郭兴荣
- 作品数：28 被引量：41H指数：4
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学社会学更多>>
- 昆虫固醇转运蛋白的结构与功能被引量：5
- 2011年
- 在昆虫中,胆固醇不仅是细胞膜的重要成分之一,也是昆虫蜕皮激素生物合成的前体。由于昆虫体内缺少两种合成胆固醇所必需的关键性酶,所以昆虫不能自主地从简单的前体化合物从头合成胆固醇,而必须通过吸收食物中的甾醇转化为胆固醇来满足生长、发育和繁殖的需要。胆固醇在组织和细胞内的运输主要由固醇转运蛋白(sterolcarrier proteins,SCPs)执行。因此,对固醇转运蛋白结构与功能的研究对于阐明昆虫中固醇运输具有重要的意义。本文对固醇转运蛋白的基因和蛋白结构、细胞内表达和定位、翻译后修饰、蛋白三维结构、底物特异性和可能的运输途径等方面的研究进展进行了综述,并对其作为害虫防治分子靶标的可能性进行了初步的讨论。研究发现,不同物种的SCP蛋白的基因编码形式和蛋白剪切形式不同;双翅目昆虫埃及伊蚊Aedes aegypti和黑腹果蝇Drosophilamelanogaster除了SCP-x基因可编码SCP-x和SCP-2蛋白外,还有另外的SCP-2和类SCP-2(SCP-2L)基因编码SCP-2和类SCP-2蛋白;而鳞翅目昆虫棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、斜纹夜蛾Spodoptera litura和家蚕Bombyxmori中SCP-x基因的表达和转录方式与脊椎动物的SCP-x基因类似,通过转录和翻译后剪切形成SCP-2蛋白。SCP-x和SCP-2蛋白定位于过氧化物酶体。SCP-2蛋白由5个α-螺旋和5个β-折叠组成,其中α5-螺旋可影响蛋白与底物的结合。SCP-2蛋白以不同的亲和力与固醇、胆固醇衍生物、脂肪酸、脂酰辅酶A和磷脂等化合物结合。超表达斜纹夜蛾SlSCP-x和SlSCP-2基因可增加细胞对胆固醇的吸收;而利用RNAi技术抑制幼虫体内SlSCP-x表达,可导致血淋巴中的胆固醇含量降低,并导致幼虫生长缓慢,蜕皮化蛹延迟。
- 张丽丽郭兴荣冯启理郑思春
- 关键词：昆虫胆固醇脂肪酸蜕皮激素
- ANGPTL8调控糖代谢作用机制研究被引量：4
- 2017年
- 探讨ANGPTL8在胰岛素作用下对人肝细胞糖代谢影响及可能的作用机制。利用尾静脉水动力转染证实在小鼠肝脏过表达ANGPTL8可提高进食期糖耐受;在Hep G2细胞中利用q PCR检测进食的主要调控因素胰岛素、葡萄糖等对ANGPTL8表达影响,发现单独的葡萄糖或胰岛素对ANGPTL8表达影响不明显,而葡萄糖和胰岛素组合可显著促进ANGPTL8表达;利用Western blotting分析在ANGPTL8敲除(ANGPTL8-/-)和ANGPTL8稳定过表达(ANGPTL8++)的Hep G2细胞中胰岛素介导PI3K/AKT信号通路蛋白及其蛋白磷酸化表达差异,结果显示ANGPTL8可上调胰岛素介导的AKT信号通路中AKT、GSK-3β、Fox O1蛋白磷酸化;PAS染色分析ANGPTL8可促进胰岛素介导的糖原合成。
- 马石楠李忠耀郭兴荣
- 关键词：PI3K/AKT信号通路糖原合成
- 酸性环境抑制CIK细胞对肝癌HepG2细胞的杀伤活性被引量：1
- 2016年
- 目的研究酸性环境对CIK(cytokine-induced killer,CIK)细胞杀伤肝癌HepG2细胞的影响。方法利用IFN-γ、IL-2及CD3抗体诱导外周血单个核细胞获得CIK细胞。在pH6.5及pH7.4条件下将CIK细胞和荧光素酶标记的HepG2细胞(HepG2-luc)按不同的效靶比混合培养,用小动物活体成像系统检测HepG2-luc荧光强度并计算杀伤活性,用MTT法检测并计算杀伤活性。在pH6.5及pH7.4条件下,在含CIK条件培养液0、50%和100%的情况下培养HepG2细胞,流式细胞仪检测凋亡坏死的细胞比例。结果 pH7.4时CIK细胞对HepG2细胞的杀伤率明显高于pH6.5时。CIK条件培养液作用下,pH7.4时HepG2细胞的凋亡坏死比例明显高于pH6.5。结论酸性环境明显抑制了CIK细胞对肝癌细胞HepG2的杀伤活性。
- 袁雅红郭兴荣于莉王小莉丁妍李东升
- 关键词：CIKHEPG2杀伤活性
- TALEN介导的CXCR4敲除肝癌细胞株的建立被引量：1
- 2016年
- 通过TALEN打靶建立CXCR4的细胞株,旨在研究CXCR4对肝癌的影响。选用肝癌细胞株Hep G2,采用转录激活样效应物核酸酶(TALEN)干扰细胞中CXCR4的表达。构建的CXCR4 TALEN质粒转入Hep G2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率为40%,并通过测序筛选出了CXCR4敲除的单克隆细胞,免疫荧光和Western blot进一步证实CXCR4基因表达显著下调。
- 张文美丁妍郭兴荣李东升赵万红王小莉
- 关键词：TALENCXCR4肝癌基因打靶
- 酵母双杂交技术筛选宫颈癌HeLa细胞cDNA文库中FAM92A1-289关联蛋白被引量：5
- 2016年
- 目的应用酵母双杂交技术从宫颈癌He La细胞c DNA文库中筛选FAM92A1-289关联蛋白。方法构建酵母双杂交p GBKT7-FAM92A1-289诱饵载体,转化至酵母AH109感受态细胞中。利用Clontech GAL4酵母双杂交系统筛选He La细胞c DNA文库中与FAM92A1-289相互作用的蛋白质,用营养缺陷型培养基和X-a-Gal双重筛选实验进行筛选,对筛选结果进行生物信息学分析,对克隆重复率较高的蛋白进行回转验证,将β-半乳糖苷酶活性阳性的克隆进行测序并分析。结果成功构建酵母双杂交p GBKT7-FAM92A1-289诱饵载体,可在酵母细胞中正常表达FAM92A1-289,且对酵母细胞无毒性,不存在自激活现象。筛选出在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp四缺培养基及含X-a-Gal的SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp四缺培养基上均能生长且β-半乳糖苷酶活性阳性的克隆9个。经生物信息学分析发现4种蛋白重复率较高,即增殖细胞核抗原(PCNA)、半乳糖凝集素1(Galectin-1)、内质网高尔基体中间室标记物53(ERGIC-53)、重组人BCL2相关永生基因1(BAG1),并均与FAM92A1-289存在相互作用。结论利用酵母双杂交技术在Hela细胞c DNA文库中成功筛选出与FAM92A1-289相互作用的蛋白,为进一步研究FAM92A1-289的功能提供了新线索。
- 沈君豪方娟郭兴荣桂卉涂汉军阮绪芝
- 关键词：酵母双杂交技术GALECTIN-1
- 浅谈运用健康心理学，创新预防医学教学
- 2016年
- 预防医学是一门理论和实践并重的应用性学科，学生既要掌握预防医学的基本理论知识，又要能学以致用将这些知识运用到实践中。因此，在教学过程中就要求教师理论和实践相结合，构建创新性教育模式，以培养复合型医学人才，满足我国公共卫生事业发展的需要。本文将探讨运用健康心理学创新预防医学教学方面的一些心得。
- 邓生琼郭兴荣
- 关键词：求新心理
- 新基因Betatrophin原核重组蛋白表达及纯化被引量：1
- 2017年
- 目的构建人Betatrophin基因(h-Betatrophin)原核表达载体,诱导Betatrophin重组蛋白表达及纯化,为制备Betatrophin蛋白多克隆抗体及其功能研究打下基础。方法体外克隆Betatrophin cDNA序列,酶切后连接到PET32a(+)原核表达载体上,构建重组载体h-Betatrophin-PET 32a,然后转入大肠杆菌BL 21(DE 3),用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE-考马斯亮蓝染色及Western blotting检测蛋白表达情况,然后用Ni-NTA His·BindResin纯化目的蛋白。结果成功构建Betatrophin基因原核表达载体,诱导表达Betatrophin重组蛋白表观分子量正确,经纯化后可以得到纯度较高的Betatrophin重组蛋白。结论重组载体h-Betatrophin-PET 32a转入大肠杆菌BL 21后通过诱导及纯化可获取到纯度很高的Betatrophin重组蛋白,为后期研究Betatrophin基因功能奠定基础。
- 周春芳马石楠陈云李东升于莉王小莉郭兴荣
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化
- TALEN介导的Betatrophin敲除HepG2细胞株的建立被引量：1
- 2015年
- 目的:构建新基因Betatrophin敲除HepG2细胞株,为研究该基因功能提供模型细胞。方法:构建的Betatrophin TALEN质粒转入HepG2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率高达50%以上,并通过测序筛选出Betatrophin双基因敲除的单克隆细胞,Western blot进一步证实Betatrophin基因表达完全沉默。结果:通过TALEN打靶获得了Betatrophin双基因敲除的HepG2细胞株。结论:Betatrophin双基因敲除HepG2细胞株的建立为后期进一步研究Betatrophin在肝细胞中调控糖代谢和改善胰岛素抵抗作用机制奠定基础。
- 郭兴荣陈云李东升
- 关键词：TALENHEPG2细胞株基因打靶
- 脐带间充质干细胞支持脐血单个核细胞冻存复苏后的体外生长被引量：2
- 2015年
- 目的:研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,h UC-MSC)对冻存复苏后脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)体外生长的支持作用,以提高冷冻损伤后的造血细胞在体外的生存率。方法:用组织块培养法分离获得h UC-MSC,流式细胞仪检测其表面分子并诱导分化进行鉴定。分两组培养冻存复苏后的脐血MNCs:一组以h UC-MSC为滋养层共培养,另一组单独培养。光镜下观察两组MNCs密度。培养第10天,流式细胞仪检测两组造血细胞的百分比,并计数MNCs总数和造血细胞数进行对比。结果:成功分离培养获得h UC-MSC,符合各项鉴定标准。共培养组MNCs总数、CD45、CD14及CD19阳性造血细胞数均明显多于单培养组。结论:h UC-MSC可有效支持冻存复苏后脐血MNCs的体外生长。
- 袁雅红王小莉郭兴荣丁妍李东升
- 关键词：人脐带间充质干细胞脐血单个核细胞造血细胞冻存
- 中西医结合治疗老年外伤性硬膜下积液的临床评价
- 2011年
- 目的:评价中西医结合方法治疗老年性硬膜下积液的临床效果。方法:将72例老年性硬膜下积液患者随机分成治疗组和对照组各36例,对照组仅做西医常规治疗,治疗组在常规治疗基础上服用涤痰化淤、补肾健脾中药治疗,疗程为3周,1个月后观察2组临床疗效。结果:治疗1个月后,治疗组有效率为88.9%,对照组为63.9%;治疗组的脑复张度为(76.2±1.5)%,对照组脑复张度为(42.7±2.4)%;2组治疗有效率及脑复张度比较有显著性差异。结论:涤痰化淤、补肾健脾中药结合西医治疗老年性硬膜下积液是一种行之有效的方法。
- 刘建民郭兴荣黄良文戴先才朱文瑞
- 关键词：外伤性硬膜下积液老年中西医结合
