何庆
- 作品数:8 被引量:17H指数:4
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- 血清氯化物酶法测定
- 2003年
- 目的 建立血清氯化物的α 淀粉酶及其底物 2 氯 4 硝基苯 α D 麦芽三糖苷 (CNP G3)直接测定方法。方法 根据氯离子是α 淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法 ,并做方法学评价。结果 测定结果的平均偏差率为 0 4 6 % ;线性范围 5 0~1 5 0mmol/L ;平均回收率为 1 0 0 6 2 % ;批内CV <1 2 4 % ,日间CV <1 86 % ,总CV1 4 5 %~ 2 2 4 % ;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α 淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法 (MTC) ( x±s)比较 :MTC法 (X) :(95 6 6± 1 4 .4 5 )mmol/L ,酶法 (Y) :(95 6 2± 1 4 .93)mmol/L ,t=0 .0 78,P >0 5 ,Y =1 .0 1 6X - 1 .5 87,r=0 .984 ,n =93,P <0 .0 0 1 ;与离子选择电极法 (ISE) ( x±s)比较 :ISE法 (X) :(99.0 0±1 3.1 1 )mmol/L ,本法 (Y) (98.6 1± 1 2 .70 )mmol/L ,t=0 .1 4 0 ,P >0 .5 ,Y =0 .96 2X +3.375 ,r=0 .993,n =4 4 ,P <0 .0 0 1。溶解的工作试剂 (R1、R2 ) 2~ 8℃冷藏至少可以稳定 1 4天。结论 该方法测定成本低 ,准确、精密、线性范围宽 ,稳定性好 ,在抗卤族元素溴、碘及硫氰酸等阴离子的干扰方面 。
- 张孝山帅真李明润关俊玲何庆杨彬徐海津
- 关键词:酶法Α-淀粉酶
- 卤族元素等对酶法测定血清氯化物的干扰实验被引量:2
- 2002年
- 目的 :研究卤族元素溴、碘和氟离子以及硫氰酸和迭氮离子对α -淀粉酶及其底物2 -氯 -4-硝基苯 -α -D -麦芽三糖苷 (CNP -G3)测定氯离子的干扰情况。方法 :使用混合血清建立对照组和加入不同浓度可疑干扰物质的实验组进行比较。结果 :样品中加入可疑干扰物终浓度达10mmol/L的溴化钾、83.3mmol/L的碘化钾、50.0mmol/L的氟化钠或氟化钾、10mmol/L的硫氰酸钾和15.87mmol/L的迭氮钠对酶法测定氯化物无任何干扰 ;氟对硫氰酸汞比色法测定氯化物无干扰 ,其余均呈现正干扰。结论 :α -淀粉酶/CNP
- 张孝山何庆帅真杨彬
- 关键词:酶法血清卤族元素氯化物Α-淀粉酶
- 卤族元素等对硫氰酸汞法测定氯化物的干扰实验被引量:4
- 2002年
- 张孝山何庆帅真
- 关键词:卤族元素氯化物
- 硫氰酸汞法测定氯化物单点与两点定标的对比研究被引量:4
- 2002年
- 目的 :评价两点定标对硫氰酸汞比色法测定氯化物的重要性。方法 :应用ROCHE定值血清和系列氯化物标准液比较单点与两点定标测定结果的回归方程、线性范围与偏差率。结果 :所用试剂盒在使用100mmol/L或160mmol/L氯化物标准液单点定标测定时 ,测定定值血清的偏差率分别为19 77 %,2 95%和 -7 63 % (前者 ) ,线性范围仅分别为90~110mmol/L和150~170mmol/L ,回归方程Y100=0.533X +40.243 ,r=0.965 ;Y160=0.707X +52 644,r=0.967;使用70/140mmol/L和100/160mmol/L氯化物标准液两点定标测定时 ,测定定值血清的偏差率分别为1 30%,1 02 %和 -0 26 % (前者 ) ,线性范围分别为60~150mmol/L和90~180mmol/L ,回归方程Y70/140=0.905X +9 164 ,r=0.998 ;Y100/160=0.891X +15 206 ,r=0.997。结论 :硫氰酸汞比色法测定氯化物的反应过程为一正弧形曲线 ,为卤族元素氯的呈色特性决定 ,只能采用多点定标方式实现测定的准确性 ,70/140mmol/L两点定标的准确测定范围为60~150mmol/L ,完全可满足临床测试需要。
- 张孝山何庆帅真
- 关键词:氯化物
- 柱前衍生化反相高效液相色谱法测定N-甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物含量被引量:1
- 2002年
- 目的:用反相高效液相色谱法测定N-甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物含量。方法:以2,4-二硝基氟苯作柱前衍生化试剂,在碱性条件下制得2,4-二硝基苯基-N-甘氨酰-L-谷氨酰胺,上ODS色谱柱,置日本岛津SCL-10AVP高效液相色谱仪上进行分析。流动相为0.05mol·L^(-1)醋酸钠水溶液(用冰醋酸调pH6.4)-乙腈(80:20),检测波长为360nm,进样量20μL,流速1mL·min^(-1)。结果:N-甘氨酰-L-谷氨酰胺-水合物在16~80μg·mL^(-1)范围内线性良好,r=0.994 3,回归方程Y=1.2436×10^(-4)X,重现性RSD=0.31%(n=5)。结论:本法可用于测定N-甘氨酰-L-谷氨酸胺-水合物的含量。
- 张晓平杨国林何庆米沙
- 关键词:柱前衍生反相高效液相色谱原料药
- 2-氯-4-硝基苯-麦芽三糖苷作为α-淀粉酶底物的实验研究被引量:4
- 2002年
- 目的 :研究α -淀粉酶及其底物2 -氯 -4 -硝基苯 -麦芽三糖苷 (CNP -G3)酶促反应过程中的激动剂、抑制剂、最适 pH、米氏常数等。方法 :以测定酶促反应速度的方式分别进行研究。结果 :阳离子中仅钙离子和氨离子对α -淀粉酶有轻度的激活作用 ,阴离子中的氯离子对α -淀粉酶有强大的激活作用 ,约是迭氮钠的4倍 ,醋酸离子也有弱激活作用 ,硫酸、磷酸氢、碳酸离子无激活作用 ;乙二胺四乙酸是酶的强抑制剂 ;酶的最适pH为5.9~6.1 ;酶以CNP -G3为底物时的Km值约为0.22mmol/L ;麦芽糖对α -淀粉酶有显著的抑制作用 ;EGTA为钙离子螯合剂 ,可调节反应速率。结论 :α -淀粉/CNP -G3酶促反应系统研究可用于酶活性和激动剂测定。
- 张孝山帅真李明润关俊玲何庆杨彬徐海津
- 关键词:Α-淀粉酶激动剂KM值
- α-淀粉酶的2种测定方法比较被引量:6
- 2001年
- 对 2种测定α-淀粉酶的方法进行比较,结果表明 2-氯- 4-硝基苯酚-α-麦芽三糖苷 (CNP- G3)法与用亚乙基封闭的对硝基苯酚-α-麦芽七糖苷 (EPS或 PNP- G7)法相关性良好, CNP- G3法的优点为直接、一步测定α-淀粉酶活性,不需要辅助酶,试剂稳定, CNP- G3的用量少,价格低廉,是目前较为理想的测定α-淀粉酶的方法。
- 何庆张孝山张晓平
- 关键词:Α-淀粉酶
- 血清氯化物酶法测定研究
- 张孝山帅真李明润关俊玲何庆杨彬徐海津
- 首次应用α-淀粉酶/CNP-G3体系进行了血清氯化物测定。该方法尤其适用于自动生化分析仪测定,具有测定准确、简便、测定范围宽(50~150mmol/L)、精密度好、特异性强、稳定性好等特点,突出优点为试剂使用安全、无毒、...
- 关键词:
- 关键词:Α-淀粉酶氯化物