贺小彦
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家烟草专卖局基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 利用SMART技术构建烟草茎全长cDNA文库被引量：4
- 2012年
- 以烟草不同生长时期茎混合为材料,采用SMART(switching mechanism at5'end of RNA transcript)技术构建了茎全长cDNA文库.原始文库的库容为5.64×106个独立克隆,重组率达99%以上,插入片段集中在0.75-2.0 kb之间,平均长度约为1.2 kb.随机挑取部分克隆进行测序,并进行生物信息学分析,37.5%的序列烟草已有报道,62.5%为烟草未报道的基因,45.8%是未知功能的基因,表明所构建文库达到了用于目的基因分离筛选和新基因克隆的建库要求.
- 蔡铁城曾建斌陈顺辉陈华贺小彦张冲庄伟建
- 关键词：烟草SMART技术CDNA文库
- 烟草受激素诱导和逆境胁迫相关基因的克隆与表达分析
- 烟草(Nicotiana tabacum)是转基因的模式植物，也是我国重要的经济作物，每年为国家经济发展做出重要贡献，但烟草生产上因受逆境胁迫和病虫危害每年损失很大。分离鉴定烟草受非生物胁迫如激素和环境胁迫诱导的功能基因...
- 贺小彦
- 关键词：烟草激素诱导基因克隆生物信息学
- 烟草优质品种叶片全长cDNA文库的构建和质量分析被引量：2
- 2012年
- 为研究优质烟叶的分子基础,以翠碧一号不同生长时期的叶片为材料,CTAB法提取总RNA,利用SMART技术合成全长cDNA,之后按经修改的Clontech技术成功构建了烟草叶片全长cDNA文库。经鉴定,初级文库库容为3.85×106个克隆,重组率为100%,重组子插入片段集中在750-2000 bp之间。随机挑取25个克隆测序后,经生物信息学分析表明,烟草上已经报道的基因占10条,11条为全长基因序列;20条序列有功能注释。综合分析表明,所构建的文库质量较高,达到了基因的分离、筛选和克隆的建库目的。
- 曾建斌陈顺辉陈华贺小彦姜宝杰张冲蔡铁城庄伟建
- 关键词：烟草叶片SMART技术CDNA文库
- 青枯菌诱导的花生根全长cDNA文库的构建被引量：3
- 2013年
- 以优质抗青枯病花生品种闽花8号为材料,在苗期利用灌根法接种花生青枯菌,分不同时期取根,利用改良的CTAB-LiCl法提取接种和非接种的混合RNA,采用SMART（Switching Mechanism At 5＇end of RNATranscript）技术合成双链cDNA,经SfiⅠ酶切后胶回收纯化双链cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上,电击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,成功构建了青枯菌诱导的处理和对照混合全长cDNA文库.经鉴定,初级文库库容为1.78×10 cfu/mL,重组率达到99％以上,插入片段集中在750～2 500 bp之间,平均长度约为1 300 bp,经扩增后的文库滴度为2.97×109 cfu/mL.随机挑取部分克隆测序,利用生物信息学软件进行初步分析获得一些EST数据.说明得到了高质量的全长cDNA文库,这为筛选和克隆青枯菌诱导的胁迫相关基因提供了资源基础.
- 张冲曾建斌陈华姜宝杰贺小彦庄伟建
- 关键词：花生青枯病SMART技术CDNA文库
