刘晓昌
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：第四军医大学学员旅更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 牵张力下mTOR/MMPs信号通路可促进间充质干细胞-成骨细胞系的迁移被引量：8
- 2015年
- 背景:目前对于牵张成骨促进间充质干细胞-成骨细胞系迁移的机制尚未明了,亟需基于这一机制的新的治疗方案,以提高牵张成骨临床疗效。目的:观察牵张应力下间充质干细胞-成骨细胞系mT OR信号通路相关基因的表达以及细胞迁移能力。方法:将12只SD大鼠随机分为2组:牵张组大鼠(n=6)进行右侧下颌骨牵张成骨,非牵张组大鼠(n=6)行同侧下颌骨截断后安置牵张器但不牵张,术后15 d进行免疫组织化学染色分析新生骨痂中p-mT OR表达变化。另外,对培养的健康SD大鼠下颌骨间充质干细胞进行体外牵张试验,施加(6%,4 h)的静息牵张力,对照组不施加牵张力,实时定量PCR、划痕实验等方法检测间充质干细胞-成骨细胞系mT OR信号通路相关基因的表达及细胞迁移能力的变化。结果与结论:牵张组大鼠新生骨痂中的p-mT OR表达高于非牵张组(P<0.05)。与非牵张组(0%,4 h)相比,牵张组(6%,4 h)间充质干细胞-成骨细胞系的mT OR、Raptor、p70S6K、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达升高,间充质干细胞-成骨细胞系迁移距离更远(P<0.05)。结果提示牵张应力可能通过激活间充质干细胞-成骨细胞系的mT OR/MMPs信号通路,促进其迁移。
- 杨子桧吴宝磊贾森杨新杰单春刘晓昌王磊雷德林
- 关键词：干细胞间充质干细胞骨生成牵张
- 慢病毒介导重组质粒转染兔下颌骨骨髓间充质干细胞被引量：1
- 2014年
- 背景:中枢或周围神经系统损伤是临床中常见的问题,且治疗效果尚不理想。神经生长因子在神经元细胞损伤修复和生长发育方面具有重要作用,但局部应用的神经生长因子存在易于失活、流失的缺点。目的:旨在通过慢病毒载体构建人神经生长因子β重组质粒,转染荧光兔下颌骨骨髓间充质干细胞并研究其生物学活性。方法:采用慢病毒作为载体,经HindⅢ+NotⅠ双酶切法构建含目的基因的pDC316-hNGFβ-mCMV-EGFP质粒。分离和培养兔下颌骨骨髓间充质干细胞,经重组质粒转染后,应用酶联免疫吸附法检测骨髓间充质干细胞分泌人神经生长因子β的情况。结果与结论:成功构建了pDC316-hNGFβ-mCMV-EGFP真核表达载体,经酶切鉴定和测序均证明质粒构建完整、正确。质粒转染后兔下颌骨骨髓间充质干细胞在荧光显微镜下可以发出绿色荧光,且荧光强度不随培养时间延长而衰退。转染后兔下颌骨骨髓间充质干细胞表达的人神经生长因子β可以在第7天仍维持在25μg/L水平,生物学活性显著提升。
- 刘晓昌赵英华杨子桧王磊
- 关键词：干细胞骨髓干细胞下颌骨骨髓间充质干细胞慢病毒基因转染
