家和地区,在我国也呈地方流行,对; 谭斌刘长明冉多良危艳武张超范; 关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒蓝耳病; 文献传递

猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育和鉴定被引量：30: 2006年; 从临床表现为仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染,采用无污染的猪肾细胞系(PK15)分离培养,并连续传代培育成一株细胞培养适应毒,命名为PCV2/LG株。分离毒株经细胞培养,于第25代后毒价显著升高,于第35代毒价可达105.6TCID50/mL。采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)、免疫电镜技术、分子克隆及核酸序列分析等鉴定表明,分离株感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质中;病毒感染的阳性细胞呈散在分布,阳性细胞数可达50%以上;免疫电镜观察到与PCV2特异抗体结合形成的病毒免疫复合物呈实心小颗粒样粒子团,病毒粒子直径约为17nm;病毒抗原基因组由1768个核苷酸组成,与GenBank登录的8个PCV2基因组序列同源性达96.2%以上。用2mL的病毒细胞培养物(105.6TCID50/mL)接种30日龄PCV2抗体阴性仔猪3头,可引起典型PMWS临床症状。本研究为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础。; 刘长明张超范危艳武谭斌陆月华谷守林; 关键词：猪圆环病毒2型病毒分离鉴定细胞质

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谭斌