齐谢敏 作品数:15 被引量:61 H指数:5 供职机构: 南京军区南京总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 教育部重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 理学 更多>>
有限采样法估算肾病患儿口服咪唑立宾药时曲线下面积模型的建立与验证 被引量:2 2020年 目的使用传统方法计算药时曲线下面积(AUC0-t)需要多点采集血样,患者依从性差,研究成本过高,不适合在临床使用。文章旨在使用有限采样法估算肾病患儿口服咪唑立宾AUC0-t,并研究咪唑立宾有效性与AUC0-t的相关性。方法收集18例肾病综合征患儿样本,使用高效液相色谱法测定不同时间点的咪唑立宾血清药物浓度,以单点或两点建立血清药物浓度点对AUC0-t的多元线性回归方程,JackKnife法验证模型准确性,采用S形最大效应(Emax)模型考察咪唑立宾有效性与AUC0-t的相关性。结果单点预测采用给药后第3、4、6、8小时的血清药物浓度估算口服MZR的AUC0-t的相关性均较好,回归方程分别为:AUC0-t=5.78 C3(R2=0.95,P<0.05)、AUC0-t=7.23 C4(R2=0.96,P<0.05)、AUC0-t=8.77 C6+3.12(R2=0.95,P<0.05)、AUC0-t=14.40 C8+4.02(R2=0.91,P<0.05),两点预测采用给药后第3和第4小时的血清药物浓度,回归方程为:AUC0-t=2.57 C3+4.18 C4(R2=0.98,P<0.05)。S型Emax模型显示AUC0-t的增加能够提高患儿肾病综合征的复发改善率,Emax=94.20%,EC50=5.70μg/mL,R2=0.89,且AUC0-t的增加降低了患儿尿蛋白水平。结论有限采样法估算肾病患儿口服咪唑立宾AUC0-t结果准确,方法简便。口服咪唑立宾的有效性与AUC0-t存在良好的相关性。 薛源 赵宇蕾 齐谢敏 朱婷婷 黄晓晖 芮建中 周国华关键词:咪唑立宾 有限采样法 药时曲线下面积 单细胞蛋白定量检测方法研究进展 被引量:2 2015年 蛋白质的存在及表达水平差异可以阐明生物体的生理或病理变化机制,因此蛋白质的定量检测对疾病发生机制研究、疾病诊断和预后评价等具有重要意义。传统的组织水平上的蛋白定量检测反映的是细胞中蛋白质表达量的平均水平,它往往忽略了单个细胞之间存在的差异,而单细胞蛋白定量检测手段则更能真实地反映这种差异。近年来发展了一系列单细胞蛋白定量检测的方法,如微流控技术、微孔技术、光导纤维纳米生物传感器技术、基于活性的荧光探针技术和质谱法等,本文就这些方法的原理、优缺点等进行简要介绍。 沈燚昀 齐谢敏 宋沁馨 周国华关键词:荧光探针 质谱法 实时荧光聚合酶链式反应偶联高特异性核酸侵入反应检测单核苷酸多态性 被引量:5 2015年 建立了实时荧光聚合酶链式反应(PCR)偶联高特性核酸侵入反应检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。优化了体系中flap核酸内切酶1(FEN1酶)和野生型检测探针等用量,确定了最佳反应条件,即FEN1酶用量为1.5 U,野生型检测探针用量为0.125μmol/L,0.5μmol/L Invader突变型检测探针,各0.25μmol/L通用野生型(VIC)和突变型(FAM)荧光共振转移发卡探针,显著降低了野生型样本和突变型样本背景信号,避免了背景信号对检测结果分型的干扰。采用本方法对编码乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因ALDH2*2位点21例样本、细胞色素P450 2C19基因CYP2C19*2和CYP2C19*3位点各19例样本进行分型检测,结果表明,ALDH2*2位点GG纯合10例,GA杂合8例,AA纯合3例;CYP2C19*2位点GG纯合9例,GA杂合8例,AA纯合2例;CYP2C19*3位点GG纯合18例,GA杂合1例。使用焦磷酸测序进行验证,两种方法检测结果一致。本方法特异性好、操作简便、耗时短、成本低,可实现对SNP单管闭管无污染的分型检测。 郑梦琳 齐谢敏 童欢 刘云龙 邹秉杰 宋沁馨 周国华关键词:单核苷酸多态性 细胞色素P450 基于核酸等温扩增的病原微生物微流控检测技术 被引量:11 2019年 病原微生物的快速检测对疫情的预防控制至关重要。基于PCR的病原微生物核酸检测方法克服了传统病原微生物培养方法耗时长、免疫学检测存在窗口期等问题,已成为目前最主要的病原微生物筛查方法。然而,对精确控温热循环仪的依赖却严重限制了其在资源匮乏地区的应用。虽然基于核酸等温扩增的病原微生物检测方法可摆脱对高精度温控设备的依赖,但仍需要进行样本核酸分离提取、扩增与检测等步骤。近年来,微流控技术与核酸等温扩增技术相结合,诞生了多种病原微生物等温扩增微流控检测技术。该技术通过设计芯片结构、优化进样模式及检测方式,实现了病原微生物核酸提取、扩增与检测一体化,并具备多重检测、定量检测等功能,具有对仪器依赖度小、对操作人员要求不高、样本量需求小和自动化程度高等优点,适合于在多种环境下的病原微生物快速检测。本文从核酸等温扩增原理、进样方式、检测方式等方面对核酸等温扩增病原微生物微流控检测技术进行了综述,以期为病原微生物的快速筛查提供更多的方案思路,提升公共卫生领域对传染性疾病的防控能力。 何祥鹏 邹秉杰 齐谢敏 陈杉 陆妍 黄青 周国华关键词:病原微生物检测 微流控芯片 棉花黄萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:5 2015年 利用棉花黄萎病菌ITS区特异性引物建立了棉花黄萎病菌的实时荧光定量PCR检测方法。利用实时荧光PCR体系,以324 bp的PCR扩增产物构建了标准曲线并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估。结果表明:该方法特异性良好,检测灵敏度为100 copies·μL-1,标准曲线的相关系数为0.994,扩增效率为91.5%。利用建立的检测方法对转基因棉田及常规棉田土壤样本进行检测,结果表明转基因棉田中棉花黄萎病菌数量显著高于常规棉田,与实际观测到的现象一致,也证明了本方法的可行性。因此,本研究建立的棉花黄萎病菌检测方法具有灵敏度高、重复性好等特点,为棉花的种植及病害防治提供了有效的检测手段。 沈元劼 齐谢敏 刘标 周国华 李泰明关键词:棉花黄萎病菌 实时荧光定量PCR 转基因棉 一种基于常规生化仪的低成本治疗药物监测新技术 被引量:1 2014年 目的:国内尚无市售自主研发的治疗药物监测( therapeutic drug monitoring, TDM)酶放大免疫检测原理( enzyme multiplied immunoassay technique, EMIT)试剂盒。比较基于EMIT的自主研发试剂盒与Viva-E试剂盒和基于FPIA的AXSYM检测试剂盒用于TDM相关性能,评价其用于TDM的可行性。方法通过进行卡马西平、丙戊酸和苯巴比妥方法学比较,评价Viva-E、AXSYM分析仪配套检测试剂盒和自主研发试剂盒的灵敏度、准确度及精密度。并对83例卡马西平、80例丙戊酸和72例苯巴比妥临床样本进行检测,比较自主研发试剂盒和AXSYM分析仪配套检测试剂盒测定结果相关性。结果3种试剂盒分别测定卡马西平、丙戊酸和苯巴比妥的回收率均高于90%。其中自主研发试剂盒3种药物的回收率在98.7%~103.9%,定量下限依次为2、10、5μg/mL,精密度均<10%,标曲单点校正后结果偏差<3%。其血清样本检测结果与AXSYM试剂盒检测结果相关性较好(R2>0.985),差异无统计学意义(P>0.05)。 Bland-Altman分析的95% LOA依次为(-1.32,1.26)、(-15.24,15.17)和(-3.69,3.00),仅有5%的点落于95%置信区间外。结论自主研发试剂盒性能与现进口试剂盒基本一致,方法学结果符合生物样本检测要求,可用于临床生物样本检测。 齐谢敏 虞留明 李冬 朱婷婷 储小曼关键词:卡马西平 丙戊酸 苯巴比妥 液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中氯马斯汀及其药动学 2011年 目的建立人血浆中氯马斯汀的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)快速测定方法,并研究氯马斯汀注射液在健康中国人体内的单、多剂量药动学特征。方法血浆样品用氢氧化钠碱化并加甲醇沉淀蛋白后,以正己烷提取,采用LC-MS/MS法测定。以0.2%甲酸(含5 mmol·L^(-1)醋酸铵)-甲醇(30:70,V/V)为流动相。采用ESI源在MRM模式下用于定量分析的反应离子对分别为m/z344.2→215.1(氯马斯汀)和m/z275.1→230.1(内标氯苯那敏)。12名健康志愿者单次及多次肌内注射氯马斯汀2mg,评价其药动学特征。结果氯马斯汀在0.02~24μg·L^(-1)内线性良好。氯马斯汀单次给药及多次给药d3后主要药动学参数:ρ_(max)分别为(2.4±1.4),(5.5±0.7)μg·L^(-1);AUC_(0-96)分别为(65±16),(257±33)μg·h·L^(-1);t_(1/2)分别为(40±7),(47±19)h。结论本试验建立的测定方法快速灵敏。氯马斯汀注射液的人体药动学特征无性别差异,多次给药后在人体内存在蓄积现象。 齐谢敏 杨靖 云昌宏 于勇 丁黎 文爱东 杨林关键词:氯马斯汀 串联质谱法 匹伐他汀钙片及富马酸氯马斯汀注射液人体药代动力学研究 齐谢敏关键词:匹伐他汀 药代动力学 健康人群口服复方二甲双胍格列吡嗪片尿药排泄研究 被引量:3 2012年 目的:建立二甲双胍和格列吡嗪尿药浓度的测定方法,研究健康人群口服二甲双胍格列吡嗪片后二甲双胍和格列吡嗪的尿药排泄特征。方法:二甲双胍尿液样品用流动相稀释,经涡旋高速离心后,采用LichrospherODS色谱柱分离,流动相为乙腈-3mmol.L-1十二烷基硫酸钠(25:75),用紫外检测器检测,波长为232nm。格列吡嗪尿液样品经盐酸酸化后用乙酸乙酯提取,采用LichrospherODS色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%的乙酸水溶液(55:45),质谱采用电喷雾离子源和选择性离子检测方式。10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片2片后,测定给药前及给药后0~2、2~4、4~6、6~8、8~10、10~12、12~16、16~24h各时间段的二甲双胍及格列吡嗪尿药浓度。结果:高、中、低浓度的批间与批内精密度(RSD)相对标准差均小于10%。10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片后,24h内尿液中二甲双胍及格列吡嗪的累积排泄量分别为(102.5±27.3)mg和(452.2±191.4)μg,平均累积排泄率分别为(26.27±7.00)%和(9.04±3.83)%。结论:建立的人尿样中格列吡嗪的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定方法和二甲双胍的高效液相色谱(HPLC)测定方法准确、灵敏,适用于尿药排泄检测。 佟若菲 齐谢敏 丁黎 宋沁馨关键词:二甲双胍 格列吡嗪 复方合剂 质谱分析法 肝炎后肝硬化患者使用质子泵抑制剂与自发性细菌性腹膜炎发生风险相关性的Meta分析 被引量:8 2018年 目的:系统评价肝炎后肝硬化患者使用质子泵抑制剂(PPI)与自发性细菌性腹膜炎(SBP)发生风险的相关性。方法:计算机检索2008年1月1日-2017年2月1日发布于Pub Med、Web of science、Science director数据库、中国期刊全文数据库、万方、中文科技期刊数据库中有关肝炎后肝硬化患者(或合并感染、腹水等)使用PPI与SBP发生风险(SBP发生率)的病例对照和队列研究,对符合纳入标准的研究进行资料提取、采用卡斯尔-渥太华质量评估量表(NOS)进行质量评价后,采用Rev Man 5.3软件进行统计分析。结果:共纳入18项研究,合计8 486例患者;Meta分析结果显示,肝炎后肝硬化患者使用PPI会显著增加SBP发生率[OR=1.77,95%CI(1.39,2.24),P<0.001];亚组分析结果显示,欧洲[OR=1.87,95%CI(1.32,2.66),P<0.001]、北美洲[OR=2.35,95%CI(1.64,3.36),P<0.001、亚洲[OR=1.75,95%CI(1.12,2.71),P=0.01]地区患者使用PPI后SBP发生率均显著升高;肝硬化腹水[OR=1.99,95%CI(1.33,2.98),P<0.001]、肝硬化[OR=1.56,95%CI(1.27,1.99),P<0.001]患者使用PPI后SBP发生率均显著升高,但中国患者使用PPI后SBP发生率未显著升高[OR=1.39,95%CI(0.61,3.19),P=0.44]。结论:肝炎肝硬化患者在使用PPI时会显著增加SBP的发生风险,在中国患者中未得到该结论,主要是由于纳入研究数过少,质量不高导致的,故应谨慎对待;该类患者应在合理评估病情后谨慎使用PPI。 周强 魏萌 宋周烨 黄晓晖 齐谢敏 周国华 邹秉杰 于锋关键词:质子泵抑制剂 肝炎后肝硬化 自发性细菌性腹膜炎 META分析