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吴亮亮: 作品数：18 被引量：84H指数：4; 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划军队“十一五”科技攻关课题国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>

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乳腺癌患者Treg细胞、Th/Tr比值,CEA、CA153及Her-2和VEGF的表达变化: 目的:研究乳腺癌患者Her-2、VEGF、Treg细胞、Th/Tr比值以及肿瘤标记物CEA、CA153比值的表达变化,探讨其对判断病人预后及指导治疗的意义.方法:应用流式细胞技术检测60例乳腺癌患者和30例健康者外周血T...; 王治宽石燕杨俊兰吴亮亮周振宏戴广海焦顺昌

真核表达质粒PIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ的构建及其在COS-7细胞中的表达: 2010年; 目的:通过oligo化学合成及PCR扩增法合成人显性抑制TGF-βⅡ型受体目的基因,并建立其真核表达载体。方法:根据Genebank数据库确定显性抑制TβRⅡ目的基因,利用化学合成法进行单链oligo的合成,PCR法将合成的oligo拼接成完整的序列,装入PMD18-T载体并转染感受态细胞DH5。经XhoI和Eco-RI酶切后连接至目的载体PIRES2-AcGFP中,转染COS-7细胞,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序鉴定,用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测DNTβRⅡ表达。结果:合成DNA经测序验证与目的基因一致;PIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ转染COS-7细胞,实现了DNTβRⅡ目的基因在COS-7细胞中的体外转染及瞬时表达。结论:采用oligo化学合成及PCR扩增法成功合成人显性抑制TGF-βⅡ型目的基因并构建了其真核表达载体PIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ,为进一步研究过继性免疫细胞治疗奠定了基础。; 杨波刘辉吴亮亮张丽娅焦顺昌; 关键词：转化生长因子真核表达

胃癌患者不同分期外周血CD3+、CD4+和CD8+的表达结果比较被引量：3: 2012年; 目的研究胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+的表达及比较分析。方法使用流式细胞仪检测27例晚期胃癌患者、28例早期胃癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD4+/CD8+)的表达情况,并与健康对照组相应T淋巴细胞亚群表达情况相比较。结果胃癌晚期组、胃癌早期组术前外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+和CD4+/CD8+的表达显著性下降,CD3+CD8+的表达增高,与健康对照组相比,具有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。胃癌早期组术后10 d CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD4+/CD8+的表达与健康对照组相比,无统计学差异(P>0.05)。结论早期胃癌患者术前、晚期胃癌患者外周血T淋巴细胞各亚群水平异常,提示胃癌患者存在免疫功能失衡;早期胃癌患者术后10 d T淋巴细胞各亚群水平接近正常,提示手术切除肿瘤后患者免疫功能有所恢复。肿瘤患者T淋巴细胞亚群水平变化可动态反应肿瘤的发展变化及抗瘤疗效。; 宋谦党海珍李露嘉焦顺昌吴亮亮; 关键词：胃癌 T淋巴细胞亚群 CD3+CD4+CD8+

NK、T混合淋巴细胞与顺铂联合对乳腺癌MDA-MB-231细胞株体外杀伤研究: 2009年; 目的:探讨利用荧光染料CFSE标记法及MTT法,观察人NK、T混合淋巴细胞(NKTm)体外杀伤MDA-MB-231肿瘤株的效果。方法:应用CFSE/PI染色法及MTT法标记人乳腺癌MDA-MB-231肿瘤株,观察NKT细胞联合顺铂在各种时序下对乳腺癌MDA-MB-231肿瘤株的杀伤效果。结果:CFSE染色条件下,人NKTm细胞体外对MDA-MB-231细胞效靶比E/T=25:1时较E/T=12.5:1时杀伤率明显升高;E/T=12.5:1时杀伤率略低于顺铂;先加入NKTm各组随与顺铂间隔时间的延长而杀伤率升高(以上P均<0.05)。结论:NKTm细胞对MDA-MB-231肿瘤细胞的直接杀伤作用强,同顺铂联用时要提高对肿瘤细胞的杀伤率应先给予NKTm细胞后应用顺铂。; 游俊浩杨俊兰焦顺昌林星石吴亮亮王刚; 关键词：杀伤细胞细胞 CFSE 顺铂

不同年龄、性别的健康成年人21项淋巴细胞亚群分析被引量：12: 2011年; 建立健康成年人外周血21项淋巴细胞亚群正常参考值,并分析不同年龄、性别健康成年人淋巴细胞亚群之间的差异。用三标荧光抗体对102例健康成年人外周血进行标记,流式细胞仪检测并分析结果,SPSS 10.0软件进行统计学处理。结果显示:21～89岁健康成年人外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+比值、NK、NKT、CD19+、CD29+、CD25+、CD4+CD29+、CD4+CD25+、HLA-DR+、CD3+HLA-DR+、CD3+HLA-DR-、45RO+、45RA+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD28+、CD8+CD28+和CD8+CD28-细胞百分比的正常参考范围分别为68.59±9.06、38.82±7.11、25.78±7.81、1.82±1.15、7.01±5.02、13.58±8.49、10.77±4.30、59.13±9.40、9.78±3.47、17.86±5.39、8.26±3.12、12.80±4.21、3.48±10.81、66.44±9.93、56.75±13.15、44.43±12.07、16.14±7.86、25.40±6.70、54.45±9.14、14.77±5.07和15.68±7.21;NK、CD29+、45RO+、CD4+CD45RA+、CD28+、CD8+CD28-在不同性别间的差异具有统计学意义(P<0.05),而CD3+、CD3+CD8+、NK、CD29+、CD4+CD29+、CD4+CD25+、CD3+HLA-DR-、45RO+、45RA+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD28+和CD8+CD28+在不同年龄间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究初步建立了健康成年人外周血21项淋巴细胞亚群的正常参考值,能更全面地反映机体细胞免疫的状况,可为临床实践提供更有效的帮助。; 赵宏焦顺昌张国庆吴亮亮; 关键词：淋巴细胞亚群正常参考值流式细胞仪

胃癌患者手术前后T淋巴细胞亚群的变化及预后分析被引量：2: 2018年; 目的分析Ⅰ～Ⅲ期手术切除胃癌患者的临床特点,观察手术前后血液T淋巴细胞亚群的变化,探讨患者手术前后机体免疫反应对胃癌患者预后的影响,为建立胃癌术后的个体化治疗模式提供理论依据。方法对在解放军总医院2010年1月—2011年6月行手术治疗的Ⅰ～Ⅲ期胃癌患者41例进行研究,以流式细胞术检测胃癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群的变化,并与健康人群相对照,结合临床病理特征及术后无病生存期(disease free survival,DFS)进行分析,探讨各项指标手术前后的变化与术后DFS的关系。结果对胃癌术后患者进行临床病理特点与DFS相关的单因素分析,发现年龄、症状、TNM分期、手术切缘与DFS相关;分析外周血T细胞CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+的表达,发现胃癌术前组低于健康对照组、胃癌术后组(P<0.05,P<0.01);CD3+CD8+的表达,胃癌术前组高于健康对照组和胃癌术后组(P<0.05,P<0.01);CD8+CD28+的表达,胃癌术前组低于健康对照组(P<0.05);CD4+CD25+的表达,胃癌术前组和术后组均高于健康对照组(P<0.01)。CD3+、CD3-CD16+CD56+低表达较高表达患者、CD3+CD8+高表达较低表达患者疾病复发转移风险分别为0.273、2.595、5.394倍。结论胃癌患者临床及病理特征与DFS相关;外周血T细胞CD3+CD4+低表达DFS生存率降低,术后CD3+、CD3-CD16+56+低表达,CD3+CD8+高表达患者复发转移风险高。; 党海珍焦顺昌吴亮亮姜忠华; 关键词：胃癌术后 T淋巴细胞亚群预后

北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围的建立及比较被引量：4: 2019年; 目的建立及比较北京地区不同年龄段老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围。方法将参与2018年度解放军总医院健康体检的524例北京地区健康成人按10岁为1年龄段共分为4组,采用美国Beckman流式细胞仪结合血液分析仪分别检测他们的外周血CD4^+、CD3^+及CD8^+等T淋巴亚群及CD19^+及NK细胞,采用SPSS 17.0软件来分别比较各组间各项指标的统计学差异,并采用受检人群中年龄≥60岁的老年人的检测结果来获得适用于北京地区老年人的淋巴细胞亚群正常参考范围。结果淋巴细胞百分比随年龄的增长有所降低; CD3^+、CD3^+CD8^+及CD4^+45RO^+占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而增高;自然杀伤细胞(NK)占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而降低。北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围(以95%CI表示)如下:淋巴细胞:759～2 783 cell/μl(12.9～47.3);CD3^+:929～1610 cell/μl(53.08～91.92); CD3^+CD8^+:202～775 cell/μl(11.53～44.25); CD3^+CD4^+:250～1248 cell/μl(14.30～71.30); CD4^+45RA^+:33～662 cell/μl(1.9～37.80); CD4^+45RO^+:199～807 cell/μl(11.34～46.07); CD19:7～403 cell/μl(0.40～22.99); NK:32～501 cell/μl(1.80～28.61)。结论年龄因素可影响人外周血淋巴细胞亚群CD3^+、CD3^+CD8^+、CD4^+45RO^+及NK占淋巴细胞百分比,有必要建立适当的、适用于北京地区老年人的上述常见淋巴细胞亚群正常参考范围。; 李恺李青霖吴亮亮王小丹; 关键词：老年人淋巴细胞亚群正常参考范围流式细胞仪

晚期肺腺癌患者外周血T细胞淋巴亚群的检测及危险因素评估被引量：4: 2012年; 目的探讨晚期肺腺癌患者CD4+CD25+Treg细胞和其他T细胞亚群的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术分析64例晚期肺腺癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞及其他T细胞亚群水平,并与33例健康对照者比较。结果晚期肺腺癌患者CD3+和CD3+CD4+比例分别为(66.5±11.0)%和(37.7±10.6)%,明显低于健康对照组的(72.0±6.0)%(t=-3.2,P=0.020)和(42.0±6.4)%(t=-2.4,P=0.015);CD4+CD25+的比例为(10.5±4.0)%,明显高于健康对照组的(8.4±3.5)%(t=-2.2,P=0.013);CD4+/CD8+为1.4±0.8,明显低于健康对照组的1.8±0.7(t=-2.2,P=0.029)。两组间CD3+CD8+、CD8+CD28-及CD8+CD28+的比例差异无统计学意义(P均>0.05)。肺癌患者T细胞亚群功能的损害与吸烟与否、肿瘤分化程度及肿瘤病灶大小无明显联系,与外周血癌胚抗原之间存在着一定的联系。结论晚期肺腺癌患者存在明显的细胞免疫功能障碍,Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,CD4+/CD8+明显降低,提示肺癌患者处于免疫抑制状态。吸烟与否、分化程度及肿瘤病灶大小与免疫功能紊乱的联系尚需进一步探讨。; 燕翔赵晓焦顺昌胡毅孙胜杰吴亮亮吴志勇; 关键词：晚期肺腺癌 CD4+CD25+调节性T细胞 T细胞亚群流式细胞术

Th/Tr比值评估结直肠癌患者抗肿瘤免疫状态的临床价值: 2010年; 目的检测结直肠癌患者外周血中T-heper和T-reg细胞的比值(Th/Tr),探讨其评估患者抗肿瘤免疫状态的意义。方法应用流式细胞技术检测60例结直肠癌患者和30例健康者外周血Th/Tr比值,分析结直肠癌患者与健康者外周血 Th/Tr是否存在差异,不同临床分期、不同病理分级结直肠癌患者外周血Th/Tr值是否存在差异。结果结直肠癌患者外周血Th/Tr值为5.28±2.43,低于健康对照组的11.24±1.84(P<0.01);早期患者外周血Th/Tr为6.64±2.39,高于进展期患者的4.71±2.16(P<0.01),Th/Tr比值与病理分级无关。结论结直肠癌患者外周血中Th/Tr降低,提示结直肠癌患者的免疫受损,其水平变化可作为评估结直肠癌患者预后的指标之一。; 杨波刘辉吴亮亮张丽娅施伟伟焦顺昌; 关键词：结直肠肿瘤免疫流式细胞术

大肠癌患者化疗前后淋巴细胞亚群变化被引量：17: 2013年; 目的分析62例大肠癌患者化疗前后21项淋巴细胞亚群变化情况。方法用三标荧光抗体对62例大肠癌患者接受FOLFOX4(奥沙利铂+5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙)、FOLFRI(伊立替康+5-氟尿嘧啶+亚叶酸钙)或XELOX(奥沙利铂+卡培他滨)方案化疗前后外周血21项淋巴细胞亚型进行标记,流式细胞仪检测,分析化疗前后淋巴细胞亚群的变化,并根据化疗方案及化疗周期数的不同进行亚组分析。结果大肠癌患者化疗后CD3+、CD3+CD8+、CD29+、CD4+CD29+、CD4+CD25+细胞在外周血淋巴细胞中的百分比较化疗前明显升高,CD19+、人白细胞(位点)DR抗原(HLA-DR)+细胞百分比明显降低(P<0.05)。亚组分析结果显示:FOLFOX4方案化疗组CD3+CD8+、CD4+CD25+细胞化疗后较化疗前明显升高,CD19+和HLA-DR+细胞明显降低(P<0.05);XELOX方案化疗组CD3+CD8+细胞明显升高,CD19+细胞明显降低(P<0.05),而接受FOLFRI方案化疗组所有细胞亚群化疗前后差异均无统计学意义(P>0.05);化疗≤4周期组患者CD3+、CD3+CD8+、记忆性T细胞(CD45RO+)、CD4+CD45RO+细胞化疗后较化疗前明显升高(P<0.05),化疗5～8周期组患者HLA-DR+细胞明显降低(P<0.05),化疗≥9周期组CD29+细胞明显升高(P<0.05)。结论化疗使大肠癌患者体液免疫功能下降;FOLFOX4化疗方案可能抑制机体细胞免疫功能;≤4周期的化疗可通过对机体免疫格局的调整增强机体细胞免疫功能,但随着化疗次数的增加,机体细胞免疫功能逐渐下降。; 张国庆赵宏温新宇李瑾昱吴亮亮焦顺昌; 关键词：大肠癌化疗淋巴细胞亚群

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