王彦
- 作品数：6 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项中国初级卫生保健基金会佑安肝病/艾滋病基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIV-1 CRF_BC重组亚型耐药相关新突变位点的复制动力学研究
- 2015年
- 目的研究HIV-1CRF_BC重组亚型逆转录酶（RT）区耐药相关新突变位点1132L、T139K／R对非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）药物敏感性和病毒复制动力的影响。方法通过点突变的方法将HIV-1B亚型感染性克隆PNL4—3RT区的第132位和第139位氨基酸分别突变为亮氨酸（L）和苏氨酸（T）／精氨酸（R），与本课题组已经构建的HIV．．CRF07-BC亚型RT区1132L和T139K／R突变感染性克隆，共同转染293T细胞系进行病毒包装并检验病毒感染性。检测突变病毒对于NNRTIs的药物f依曲韦林（TMC-125）、地拉夫定（DLV）、奈韦拉平（NVP）、依非韦伦（EFV）]敏感性，及其复制动力学特征。结果通过点突变的方法成功构建感染性克隆PNL4-3-RT—1132L、PNL4—3-RT．T139K和PNL4—3-RT—T139R。1132L和T139K／R在B亚型和CRF07-BC亚型中均能降低HIV．1对于NNRTIs的药物敏感性，体现为半数有效浓度（EC50）的升高。在CRF07-BC亚型中，1132L分别使EC50升高2．55、19．35、28．05和6．13倍；T139K分别使EC50升高4．67、3．66、7．35、3．30倍；T139R分别使EC50升高1．82、4．69、25．12和1．89倍；在B亚型中，1132L分别使EC50升高3．91、4．61、6．38和3．56倍；T139K分别使EC50升高3．13、1．78、2．26和2．10倍；T139R分别使EC50升高5．79、3．99、5．78和2．75倍。PNL4．3．RT-132L／139K／139R与野毒株PNL4—3的复制速度相近，且P24均在第11天达到峰值。但与对照株BC—wT相比，BC—RT—1132L／T139R推迟了P24到达峰值的时间，BC—RT-T139R的P24值在第14天达到峰值，BC—RT-I132L在第21天达到峰值，且峰值略低。结论HIV-1CRF_BCRT区新的耐药相关位点1132L和T139K／R在B亚型及CRF07-BC亚型感染性克隆上均可降低病毒对NNRTIs的药物敏感性，1132L在CRF_07BC亚型的感染性克隆上能够降低病毒的复制能力。
- 焦洋黄洋李书明李臻鹏王彦殷倩倩马丽英
- 关键词：HIV-1药物敏感性
- HIV-1标准株资源库的初步建立与应用被引量：1
- 2023年
- 目的构建代表我国HIV-1主要流行亚型的标准株,建立种子库和工作库。方法按照《病原微生物菌(毒)种标准株艾滋病病毒毒株建立技术规范》要求,复核鉴定分析病毒的基因型和表型。对6株HIV-1标准株进行逐级放大扩增培养,构建第二代种子库和第三代的工作库,液氮冻存。结果获得了6株HIV-1标准株,其中3株为CRF07BC(NRPC2.4.9003、NRPC2.4.9005、NRPC2.4.9006),1株为CRF01AE(NRPC2.4.9001),1株为CRF08BC(NRPC2.4.9002),1株为URF(NRPC2.4.9004)。表型检测6株病毒均为CCR5嗜性、非融合诱导型。TCID_(50)均大于1×10^(5)/ml,p24抗原浓度均高于2 ng/ml,构建了每株不少于20支的种子库以及每株不少于50支的工作库,应用HIV-1标准株对抗病毒药物PEG2kC34、PEG5kC34、LP-19以及中和抗体LSEVh-LS-F进行评价。结论获得了涵盖我国主要流行亚型的HIV-1标准株6株,建立了HIV-1标准株资源库。填补了我国HIV-1标准株保藏的空白,为药物和疫苗评价提供了技术支撑。
- 任莉何林朱美玲王彦孔德生王琛冯毅邵一鸣邢辉马春涛马丽英
- 关键词：人免疫缺陷病毒资源库
- 不同治疗效果的艾滋病患者抗病毒治疗前HIV-1 gp120准种特征差异被引量：1
- 2017年
- 目的探讨HIV-1 gpl20准种在不同治疗效果的艾滋病患者抗病毒治疗前的特征差异。方法回顾性收集治疗方案为AZT＋NVP＋3TC的艾滋病患者在抗病毒治疗前的血浆样本，包括病毒抑制（vs）组12例，治疗失败（TF）组12例。采用单基因组扩增技术获得gp120准种序列，分析比较遗传多样性、氨基酸长度、潜在糖基化位点及特征性氨基酸的特点。结果本研究共获得gpl20序列365条序列，其中vs组168条（6-20条），TF组197条（7-28条）。TF组的gpl20准种复杂度高于vs组，差异有统计学意义（P=O．003）；TF组的gpl20准种ds及dN中位数均高于vs组（P=0．017；P=0．002）。TF组HIV-1准种gpl20氨基酸长度长于VS组（P=0．001）。TF与vs组的gpl20准种相比共有9个氨基酸位点存在明显差异，多数分布在V1/V2区（6／9，66．6％）。结论不同治疗效果的艾滋病患者治疗前的HIV-1gpl20准种基因特征存在差异，TF组患者来源的HIV-1准种遗传多样性更高。
- 欧阳雅博孔德生王彦王琛李臻鹏焦洋殷倩倩陈德喜马丽英
- 关键词：GP120准种
- 基于HIV-1 pNL4-3构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆被引量：1
- 2014年
- 目的在感染性克隆pNL4-3骨架上构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆。方法通过融合PCR将CRF07_BC pXJDC13的V3环与pNL4-3的env骨架进行融合并克隆至pNL4-3上。经过鉴定后将阳性V3嵌合克隆pNL4-3/XJDC13V3转染到293T细胞进行病毒包装并检测病毒的感染性。V3嵌合病毒的细胞嗜性分别用Ghost细胞系和MT-2细胞进行测定。结果利用融合PCR克隆方法在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3的嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合病毒利用的辅助受体为CCR5,不能利用CXCR4,也不能在MT-2细胞上诱发合胞体。结论在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合分子克隆为进一步研究CRF07_BC嗜性转变中V3关键位点提供了有利工具。
- 张磊王彦马丽英王海宁邵一鸣
- 关键词：人类免疫缺陷病毒V3嵌合病毒
- HIV-1感染者血浆病毒RNA与全血前病毒DNA的比较被引量：5
- 2016年
- 目的分析艾滋病病毒1型(HIV-1)DNA在长期抗病毒治疗过程中的动态变化及与血浆RNA的比较。方法纳入2004-2014年接受拉米夫定为主的一线治疗方案的44例HIV-1感染者,通过建立Taqman实时荧光定量法对全血HIV-1DNA进行定量检测,并与血浆RNA病毒载量进行比较。结果治疗前HIV-1DNA与血浆RNA病毒载量呈显著的正相关关系(P=0.003),但是与CD4+T淋巴细胞数之间的相关关系没有统计学差异(P=0.505)。通过分析治疗失败的15人HIV-1DNA的动态变化,发现8人在治疗过程中HIV-1DNA水平的动态变化与血浆RNA病毒载量呈现显著的相关关系(P值均<0.05),其他7人尽管没有统计学差异,但是HIV-1DNA水平与血浆RNA病毒载量呈现相同的变化趋势。结论 HIV-1DNA与血浆RNA病毒载量呈现相关关系,因此,全血HIV-1DNA的检测可作为HIV-1感染者长期疾病进展的辅助监测指标。
- 殷倩倩徐维四焦洋王彦孔德生廖玲洁马丽英
- 关键词：艾滋病病毒1型实时定量聚合酶链反应
- 我国HIV-1 CRF01_AE毒株辅助受体利用的基因预测可行性研究被引量：1
- 2019年
- 目的探讨HIV-1辅助受体基因预测工具对我国流行的CRF01_AE毒株辅助受体利用的可行性。方法从北京市、广西壮族自治区、四川省的HIV-1感染者中分离出CRF01_AE毒株22株,利用基因型方法(11/25规则、WebPSSM和geno2pheno)对病毒辅助受体利用情况进行预测,将预测结果与经GHOST细胞系检测的表型实验结果进行比较。结果经GHOST细胞系检测,22株CRF01_AE毒株中,4株利用CCR5/CXCR4辅助受体,18株利用CCR5辅助受体。11/25规则预测与表型实验的一致率为86.4%;geno2pheno中,G2p-clinical、NGS-sanger和G2p-colon模型预测与表型实验的一致率分别为95.5%、86.4%和68.2%;WebPSSM中,PSSM-sinsi_B、PSSM-x4r5和PSSM-sinsi_C模型预测与表型实验的一致率分别为86.4%、72.7%和45.5%。结论对于我国CRF01_AE毒株的HIV-1感染者,在使用辅助受体拮抗剂之前应进行辅助受体利用的预测,Geno2pheno是较准确的辅助受体基因预测工具。
- 刘威男肖瑶王琛张媛媛丁奕博王彦冯毅马丽英
- 关键词：HIV-1辅助受体基因预测
