李瑞敏
- 作品数：13 被引量：17H指数：2
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 深圳市2014年登革热流行病学和病原学特征研究
- 目的研究深圳市2014年登革热疫情的流行病学特征,分析流行毒株的分子进化特征,为今后登革热的防控提供科学指导。方法采用描述性流行病学方法分析2014年深圳市登革热疫情,分别采用胶体金免疫层析法和荧光PCR检测疑似登革热患...
- 阳帆王敬忠吴春利黄达娜李玥满云翔李瑞敏唐屹君张仁利
- 关键词：登革病毒E基因进化分析
- 文献传递
- 硒蛋白K基因干扰对T淋巴细胞内质网钙稳定蛋白的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨SelK mRNA干扰效果及其硒蛋白K(SelK)基因干扰后对细胞内质网钙稳态蛋白(endoplasmicreticulum calcium homeostasis protein,CHERP)的表达,观察T淋巴细胞内Ca^(2+)浓度的变化。方法从SelK m RNA(NM_019979.2)的编码序列中符合设计要求的靶位点设计特异性干扰SelK mRNA的RNAi片段,构建shRNA干扰载体靶向干扰SelK RNA,用核酸序列分析方法分析重组片段的正确性,利用荧光定量PCR和Westeron blot鉴定SelK mRNA的干扰效果,采用Real time-PCR的方法检测SelK干扰后细胞内的CHERP的变化。结果阳性重组载体可以被BamH I酶切。酶切片段序列分析重组子质粒结果与所设计片段完全一致,正确率为100.0%。三个ShRNA表现了不同的干扰效果,sh222、sh102和sh101的干扰效率分别为12.13%、16.46%和42.37%,在核酸水平上重组质粒sh101对SelK的干扰效果最佳,与sh222和sh102相比,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot检测重组质粒sh101在蛋白水平上的干扰效率为45.4%,干扰组细胞中CHERP的表达与对照组相比抑制率达到40.0%。结论重组质粒sh101对SelK在核酸和蛋白质水平上都有较好的干扰效率,SelK干扰对细胞中CHERP的表达有抑制的作用,或因此打乱了内质网与胞质中的钙离子平衡,从而影响到了细胞内游离的钙离子浓度,是导致T淋巴细胞激活的因素之一。
- 杨永平李瑞敏黄亚兰刘渠金玉娟张仁利黄达娜
- 莱茵衣藻SelK表达载体及其构建方法和表达方法
- 本发明提供了一种莱茵衣藻SelK表达载体的构建方法，包括：扩增人SelK的ORF基因片段，得ORF基因扩增产物；扩增莱茵衣藻SelW1的SECIS基因片段，得SECIS基因扩增产物；将ORF基因扩增产物和SECIS基因扩...
- 张仁利李瑞敏
- 文献传递
- 硒代蛋氨酸对小鼠巨噬细胞增殖及硒蛋白K的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探究硒代蛋氨酸(Selenomethionine,Se-Met)对小鼠巨噬细胞的增殖及巨噬细胞中硒蛋白K(Selenopro-tein K,Sel K)的影响,并观察Sel K在小鼠巨噬细胞中的定位。方法加硒代蛋氨酸(Se-Met)培养巨噬细胞,用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖活力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术检测Se-Met对小鼠巨噬细胞中Sel K m RNA和Sel K蛋白表达的影响;用细胞免疫荧光法观察Sel K在巨噬细胞中的位置。结果 Se-Met能促进巨噬细胞的增殖,其中浓度为1μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞24 h和48h后,能显著性地促进巨噬细胞的增殖(P<0.01);1μmol/L Se-Met能使巨噬细胞中Sel K的m RNA含量显著增加(24 h处理组,P<0.05;48 h处理组,P<0.01),另外,Sel K蛋白的含量也有所增加(48 h处理组,P<0.05)。浓度为100μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞48 h后,能极显著性地抑制巨噬细胞增殖(P<0.01)。结果还显示Sel K蛋白与内质网标志物KDEL都存在于巨噬细胞内的相同位置上。结论 Se-Met在促进巨噬细胞增殖的同时,使存在于内质网上的Sel K增加。
- 满云翔李瑞敏傅玉才张仁利
- 关键词：巨噬细胞增殖内质网
- 深圳市2014年登革热流行病学和病原学特征研究被引量：9
- 2016年
- 目的研究深圳市2014年登革热疫情的流行病学特征，分析流行毒株的分子进化特征，为今后登革热的防控提供科学指导。方法采用描述性流行病学方法分析2014年深圳市登革热疫情，分别采用胶体金免疫层析法和荧光PCR检测疑似登革热患者血清中的特异性IgM、IgG抗体和病毒核酸，并用C6/36细胞对急性期血清进行病毒分离，采用荧光PCR方法对其进行型别鉴定。同时扩增病毒E基因后进行序列测定，并与不同国家和地区的登革热毒株进行同源性比较和进化树分析。结果2014年深圳市累计报告登革热病例454例，以本地病例为主（占76.21%），输入病例以东南亚国家及周边城市为主（占23.79%）。发病高峰为9—11月（占97.14%）。发病人群以20～50岁青壮年人群为主，占病例总数的76.73%，男女比为1.43∶1。对332份病毒核酸阳性标本进行分型检测，共检出270例，型别以1型登革病毒（DENV-1）为主（占87.41%），其次为DENV-2（占8.89%）。进化分析发现深圳地区流行的DENV-1分布在两个分支上，其一为基因Ⅰ亚型，与深圳市2010年首次本地暴发疫情流行株同源性较高；其二为基因Ⅴ亚型，为深圳市首次报道。DENV-2核苷酸序列的差异相对较小，均为基因Ⅳ亚型。结论2014年深圳市报告登革热病例达到历年高峰，其流行具有输入病例与本地传播并存特点，主要是DENV-1流行，同时今年新出现DENV-2型病例明显增多，推测主要流行株由东南亚国家及周边城市输入，是否具有地方性登革热流行趋势还需进一步研究。
- 阳帆王敬忠吴春利黄达娜李玥满云翔李瑞敏唐屹君张仁利
- 关键词：登革病毒E基因进化分析
- SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒及方法
- 本发明提供了一种SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，包括特异性引物和荧光探针；其中，特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的下游引物R；所...
- 张仁利李瑞敏
- 文献传递
- 干扰硒蛋白K对小鼠T淋巴细胞钙流和白介素2受体表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨硒蛋白K(Selenoprotein K,Sel K)基因沉默(RNA silence,RNAi)对小鼠T淋巴细胞内钙流和白介素2受体(Interleukin-2 Receptor,IL-2R)分泌的影响。方法制作小鼠T淋巴细胞干扰载体p GPU-Sel K,用脂质体Lipofectin 2000将干扰质粒和对照质粒转染小鼠T淋巴细胞,Real time PCR和Western Blot分别检测核酸和蛋白水平Sel K的表达,流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度,Real time PCR检测IL-2R的分泌。结果与转染的对照组质粒p GPU-NC比较,转染p GPU-Sel K载体的细胞Sel K在m RNA和蛋白水平表达分别显著降低了42.37%(P<0.01)和45.44%(P<0.01)。另外干扰组整体细胞内钙离子浓度显著低于对照组(P<0.05),细胞分泌IL-2R水平也显著降低(P<0.05)。结论干扰载体p GPU–Sel K可以下调小鼠T淋巴细胞Sel K的表达,抑制细胞的钙流和IL-2R的分泌,从而可能改变小鼠T淋巴细胞增殖分化。
- 杨永平李瑞敏李晓霞金玉娟王超张仁利
- 关键词：T淋巴细胞白介素2受体
- SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒及方法
- 本发明提供了一种SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，包括特异性引物和荧光探针；其中，特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的下游引物R；所...
- 张仁利李瑞敏
- 文献传递
- 深圳市2014年登革热流行病学和病原学特征研究
- 目的：研究深圳市2014年登革热疫情的流行病学特征,分析流行毒株的分子进化特征,为今后登革热的防控提供科学指导.
方法：采用描述性流行病学方法分析2014年深圳市登革热疫情,分别采用胶体金免疫层析法和荧光PCR...
- 阳帆王敬忠吴春利黄达娜李玥满云翔李瑞敏唐屹君张仁利
- 关键词：登革热流行病学特征基因型
- 硒蛋白K对T淋巴细胞免疫应答影响的研究
- 硒是一种人类和动物必需的微量元素,与许多疾病密切相关,如癌症、神经退行性疾病及心血管病等,并在一些重大疾病的防治中起到重要作用。硒在生物体内主要以遗传密码子UGA编码的第21种氨基酸--硒代半胱氨酸(Sec)的形式存在于...
- 李瑞敏
- 关键词：T淋巴细胞免疫应答
- 文献传递
