周晓燕
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
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- 晚期糖基化终产物受体在脂多糖介导小鼠肺微血管内皮细胞骨架变化中的作用被引量：3
- 2015年
- 目的建立一种可以得到高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法,并分别观察野生型小鼠及晚期糖基化终产物受体（RAGE）敲除小鼠细胞在脂多糖（LPS）刺激下细胞骨架F-actin变化情况。方法取6~8周龄野生型C57小鼠及RAGE基因敲除小鼠的肺,经I型胶原酶消化后,尼龙细胞筛过滤,然后采用免疫磁珠法分离原代小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,经形态学及免疫荧光法鉴定后,以LPS（1 mg/L）刺激不同时间后用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin的变化情况。结果镜下可见原代培养的PMVECs呈梭形或多角形,经细胞抗Ⅷ因子相关抗原（ⅧF-Ag）染色鉴定纯度高,LPS刺激后野生型小鼠PMVEC骨架重排,形成应力纤维,而RAGE敲除小鼠PMVEC骨架破坏不明显。结论采用免疫磁珠法可以获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞,且RAGE参与了LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架破坏。
- 周晓燕张伟金黄巧冰郭晓华
- 关键词：脂多糖晚期糖基化终产物受体细胞骨架
- RAGE在脂多糖介导小鼠肺微血管内皮细胞骨架变化中的作用
- 目的：建立一种可以得到高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法,并分别观察野生型小鼠及晚期糖基化终产物受体(RAGE)敲除小鼠细胞在脂多糖(LPS)刺激下细胞骨架F-actin变化情况。方法：取6-8周龄野生型C57小鼠及RAG...
- 周晓燕郭晓华
- mDia1在晚期糖基化终产物介导内皮细胞通透性增高中的作用
- 目的：研究哺乳动物Diaphanous相关成蛋白家族—mDia1在晚期糖基化终产物(AGEs)导致的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)通透性增高中的作用,并探讨其机制。方法：利用mDia1的siRNA、相关突变质粒(突变了A...
- 周晓燕张伟金黄巧冰郭晓华
- 关键词：晚期糖基化终产物酪氨酸激酶
- mDial在晚期糖基化终产物介导的内皮细胞通透性增高中的作用
- 晚期糖基化终产物（advanced glycation end products,AGEs）是蛋白质赖氨酸的氨基和还原糖的醛基之间发生非酶性糖基化反应,形成Schifi碱,经Amadori反应并重排后形成相对稳定终产物的...
- 周晓燕
- 关键词：晚期糖基化终产物人脐静脉内皮细胞酪氨酸激酶
- 文献传递
- 高迁移率族蛋白B1对内皮细胞通透性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞通透性的影响,以及HMGB1受体(RAGE)和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1(200 ng/m L)与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24 h,以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应;用电阻法分别在0、3、6、12和24 h测量正常空白对照组(单纯培养基)和HMGB1组(200 ng/m L)的单层内皮细胞电阻值TER,比较两组间在相同时间点电阻值的差别;p38 MAPK抑制剂SB203580(25μmol/L)预先作用1 h,继以HMGB1(200 ng/m L)作用12h,比较不同组间细胞通透性的变化;以HMGB1(200 ng/m L)分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应;转染siRNA下调RAGE表达,或以原代培养野生型和RAGE(-/-)小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激,比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻(TER)测定法,蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高,12 h与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.05);且可使跨细胞电阻TER降低,在12 h与空白对照组相应时间点相比,差异有统计学意义(P<0.05);也可引发p38蛋白磷酸化水平的升高,与0 min相比,差异有统计学意义(P<0.05);SB203580预处理再以HMGB1刺激后细胞通透性明显降低,与HMGB1单纯刺激组相比,差异有统计学意义(P<0.05);RAGE siRNA转染后以HMGB1刺激细胞p38磷酸化水平显著下调,与HMGB1组相比,差异有统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激野生型小鼠PMVECs可诱导p38磷酸化,而RAGE(-/-)小鼠PMVECs则无此效应(P<0.05)。结论 HMGB1通过结合RAGE来激活p38诱导血管内皮细胞通透性的增高。
- 郭晓华吴洁翁洁张伟金周晓燕王伟菊黄巧冰姜勇徐静
- 关键词：高迁移率族蛋白B1晚期糖基化终产物受体内皮细胞通透性P38
