范涛
- 作品数:20 被引量:67H指数:4
- 供职机构:武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 小干扰RNA沉默干扰素调节因子-8对缺氧复氧后肺泡上皮细胞凋亡的影响
- 2020年
- 目的观察小干扰RNA(siRNA)靶向沉默干扰素调节因子-8(IRF-8)对缺氧复氧后肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法将IRF-8 siRNA、Negative control(NC)siRNA通过脂质转染试剂转染至肺泡上皮细胞株[L2(购自中国上海拜利生物科技有限公司)],将细胞分为4组,si-IRF-8组,转染含有IRF-8 si-RNA的细胞组;质粒对照组,转染Negative control(NC)siRNA的细胞组;正常对照组,无转染质粒,完全正常培养;阴性对照组,无质粒转染,给与缺氧复氧干预。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测肺泡上皮细胞L2细胞株转染后凋亡相关分子标志物:活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3);聚合酶链反应(PCR)检测Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的转录水平变化。组间比较采用独立样本t检验。结果转染IRF-8 siRNA后,L2细胞内IRF-8相对表达水平明显下调,差异有统计学意义[si-RNA组(0.146±0.009)对比si-NC组(1.001±0.055),t=15.566,P<0.01]。经过缺氧复氧干预后L2细胞株si-IRF-8组Caspase-3、bax水平(1.877±0.250、1.989±0.145)较si-NC组(3.681±0.292、4.636±1.261)明显降低,差异有统计学意义(t=-4.686、-5.110,P<0.01),bcl-2水平在L2细胞的si-IRF-8组(0.837±0.858)较si-NC(0.179±0.533)组显著升高,差异有统计学意义(t=15.955,P<0.01);Western blot检测cleaved Caspase-3蛋白的表达水平(0.257±0.051)较质粒对照组(0.485±0.751)明显下调,差异有统计学意义(t=6.205,P<0.01)。结论IRF-8 si-RNA能特异性下调肺泡上皮细胞L2细胞株中IRF-8的表达,并显著降低缺氧复氧干预后细胞的凋亡水平,其机制可能与下调促凋亡相关蛋白bax、Caspase-3及上调抗凋亡相关蛋白bcl-2的转录过程相关。
- 郭小波范涛张霖江文洋汪巍方一凡李东航耿庆
- 关键词:缺氧复氧肺泡上皮细胞
- 以多浆膜腔积液为首发临床表现的腹腔纱布瘤一例被引量:2
- 2018年
- 患者女性,50岁。因“咳嗽2周,双侧胸腔积液及心包腔积液1周”于2012年6月12日入院。患者2周前无明显诱因出现咳嗽胸闷,无发热、畏寒、盗汗等症状,于当地医院就诊,胸部CT发现双侧胸腔及心包积液,行左侧胸腔闭式引流术,引流出液体约1000ml。
- 郭小波范涛汪巍方一凡耿庆
- 关键词:首发临床表现多浆膜腔积液胸腔闭式引流术双侧胸腔积液心包腔积液心包积液
- 基于GEO数据库与生物信息学方法分析食管鳞状细胞癌中的免疫微环境和潜在敏感药物被引量:1
- 2023年
- 目的构建基于免疫检查点相关基因的食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)预后模型,并探索这些基因与肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的潜在关联。方法收集基因表达综合数据库(GEO)GSE53625数据集中ESCC样本及其癌旁组织样本的免疫检查点基因转录组测序数据和临床资料。评估ESCC和正常癌旁组织中免疫检查点基因表达差异,对在食管癌中的高表达差异基因进行药物敏感性分析。对生存相关的基因构建风险模型并研究不同风险组不同亚型预后特征、通路富集、免疫检查点、免疫评分、免疫细胞浸润及其潜在敏感药物。结果共收集358个样本(来自179例患者的ESCC样本及其癌旁组织样本),其中男33例、女146例,≤60岁80例,>60岁99例。共39个免疫检查点基因在ESCC组织中差异表达,包括14个低表达基因和25个高表达基因。针对其中8个显著高表达基因(TNFRSF8、CTLA4、TNFRSF4、CD276、TNFSF4、IDO1、CD80、TNFRSF18)进行药物敏感性分析,发现多种化合物对这些免疫治疗靶点敏感。通过最小绝对收缩和选择算子回归分析构建基于3个预后相关基因(NRP1、ICOSLG、HHLA2)的风险模型,发现高风险组的总生存期显著短于低风险组(P<0.001),分析不同ESCC亚型也得出类似结果,并且基于免疫检查点基因的风险评分被确定为ESCC的独立预后指标。不同风险组具有独特的通路富集、免疫细胞浸润、TME和药物敏感性。结论本研究建立了一个基于免疫检查点基因的预后模型,能够准确对ESCC进行分层,并对不同风险的ESCC患者提供了潜在的敏感药物,为ESCC个性化治疗提供了一种可能。
- 潘世泽李宁宋从宽郝博卢子龙范涛李东航张霖孟恒赖凯耿庆
- 关键词:食管鳞状细胞癌药物敏感性肿瘤微环境
- 大鼠肺泡上皮细胞自噬对内质网应激的影响
- 2018年
- 目的观察大鼠肺泡上皮细胞CCL149自噬对内质网应激的影响。方法将绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒导入CCL149细胞,筛选出稳定表达GFP-LC3的细胞株。在分别加入自噬激活剂雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后,观察大鼠肺泡上皮细胞经缺氧复氧2、4、6 h时细胞自噬变化及相应的内质网应激反应。结果在缺氧复氧2、4、6 h这3个时间点,加入3-MA组自噬基因GFP-LC3表达量显著低于对照组(t=6.317,P=0.024;t=8.583,P=0.013;t=6.341,P=0.026),Beclin-1表达量显著低于对照组(t=4.658,P=0.039;t=7.120,P=0.022;t=10.320,P=0.000),p62表达量显著低于对照组(t=5.906,P=0.015;t=7.032,P=0.019;t=7.072,P=0.032),而内质网应激基因免疫球蛋白结合蛋白(BIP)表达量显著高于对照组(t=5.988,P=0.012;t=9.473,P=0.004;t=12.863,P=0.000),X-盒结合蛋白(XBP-1)表达量显著高于对照组(t=4.285,P=0.043;t=9.563,P=0.008;t=10.531,P=0.000),C/EBP同源蛋白(CHOP)表达量显著高于对照组(t=5.477,P=0.031;t=8.373,P=0.016;t=8.954,P=0.025);加入雷帕霉素组自噬基因GFP-LC3表达量显著高于对照组(t=4.502,P=0.046;t=10.000,P=0.010;t=4.983,P=0.041),Beclin-1表达量显著高于对照组(t=5.161,P=0.029;t=5.767,P=0.029;t=9.342,P=0.012),p62表达量显著高于对照组(t=6.687,P=0.026;t=7.084,P=0.016;t=9.767,P=0.000),而内质网应激基因BIP表达量显著低于对照组(t=7.245,P=0.016;t=8.432,P=0.005;t=12.562,P=0.000),XBP-1表达量显著低于对照组(t=6.255,P=0.022;t=8.450,P=0.029;t=8.365,P=0.035),CHOP表达量显著低于对照组(t=7.048,P=0.014;t=11.566,P=0.000;t=10.144,P=0.000)。结论在大鼠肺泡上皮�
- 范涛耿庆张博友徐瑶汪巍胡浩潘世泽
- 关键词:缺血缺氧自噬内质网应激
- 快速康复外科在食管癌外科治疗中的应用价值被引量:4
- 2014年
- 目的:探讨快速康复外科(FTS)在食管癌根治术中的应用价值。方法将术前经病理证实为食管癌患者93例,随机分为实验组(FTS组)60例和对照组33例。实验组患者在围手术期运用快速康复外科各种措施对患者进行治疗;对照组采用传统的治疗手段。比较两组患者术后恢复情况及并发症发生率。结果实验组患者在术后胸管留置时间、术后开始出现通气、排便时间及术后开始进流质食物时间、住院时间等方面均明显少于对照组(P<0.05);术后腹胀、肠麻痹、切口感染、肺部感染、吻合口瘘、心律失常及深静脉血栓等并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论快速康复外科应用于食管癌根治术有利于术后患者的快速康复,减少患者并发症的发生率,缩短住院时间。
- 周洪伟范涛胡浩耿庆
- 关键词:快速康复外科食管癌外科治疗
- IRF8基因降表达对大鼠肺泡巨噬细胞缺氧复氧损伤的影响
- 2021年
- 目的:观察干扰素调节因子8(IRF8)基因降表达对肺泡巨噬细胞NR8383缺氧复氧(HR)损伤的影响,探讨IRF8基因在该细胞缺氧复氧过程中的作用。方法:取对数生长期的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383随机分为正常对照组、阴性对照组、干扰空质粒组、IRF8低表达组。正常对照组常氧条件下培养,其余各组行缺氧6 h,复氧24 h处理。CCK8、LDH法检测细胞增殖率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子的表达。结果:IRF8干扰质粒转染成功,可明显降低HR处理前IRF8蛋白的表达。IRF8低表达组HR处理后细胞增殖率及细胞活性都显著降低(P<0.05),且与阴性对照组相比,HR处理后IRF8低表达组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达显著降低,IL-10升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IRF8基因降表达在体外可参与大鼠肺泡巨噬细胞NR8383缺氧复氧损伤过程,抑制肺泡巨噬细胞细胞增殖率和细胞活性,并且抑制该细胞促炎细胞因子的表达,促进抗炎细胞因子的表达。
- 冯浩洁范涛张霖卢子龙沈小康耿庆
- 关键词:肺缺血再灌注损伤肺泡巨噬细胞缺氧复氧
- 胸腔镜人体工学研究现状被引量:2
- 2019年
- 胸腔镜手术是一种微创外科手术,与传统开胸手术相比,胸腔镜手术可以给患者带来更小的创伤、更小的肺功能影响、更低的围手术期病死率及更轻的术后疼痛。人体工学是研究工作者与工作环境相互作用的科学。在让患者获益的同时,胸腔镜手术会给医师带来许多人体工学方面的问题。在进行手术时,手术设备的不正确摆放、不正确的手术姿势和不合理的器械设计都会对医师的身体造成额外的负担,引起职业病。笔者通过检索文献和专利,在此就胸腔镜手术中遇到的问题及解决方法予以综述,并对器械的革新进行展望,希望能减少微创手术给胸外科医师带来的身体损害,并为将来的研究提供思路和方向。
- 张霖耿庆范涛郭小波李东航
- 关键词:胸腔镜手术人体工学
- IRF8基因降表达、PINK1基因过表达对肺泡巨噬细胞NR8383增殖与活性的影响被引量:1
- 2020年
- 目的观察干扰素调节因子8(IRF8)基因降表达、PTEN诱导激酶1(PINK1)基因过表达对肺泡巨噬细胞NR8383增殖与活性的影响,探讨IRF8与PINK1基因在该细胞增殖与活性中的作用。方法取对数生长期的小鼠肺泡巨噬细胞NR8383,随机分为7组。IRF8对照组、PINK1对照组分别转染IRF8干扰空质粒、PINK1过表达空质粒,联合对照组共转染用量减半的上述两种质粒;IRF8干扰组、PINK1过表达组分别转染IRF8干扰质粒pG2.2-IRF8-Rat-444、PINK1过表达质粒pCMV3-Rat-PINK1,联合干扰组共转染用量减半的上述两种质粒;正常对照组不做任何处理。转染48 h后收集细胞,采用CCK8法检测细胞增殖的OD值,LDH法检测细胞活性,采用Western blotting法检测细胞中的IRF8、PINK1蛋白。结果与联合对照组、PINK1对照组、IRF8对照组、正常对照组比较,IRF干扰组与PINK1过表达组均IRF8蛋白表达降低而PINK1蛋白表达升高,细胞增殖及细胞活性均降低(P均<0.05);与IRF干扰组、PINK1过表达组比较,联合干扰组IRF8蛋白表达降低而PINK1蛋白表达升高(P均<0.05),细胞增殖及细胞活性均降低,但仅细胞活性差异有统计学意义(P均<0.05)。结论IRF8基因降表达、PINK1基因过表达均可明显抑制肺泡巨噬细胞NR8383增殖及细胞活性,且具有协同作用。
- 李东航范涛张霖江文洋汪巍耿庆
- 关键词:PINK1基因细胞活性肺泡巨噬细胞
- COVID-19患者临床特征及免疫功能分析被引量:29
- 2020年
- 目的:探究新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者临床特征、免疫功能表现及其在病情分级中的作用。方法:收集本院确诊的101例COVID-19患者临床资料、细胞及体液免疫功能检测,按照《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》分组,将轻型和普通型归类为非重症组,重型和危重型归类为重症组,分析不同病情组差异。结果:重症组患者平均年龄更大,伴有基础疾病患者比例更高。重症组患者中细胞免疫检测CD3、CD4、CD8、CD19、CD16+CD56细胞计数明显小于非重症组(P<0.05),体液免疫检测IgG、IgM、IgA、IgE、补体C3、补体C4无明显差异。对细胞免疫细胞数行ROC曲线分析,CD3、CD4、CD8、CD19、CD16+CD56的曲线下面积(AUC)依次为0.9873、0.9693、0.9658、0.8174、0.6587(P<0.05),各CD细胞计数(个/μL)CUT-OFF值依次为:575.5、390.0、214.5、111.0、127.5。结论:高龄且伴有基础疾病的COVID-19患者更易发展为重症,重症患者各免疫细胞耗竭更明显,细胞免疫功能有助于判断肺炎患者病情。
- 卢子龙何如愿江文洋范涛耿庆
- 关键词:新型冠状病毒免疫
- 自噬及其在肺部疾病中作用研究进展被引量:4
- 2017年
- 自噬作为一种新的细胞程序化死亡方式,在维持细胞内环境稳态中起着重要作用。它由溶酶体介导,对细胞内衰老细胞器或受损蛋白质进行再次利用,以补充细胞在"饥饿"状态下的物质供给。自噬曾被认为是细胞对氧化应激的随机自我保护性反应,然而最近研究发现自噬体的形成具有选择性和高度保守性的特点。目前研究发现自噬在COPD、肺气肿、肺纤维化、肺动脉高压、急性肺损伤、肺肿瘤等肺部疾病中起重要作用。本文通过分析总结自噬信号传导机制及其在肺部疾病中的相关作用,以阐明肺部疾病的可能发生机制,从而指导相关疾病的临床治疗。
- 范涛耿庆汪巍陈蕾张博友徐瑶胡浩
- 关键词:自噬肺部疾病信号通路