姚宁
- 作品数：10 被引量：42H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂肪源间充质干细胞移植对D-半乳糖衰老模型大鼠肾、肺组织中衰老相关蛋白表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)静脉移植对D-半乳糖衰老模型大鼠的抗衰老效果。方法:18只SD大鼠随机平均分为3组,模型组与移植组大鼠连续8周腹腔注射D-半乳糖[100 mg/(kg·d)],对照组腹腔注射生理盐水。然后移植组尾静脉注射ADMSCs(4×106个),模型组和对照组尾静脉注射生理盐水。4周后,采用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,并测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用Western blot法检测大鼠肾与肺组织中衰老相关蛋白沉默信息调节因子1(Sitr1)、P16、P21及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠空间学习记忆能力降低(P<0.05);与模型组相比,移植组大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠血清中SOD活性降低,肾与肺组织中Sirt1、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),P21、P16蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,移植组大鼠血清中SOD活性增加(P<0.05),肾与肺组织中Sirt1、PCNA蛋白表达水平升高(P<0.05),P21、P16蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:ADMSCs静脉移植治疗抗衰老作用明显,其可能通过调节衰老相关蛋白表达发挥作用。
- 崔渊博马珊珊张春艳姚宁渠瑞娜范天黎关方霞
- 关键词：间充质干细胞移植衰老模型衰老相关基因
- 单细胞海藻提取物对人脐带间充质干细胞的抗衰老作用被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨单细胞海藻(MPPT)提取物对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的抗衰老作用。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养hUC-MSCs,显微镜下观察细胞形态,收集第3、10、15代细胞,qRT-PCR分析不同代细胞中p16、p21、p53、PCNA、Sirt2 mRNA的表达情况。CCK-8法检测不同质量浓度MPPT提取物对第15代hUCMSCs增殖的影响;流式细胞术检测MPPT提取物对hUC-MSCs细胞周期和凋亡的影响;β-半乳糖苷酶染色法检测MPPT提取物对hUC-MSCs衰老的影响;qRT-PCR检测MPPT提取物对hUC-MSCs中p16、p21、p53、PCNA、Sirt2 mRNA表达的影响。结果:第3代细胞呈梭形贴壁细胞,第15代细胞呈不规则状态,易脱壁。随着传代次数的增加,hUC-MSCs中PCNA、Sirt2 mRNA表达减少(F=76.944、25.649,P<0.001),而p16、p21和p53 mRNA表达增加(F=46.714、77.645、845.676,P<0.001);与第15代细胞相比,1 g/L的MPPT提取物可促进第15代hUC-MSCs增殖,促进细胞周期进入S期,抑制细胞凋亡(P均<0.05);MPPT提取物处理组衰老细胞率降低(F=773.557,P<0.001),细胞中PCNA、Sirt2 mRNA表达增加,p16、p21和p53 mRNA表达降低(P均<0.05)。结论:MPPT提取物可能通过调节hUC-MSCs中p16、p21、p53、PCNA和Sirt2等衰老相关基因的表达发挥抗衰老作用。
- 姚宁马珊珊崔渊博渠瑞娜王欣欣孟楠宋及时赵云高军关方霞
- 关键词：人脐带间充质干细胞衰老P16P21
- 氯化锂联合hUC-MSCs移植对阿尔茨海默病小鼠的治疗作用被引量：5
- 2016年
- 目的:研究氯化锂(LiCl)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病小鼠(APP^+转基因小鼠)的干预作用。方法:PCR鉴定为APP^+转基因小鼠40只随机分为4组:APP^+组、hUC-MSCs移植组、LiCl注射组、联合处理组(LiCl注射^+hUC-MSCs移植)。处理1个月后,Morris水迷宫检测小鼠的认知水平,酶标仪法和分光光度法检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,qRT-PCR和Western blot法检测小鼠海马组织中Wnt/β-catenin通路相关因子的表达。结果:与APP^+组比较,LiCl注射组APP^+小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,平台所在象限停留时间延长,MDA含量下降,小鼠海马组织中β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达量增加,GSK-3βmRNA和蛋白表达量降低(P均<0.05);hUC-MSCs移植可使APP^+小鼠血清中SOD活性升高(P均<0.05),其他指标的变化与LiCl注射组相同;LiCl注射联合hUC-MSCs移植对平台所在象限停留时间、MDA含量、c-Myc蛋白表达的影响具有协同效应(P<0.05)。结论:LiCl联合hUC-MSCs移植对APP^+转基因小鼠具有明显的治疗作用。
- 孟楠马珊珊王欣欣姚宁邢衢宋及时黄团结关方霞
- 关键词：氯化锂WNT/Β-CATENIN通路阿尔茨海默病小鼠
- 脐带沃顿胶干细胞移植对脊髓损伤大鼠炎症因子表达的影响被引量：3
- 2015年
- 背景:免疫炎症反应促使大量炎症因子的产生和释放是继发性脊髓损伤的其对主要原因。目的:探讨脐带沃顿胶干细胞移植对急性脊髓损伤大鼠的神经修复作用及其对炎症因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素10表达的影响。方法:81只健康成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和脐带沃顿胶干细胞移植组(n=27),后两组以脊髓半切方法建立急性脊髓损伤模型,造模后脐带沃顿胶干细胞移植组经尾静脉移植1×106个脐带沃顿胶干细胞。移植后不同时间通过BBB评分评价各组大鼠的运动功能;ELISA检测不同时间点各组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1的含量;qR T-PCR和Western分析不同时间点损伤脊髓组织中单核细胞趋化蛋白1及白细胞介素10的表达;免疫组织化学检测损伤组织中脐带沃顿胶干细胞的迁移和神经分化情况。结果与结论:与假手术组和模型组相比,脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠的神经功能明显恢复(P<0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1水平显著低于模型组(P<0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组脊髓组织单核细胞趋化蛋白1 mR NA和蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),白细胞介素10 mR NA和蛋白表达显著高于模型组(P<0.05)。移植组中脐带沃顿胶干细胞可迁移至损伤部位,并表达神经胶质纤维酸性蛋白。这些结果提示脐带沃顿胶干细胞可能通过调控脊髓损伤组织的炎症反应,促进神经修复,这也可能是脐带沃顿胶干细胞治疗脊髓损伤的机制之一。
- 马珊珊渠瑞娜田毅姚宁崔渊博韩康邢衢杨波关方霞
- 关键词：脐带干细胞移植干细胞单核细胞趋化蛋白1
- 人脐带间充质干细胞移植对老年痴呆小鼠脑、肝组织中衰老相关基因表达的影响被引量：13
- 2015年
- 目的:研究人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)静脉移植对APP+转基因鼠衰老的调控作用,并从衰老相关基因角度探讨MSCs延缓衰老的机制。方法:采用PCR技术对老年痴呆APP+转基因鼠进行分子鉴定;将传至第3代的h UC-MSCs细胞密度调整为1×106m L-1后进行尾静脉移植。移植h UC-MSCs 3周后,通过Morris水迷宫实验从行为学水平检测干细胞移植对APP+转基因鼠的延缓衰老作用(检测小鼠的学习记忆能力),然后采用荧光定量PCR和Western blot法检测h UC-MSCs移植后小鼠脑及肝脏组织中与衰老相关的基因及蛋白[沉默信息调节因子2(Sirt2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、p16、p21、p53]表达的变化。结果:该实验共鉴定出12只APP+转基因鼠。与对照组相比,移植组小鼠逃避潜伏期时间明显缩短、穿越平台次数增加、在平台所在象限停留的时间延长,差异具有统计学意义(P均<0.05)。移植组APP+转基因鼠的脑及肝脏组织中PCNA和Sirt2基因的mRNA和蛋白相对表达量升高,p21及p53基因相对表达量降低(P均<0.05),而p16基因表达变化不明显(P>0.05)。结论:APP+转基因鼠经h UC-MSCs静脉移植治疗,学习记忆能力显著提高,延缓衰老作用明显,涉及衰老标志基因p21、p53、PCNA、Sirt2等表达调控改变,这些衰老标志基因之间相互联系,可能构成细胞衰老的基因调控链。
- 崔渊博马珊珊姚宁渠瑞娜王欣欣邢衢孟楠杨波关方霞
- 关键词：干细胞移植衰老衰老相关基因
- 干细胞衰老的调控机制被引量：2
- 2015年
- 干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。干细胞在特定的微环境下可分化为骨、脂肪、神经、肝脏等组织细胞，同时分泌多种生长因子和活性物质，为维持机体稳态和损伤修复发挥重要作用。曾经，人们一度认为干细胞是永生的，随着年龄的增长或体外传代次数的增加，许多干细胞，如血液、大脑、骨骼肌、皮肤、间充质干细胞的自我更新能力下降，
- 马珊珊姚宁王欣欣邢衢韩康孟楠关方霞
- 关键词：干细胞衰老DNA损伤线粒体功能障碍端粒长度衰老相关基因表观遗传调控
- p16基因高表达对293细胞衰老的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影响,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老状态,RT-PCR和Western blot法检测p16、p21 mRNA和蛋白的表达。结果:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,并将细胞阻滞在G0/G1期(F=158.057,P<0.001);高表达组细胞p16和p21在mRNA和蛋白水平的表达明显增加(F=73.467、54.988、9.923、44.060,P均<0.05),β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显增加(F=137.266,P<0.001)。结论:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,将细胞阻滞在G0/G1期,提高细胞中p16和p21的表达,促进细胞衰老。
- 马珊珊刘静姚宁崔渊博邢衢王梦然郭天宇杨波关方霞
- 关键词：P16细胞衰老293细胞
- 新鲜冰冻血浆对脑损伤合并失血性休克大鼠的治疗作用
- 2015年
- 目的探讨新鲜冰冻血浆对脑损伤合并失血性休克大鼠的治疗作用。方法取25只健康雌性SD大鼠,采用Aghaloo法制备新鲜冰冻血浆。将108只健康成年SD大鼠随机分为3组:sham组18只仅开放颅骨骨窗;vehicle组与FFP组(各45只)采用Feeney改良法制作脑损伤模型与Wiggers改良法制作失血性休克模型,60 min后vehicle组给予3倍失血量的生理盐水复苏,FFP组给予同等失血量FFP进行复苏。伊文氏蓝(EB)染色测定血脑屏障通透性,干湿重法测量脑组织含水量,改良神经功能评分(m NSS)评价大鼠神经功能障碍改善情况,7 d时脑组织切片尼氏染色观察神经元细胞生存情况。结果 1、3、7 d时FFP组脑水肿程度比vehicle组轻(P<0.05);12、24、72 h时各组脑组织EB含量差异有统计学意义(P<0.05),12、24、72 h时FFP组比vehicle组EB含量低(P<0.05);3、7 d时FFP组m NSS神经功能评分比vehicle组低(P<0.05)。结论早期采用新鲜冰冻血浆对脑损伤合并失血性休克大鼠进行治疗可以减轻脑水肿,降低血脑屏障通透性,改善神经功能。
- 范超勇李东朋郭德伟田毅姚宁齐伟杨波
- 关键词：脑损伤失血性休克新鲜冰冻血浆
- sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用被引量：4
- 2016年
- 目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均<0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。
- 马珊珊崔渊博姚宁邢衢韩康宋及时张彦婷关方霞
- 关键词：腺病毒人脐带间充质干细胞衰老
- 人脐带沃顿胶干细胞对急性大鼠脊髓损伤的作用及脊髓组织中TNF-α和BDNF表达的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨人脐带沃顿胶干细胞(WJCs)移植对急性脊髓损伤大鼠的治疗作用及其可能机制。方法:81只大鼠分为假手术组、模型组和WJCs移植组,每组27只。每组取6只,采用BBB评分法评估脊髓损伤后1、3、7、14、21和28 d各组大鼠的运动功能,采用透射电镜检测损伤局部超微结构并检测损伤后28 d脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,其余大鼠采用实时荧光定量PCR和Western blot检测损伤后0、3、6、12、24、72、168 h损伤脊髓组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。结果:脊髓损伤后模型组与WJCs移植组大鼠的运动功能均有不同程度的恢复,其中WJCs移植组较模型组恢复更明显。与模型组相比,WJCs移植组损伤区脊髓组织结构相对完整。模型组和WJCs移植组损伤脊髓组织中TNF-αmRNA和蛋白以及BDNF蛋白的表达较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,WJCs移植组中TNF-α的表达降低,而BDNF的表达增加(P<0.05)。结论:WJCs移植可改变脊髓损伤区的微环境,抑制损伤脊髓组织中TNF-α的表达,同时增加BDNF的表达,促进大鼠神经功能恢复,减少脊髓继发性损伤。
- 渠瑞娜马珊珊田毅姚宁崔渊博张文进韩康宋及时杨波关方霞
- 关键词：脊髓损伤
