王向东
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 供职机构:山东大学更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 表达人血清白蛋白的靶向载体及其构建方法
- 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的靶向载体,包含有人血清白蛋白基因,以及进行同源重组的鸡源的两个同源序列:5’同源臂、3’同源臂,同时还包含有进行药物筛选的neo基因和报告基因EGFP。本发明的表达人血清白蛋白的靶向载体...
- 王向东高鹏魏光伟李相芝
- 文献传递
- 表达人血清白蛋白的慢病毒载体及其构建方法
- 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的慢病毒载体:包含有人血清白蛋白基因,以及进行人血清白蛋白表达调控的鸡源的鸡卵清蛋白的启动子区序列,如SEQIDNO.3所示,人血清白蛋白基因的5’端连接有kozak序列;同时,上游还包含...
- 王向东高鹏魏光伟李相芝
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- 表达人血清白蛋白的靶向载体及其构建方法
- 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的靶向载体,包含有人血清白蛋白基因,以及进行同源重组的鸡源的两个同源序列:5’同源臂、3’同源臂,同时还包含有进行药物筛选的neo基因和报告基因EGFP。本发明的表达人血清白蛋白的靶向载体...
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- 基因重组蛋清溶菌酶的分离纯化被引量:3
- 2019年
- 以毕赤氏基因重组酵母发酵液为研究对象,经过离心分离、超滤、膜分离、阳离子交换树脂吸附后,得到的纯化液,真空干燥得到酶活为20000U·mg^(-1)的蛋清溶菌酶粉末。研究结果表明:发酵液在5000r/min、25℃下离心15min,得到离心液溶菌酶活性为360.1U·mL^(-1),菌体细胞的去除率达99.99%;超滤最佳操作条件:压力为0.15MPa,pH为6.5;一级超滤得到的溶菌酶活性为455.4U·mL^(-1),收率为90.6%,纯化程度提高了23.7%;二级超滤得到的溶菌酶活性为648U·mL^(-1),收率为61.2%,纯化程度提高了42.3%; D152阳离子交换树脂对料液进行离子交换层析,得溶菌酶的酶活性为770.5U·mL^(-1),收率达90%,纯化程度提高了18.9%。
- 陈姗姗孙艺轩王向东林剑
- 关键词:超滤阳离子交换树脂
- 基因重组毕赤酵母产蛋清溶菌酶发酵工艺及表达条件的优化被引量:4
- 2018年
- 以甲醇诱导型蛋清溶菌酶基因重组毕赤酵母(Pichia pastoris)NCY-2为研究菌株,选用麦芽汁为培养基,首先通过单因素试验,对培养基锥形瓶种类、原麦芽汁稀释度及外加氮源进行了优化,在此基础上,采用均匀设计试验,得到菌株NCY-2的最佳发酵工艺条件为发酵温度31℃、pH 5.5,转速220 r/min,接种量4%;蛋清溶菌酶最佳表达条件为诱导温度18℃、诱导pH 4.4、转速190 r/min、甲醇初始添加量为0.3%(之后每隔24 h分别添加体积分数1.0%、1.5%、2.0%,诱导72 h结束)。在此优化条件下,摇床水平发酵液中蛋清溶菌酶酶活力可达到962.4 U/m L。
- 宋增健薛松王向东林剑
- 关键词:毕赤氏酵母发酵工艺
- 表达人血清白蛋白的慢病毒载体及其构建方法
- 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的慢病毒载体:包含有人血清白蛋白基因,以及进行人血清白蛋白表达调控的鸡源的鸡卵清蛋白的启动子区序列,如SEQIDNO.3所示,人血清白蛋白基因的5’端连接有kozak序列;同时,上游还包含...
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