汤剑明
- 作品数：33 被引量：134H指数：6
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人子宫旁韧带成纤维细胞机械力作用下线粒体形态与细胞衰老的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨人子宫旁韧带成纤维细胞在机械力作用下线粒体形态及细胞衰老水平的改变。方法选取10例武汉大学人民医院收治的因宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)II-III级行阴式全子宫切除术患者的宫旁韧带(主韧带、骶韧带),进行原代培养,使用四点弯曲细胞力学加载系统对细胞进行力学加载,加力时间设定为4 h,加力大小为0、1 333μstrain(1 mm)、5 333μstrain(4 mm),把不加力的细胞设为对照组。采用新型透射电子显微镜HT 7 700观察5 000倍视野下线粒体形态变化,采用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老。结果随着机械力大小的增加,细胞的线粒体形态发生改变,线粒体出现空泡化,细胞骨架结构改变,细胞内出现凋亡小体,染色呈蓝色的细胞数量增多,细胞衰老率增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定范围内的机械力可导致人子宫旁韧带成纤维细胞的线粒体发生损伤性改变,并促进细胞衰老。
- 胡鸣洪莉洪莎莎闵洁赵杨杨青张琦钒汤剑明李洋
- 关键词：成纤维细胞线粒体细胞衰老盆腔脏器脱垂
- TSPV四步教学在妇科腹腔镜手术技能培训中的应用实践被引量：3
- 2023年
- 目的探讨TSPV[即theoretical teaching(理论教学)、simulated surgical skills training(模拟操作训练)、practical surgery training(临床实践训练)、video-based review(手术录像点评)的英文首字母缩写]四步教学在妇科腹腔镜手术技能培训中的应用及教学效果。方法30名参加妇科腹腔镜手术培训的学员被分为两组,每组15人。试验组采取TSPV四步教学,对照组接受传统带教,分期完成培训及考核。对比分析两组学员一般资料、培训考核成绩、教学反馈及满意度调查情况。采用SPSS 20.0进行t检验和卡方检验。结果两组学员在年龄、性别分布、学历、临床工作年限等一般资料上差异无统计学意义。两组理论考核成绩差异无统计学意义[(85.3±4.6)vs.(83.4±4.3),P=0.252]。试验组模拟操作考核[(91.7±5.2)vs.(72.4±5.9),P<0.001]、临床实践考核成绩[(88.5±4.8)vs.(82.7±6.7),P=0.011]优于对照组。试验组对教学满意度总体评价更好。结论TSPV四步教学是一种更优化且受欢迎的妇科腹腔镜培训模式,建议在教学中进一步推广验证。
- 刘成王莹洪莉汤剑明洪莎莎李秉枢
- 关键词：妇科腹腔镜手术技能教学方法
- 信号转导和转录活化因子3和碱性螺旋-环-螺旋转录因子1在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达被引量：3
- 2017年
- 目的探讨信号转导和转录活化因子3(STAT3)和碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达,并分析其表达失调与卵巢癌发生和发展的关系。方法收集2015年3月~2016年12月于武汉大学人民医院行手术的49例卵巢恶性上皮肿瘤患者和14例卵巢良性肿瘤患者的组织,应用免疫组化SP法检测STAT3和Twist1蛋白的表达情况,比较其在早期卵巢癌和晚期卵巢癌中的表达差异,并作Pearson相关性分析。结果STAT3和Twist1在卵巢癌中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤,差异有统计学意义(P<0.05);二者在晚期卵巢癌患者中的阳性表达率明显高于早期卵巢癌,差异有统计学意义(P<0.05);Twist1与STAT3在早期和晚期卵巢癌中的阳性表达均呈正相关(r=0.653、0.798,均P<0.05)。结论 STAT3和Twist1在卵巢癌的发生、发展和恶化中发挥着重要作用,其阳性表达率与卵巢癌FIGO分期相关,其机制可能是通过上皮-间质转化实现的。
- 洪莉杨将邢辉卢丹华汤剑明李秉枢郭凤琴
- 湖北省京山县乡镇卫生院妇女健康保健工作现况调查被引量：1
- 2015年
- 目的:了解湖北省京山县乡镇卫生院妇产科的预防保健工作和计划生育工作开展的现况,为提高其预防保健工作和计划生育工作能力提出建议。方法:采取随机抽样方法在湖北京山县14所乡镇卫生院中随机抽取7所进行回顾性研究,并进行描述性统计分析。结果:预防保健工作现况调查显示京山县乡镇卫生院妇科疾病检出率与全国妇科疾病检出率相比明显较低,孕妇保健手册建立率低,高危孕妇转诊率高;计划生育工作现况调查显示7所乡镇卫生院生育手术数量较多。结论:应结合乡镇卫生院与当地居民卫生健康需求,提升京山县乡镇卫生院妇女健康保健工作的效能,提高重大妇科疾病的检出率,加强孕产妇保健工作,进一步提高京山县乡镇卫生院的服务能力。
- 赵杨洪莉李秉枢吴德斌洪莎莎胡鸣杨青汤剑明李洋张琦钒
- 关键词：乡镇卫生院妇女健康预防保健计划生育
- 女性压力性尿失禁病因学研究进展被引量：19
- 2022年
- 压力性尿失禁(SUI)是一种女性常见的盆底功能障碍性疾病,发病率逐年上升,严重影响患者的生命质量及身心健康,其病理机制尚未完全明确。衰老、绝经、妊娠、阴道分娩、肥胖、糖尿病、慢性便秘等被认为是SUI的高危因素。正常情况下,盆底神经、肌肉和结缔组织相互协调,以维持正常的控尿功能。多种致病因素可引起盆底神经、肌肉和结缔组织发生细胞外基质代谢失衡、氧化应激及缺氧损伤等病理变化,导致控尿神经损伤或盆底支持组织薄弱。但SUI是一种病因复杂、病理改变多样的疾病,常与其他类型盆底功能障碍性疾病同时存在,相互影响,研究SUI病因学及病理机制需综合考虑。总结SUI病因学研究进展,可为SUI防治研究提供依据。
- 汤剑明田小丽洪莉
- 关键词：压力性尿失禁盆腔器官脱垂病因学解剖学
- 安石榴甙在机械力诱导成纤维细胞凋亡中的作用及其机制研究
- 2017年
- 目的:探索安石榴甙(PUN)在机械力诱导成纤维细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法:不同浓度(0、2.5、5、10、25、50、100μmol/L)的PUN处理L929细胞不同时间(12、24、48小时)后,采用CCK8法检测细胞增殖活性;采用Western blot检测不同浓度PUN(0、2.5、5、10、25μmol/L)处理24小时后Nrf2蛋白表达;将L929细胞根据是否行PUN(10μmol/L,24小时)预处理和是否采用四点弯曲力学加载系统进行机械力干预(5333μstrain,1 Hz,4小时)分为4组:空白对照组、加力组、PUN组及PUN加力组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase3的表达;采用H2DCF-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧簇(ROS)水平的变化。结果:PUN在浓度10μmol/L、作用时间24小时对细胞增殖活性及Nrf2蛋白表达的促进作用最显著;与对照组相比,加力组细胞凋亡率明显增加、ROS水平显著上升、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率明显增加(P<0.05);与加力组相比,PUN加力组细胞凋亡率显著减少、ROS水平明显降低、Bcl2表达显著增加、Bax表达和Active-caspase3/caspase3比率降低(P<0.05)。结论:PUN可明显减少机械力诱导的成纤维细胞凋亡,其机制可能是通过上调抗氧化蛋白Nrf2的表达,从而抑制机械力诱导ROS水平上升所导致的氧化损伤。
- 王琳琳李秉枢刘成李倩男汤剑明胡鸣洪莉
- 关键词：压力性尿失禁氧化应激凋亡
- 8-羟基脱氧鸟苷和4-羟基壬烯醛在盆底器官脱垂患者子宫骶韧带中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的探讨盆底器宫脱垂患者子宫骶韧带8一羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG）及4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal，4-HNE）的表达情况，并分析其与盆底器官脱垂（pelvicorganprolapsed，POP）的发病关系。方法选取2012年6月至2014年6月在武汉大学人民医院59例行子宫全切术患者资料，分为Non—POP组20例（对照组）、轻度POP组17例（POPI—Ⅱ）、重度POP组22例（POPⅢ～Ⅳ）3组，于术中切取患者部分子宫骶韧带组织，通过免疫组化的方法检测8-OHdG和4-HNE的表达情况，比较其在各组的差异并作相关性分析。结果8-OHdG和4-HNE在POP组中的表达高于对照组，其中重度POP组最高，各组比较差异有统计学意义（P〈0．05），并且两者在POP组表达呈正相关（P〈0．05）。结论氧化损伤随脱垂程度的加重而增加，子宫骶韧带组织细胞的氧化损伤可能是POP的发病机制之一。
- 李洋洪莉刘成洪莎莎杨青汤剑明张琦钒
- 关键词：8-OHDG盆底器官脱垂
- 利用慢病毒载体建立过表达Nfe2l2基因的L929细胞株实验研究
- 2018年
- 目的利用慢病毒载体建立过表达Nfe2l2基因的L929细胞株,为探讨Nfe2l2基因在结缔组织成纤维细胞细胞外基质(ECM)重构中的作用奠定实验基础。方法 2014年12月—2015年5月,通过双酶切将Nfe2l2目的基因连接到GV341载体(Ubi-MCS-3FLAG-SV40-puromycin),经扩增、转化、验证、测序、质粒抽提,将携带目的基因的工具GV341载体质粒及病毒包装辅助质粒Helper1.0、Helper2.0转染293T细胞,完成慢病毒包装及质量检测后获取慢病毒工具载体LV-Nfe2l2,病毒感染L929细胞72 h后筛选稳定表达的细胞株L929/LV-Nfe2l2,采用Realtime qPCR测定Nfe2l2的表达。结果经比对,构建的LV-Nfe2l2阳性克隆序列与目的基因Nfe2l2相符;L929细胞达到80%感染效率的最佳感染条件为:在ENi.S培养基中进行感染,设定感染复数(MOI)为8～10,感染时间为72 h。Real-time qPCR结果显示,经筛选的L929/LV-Nfe2l2细胞中Nfe2l2基因表达丰度为高(ΔCt值≤12)。结论本研究成功构建了一种过表达Nfe2l2基因的慢病毒载体;LV-Nfe2l2感染L929细胞后可实现目的基因的高表达,经筛选的L929/LV-Nfe2l2细胞株可用于后续实验研究。
- 刘成汤剑明李洋杨将李倩男刘耀丹洪莉
- 关键词：转染慢病毒属成纤维细胞细胞外基质
- 丹皮酚通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制人卵巢癌A2780细胞增殖的实验研究被引量：18
- 2017年
- 目的探讨丹皮酚对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制及诱导凋亡作用,揭示Wnt/β-catenin信号转导通路分子机制。方法对数生长期人卵巢癌A2780细胞分为对照组(0mmol/L丹皮酚)和0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组,采用CCK-8法检测丹皮酚作用24、48、72h时人卵巢癌A2780细胞增殖活性;丹皮酚作用48h后,应用流式细胞仪检测人卵巢癌A2780细胞周期,采用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、β-catenin和c-Myc蛋白表达水平;丹皮酚作用0、24、48h,采用划痕实验检测人卵巢癌A2780细胞迁移能力。结果丹皮酚作用24、48、72h,人卵巢癌A2780细胞增殖活性在对照组为(100.00±3.28)%、(100.00±2.34)%、(100.00±2.89)%,在0.4 mmol/L丹皮酚组为(93.26±4.21)%、(80.23±5.43)%、(72.04±4.89)%,在0.8mmol/L丹皮酚组为(81.25±3.13)%、(71.65±4.78)%、(62.32±4.39)%,在1.6mmol/L丹皮酚组为(60.85±2.35)%、(45.89±5.34)%、(35.74±3.19)%,除0.4mmol/L丹皮酚组作用24h外,0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组不同作用时间人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于对照组(P<0.05),0.8 mmol/L丹皮酚组作用24h,1.6mmol/L丹皮酚组作用24、48、72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于0.4 mmol/L丹皮酚组(P<0.05),1.6mmol/L丹皮酚组作用24、48、72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于0.8 mmol/L丹皮酚组(P<0.05),0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组作用72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性低于24h(P<0.05);丹皮酚作用48h,0.4、0.8、1.6mmol/L组G1期细胞比例(73.08%,68.46%、52.95%)低于对照组(78.30%),S期细胞比例(19.61%、26.11%、39.05%)高于对照组(17.48%)(P<0.05);丹皮酚作用48h,0.4、0.8、1.6mmol/L组Bax蛋白表达明显高于对照组,0.8、1.6mmol/L组Bcl-2、β-catenin和c-Myc蛋白表达明显低于对照组(P<0.05);划痕实验结果表明,细胞迁移能力随丹皮酚浓度增加和作用时间延长明显下降(P<0.05)。结论丹皮酚可抑制人卵巢癌A2780细胞
- 李倩男王琳琳汤剑明洪莉
- 关键词：卵巢癌A2780细胞丹皮酚细胞迁移
- 压力性尿失禁小鼠模型造模方法的对比被引量：5
- 2017年
- 目的比较小鼠压力性尿失禁的不同造模方法的效果。方法将140只C57BL/6雌性小鼠随机的分为4组：正常组、阴道扩张组（VD）、卵巢切除组（OV）、阴道扩张＋卵巢切除组（VD＋OV），正常组65只，其他各组25只。4组作相应处理后记录术后感染率及死亡率，分别测定膀胱容量（MBC）及漏尿点压力（LPPs），并用明胶酶谱检测盆底组织中基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的含量及活性，对比分析上述造模方法。结果正常组、VD组、OV组和VD＋OV组MBC分别为（0.101±0.014）、（0.081±0.015）、（0.095±0.010）、（0.071±0.013） ml，腹压漏尿点压（ALPP）分别为（46.420±6.399）、（30.990±5.021）、（44.330±6.465）、（28.920±5.232） cmH2O（1 cmH2O＝0.098 kPa），膀胱漏点压（BLPP）分别为（44.180±4.912）、（26.680±6.485）、（41.450±6.474）、（22.120±7.412） cmH2O，VD组的MBC、ALPP和BLPP较正常组显著降低（P值分别为0.000、0.000和0.000），VD＋OV组的MBC、ALPP和BLPP较正常组显著降低（P值分别为0.000、0.000和0.000）,但VD组和VD＋OV组比较差异无统计学意义（P值分别为0.051、0.245和0.062），OV与正常组比较差异无统计学意义（P值分别为0.093、0.238和0.064）；各组MMP-2/MMP-9表达灰度值分别为13.930±0.823/9.610±0.771、14.990±0.908/11.100±0.735、13.890±0.707/9.761±0.680、15.470±1.070/11.240±0.750，VD组较正常组显著升高（P值分别为0.003/0.000和0.001/0.000），VD＋OV组较正常组显著升高（P值分别为0.000/0.000和0.000/0.000），但VD组和VD＋OV组间MMP-2/MMP-9差异无统计学意义（P值分别为0.216/0.604），OV组与正常组比较差异也无统计学意义（P值分别为0.912/0.573）。结论阴道扩张法及阴道扩张结合卵巢切除法均能成功建立压力性尿失禁（SUI）小鼠模型，但阴道扩张法更有效。
- 李洋洪莉刘成汤剑明李秉枢
- 关键词：压力性尿失禁阴道扩张卵巢切除尿动力学检测
