孙金钰
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 环状排列黄色荧光蛋白（cpYFP）在毕赤酵母中的表达及性质研究
- 在自由基生物学与医学领域,自由基的特异性检测与分析是一个热点和难点。作为超氧阴离子自由基的特异性探针,环状排列黄色荧光蛋白(cpYFP)具有重要的应用前景。然而,目前仅有极少数论文简单报道了cpYFP在大肠杆菌中的表达与...
- 孙金钰
- 关键词：毕赤酵母
- 文献传递
- 环状排列黄色荧光蛋白在大肠杆菌及毕赤酵母中表达的比较研究被引量：3
- 2014年
- 采用基因工程方法,实现了cpYFP在毕赤酵母X33的表达,并与大肠杆菌BL21(DE3)表达做对比.结果表明,毕赤酵母胞外分泌的目的蛋白不仅背景较大肠杆菌表达的清晰,且荧光强度为前者的3倍.同时,毕赤酵母表达的重组cpYFP对超氧阴离子自由基反应的灵敏性高于大肠杆菌表达的cpYFP.这些结果表明,毕赤酵母表达体系可作为制备重组cpYFP的良好体系,也为cpYFP在自由基生物学领域的广泛应用提供充足的原料来源.
- 孙金钰郑屹峰巫启明郭建辉林春通刘树滔饶平凡
- 关键词：大肠杆菌毕赤酵母
- 人Cu,Zn-SOD在重组毕赤酵母中表达的发酵工艺研究被引量：7
- 2014年
- 以表达人Cu,Zn-SOD的重组毕赤酵母为出发菌株,通过摇瓶实验研究发酵初始pH值、诱导剂浓度、诱导温度和培养基组成等因素对目的蛋白表达水平的影响.实验结果表明,培养基组分对目的蛋白表达水平的影响最大.与YPG培养基相比,菌株在FM22培养基(含0.15%组氨酸及PTM4)中目的蛋白表达量提高5.5倍.在优化摇瓶发酵条件下(诱导剂浓度1%,诱导温度27℃,FM22培养基(含0.15%组氨酸及PTM4),初始pH值为6.0),发酵液上清酶活水平为895 U/mL,较初始提高8.5倍;以摇瓶实验结果指导5 L罐发酵,得到13 539 U/mL酶活,为摇瓶试验的15倍.
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- 关键词：毕赤酵母发酵培养基
- 超氧化物歧化酶重组酵母的构建及其发酵条件的优化被引量：3
- 2017年
- 超氧化物歧化酶(SOD)由于具有高效清除氧自由基的作用而广泛用于食品、日化和医药领域。作者研究了提高SOD产量的基因工程新方法。利用密码子优化后人源铜锌超氧化物歧化酶基因,构建亚克隆及表达载体,最终转化进巴斯德毕赤酵母进行表达。通过正交试验,分析工程菌的最适摇瓶表达条件。摇瓶正交试验确定最优表达条件为:28℃,诱导剂体积分数1.0%,接种体积分数1.0%,最优表达水平为2 339.4 U/mL,与现有的一些研究相比,其表达量提高了近3倍。这些结果表明:对人源铜锌SOD经过适当的密码子优化和发酵条件优化,使酵母表达量显著提高,有助于解决SOD原料来源的局限。
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- 关键词：基因工程巴斯德毕赤酵母
