王志斌 作品数:41 被引量:66 H指数:5 供职机构: 温州医科大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 浙江省医药卫生科学研究基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 文化科学 经济管理 更多>>
丙型肝炎病毒CTL-Th表位嵌合DNA疫苗的构建 被引量:1 2015年 目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)CTL-Th表位嵌合DNA疫苗并探讨其体内免疫学效应。方法:基于我们前期从HCV中鉴定的4条HLA-A*0201限制性CTL(细胞毒性T细胞)表位(NS4b78-86、NS5a367-375、C181-189和NS2172-180),2条HLA-A*1101限制性CTL表位(NS3609-617和NS5b251-259),1条HLA-A*2402限制性CTL表位(NS5b382-390)和2条Th(辅助性T细胞)表位(P73-15和NS5A276-288),合成编码串联CTL表位和Th表位的基因并克隆入真核表达质粒pc DNATM3.1/myc-His(-)A;阳性重组质粒分别免疫HLA-A*0201、HLA-A*1101和HLA-A*2402转基因小鼠,采用ELISPOT实验和CTL杀伤实验检测小鼠脾细胞内单个CTL表位特异性T细胞的水平及其杀伤靶细胞的效应。结果:合成了含有Kozak序列和编码Igκ信号链序列、7条CTL表位、2条Th表位的基因序列并顺利克隆入了真核表达质粒。阳性重组质粒免疫三种转基因小鼠后,采用ELISPOT实验检测到小鼠脾细胞内存在单个CTL表位特异性分泌IFN-γ的CTL,后者可杀伤负载单个CTL表位的脾细胞。结论:成功构建了可诱导CTL反应的HCV的CTL-Th表位嵌合DNA疫苗。 李德周 段志良 郭江龙 王思娜 刘慧芳 王志斌 钟晓芝 陈永平 文金生关键词:丙型肝炎病毒 细胞毒性T细胞 表位 DNA疫苗 一种含氮杂环炎症抑制化合物的合成方法 本发明的技术方案和内容涉及一种下式(7)所示具有明显炎症抑制效果的含氮杂环化合物的合成方法,所述合成方法的路线如下:<Image file="DDA0001695906810000011.GIF" he="412" im... 陈婵 王志翊 王志斌 吴东方 梁飞宇 万新龙 梅劲 周乐斌文献传递 新常态下高校新闻媒体发展制约要素与转型策略 2015年 高校新闻媒体是信息交流和思想引领的重要平台,在创建优质校园文化、营造良好育人环境等方面具有重要功能。在大学生思想文化和社会传播媒介多元化的新常态下,高校新闻媒体与时代发展不适应的问题日益凸显,只有转型发展,改革现有新闻媒体管理体制,把受众需求当成新闻传播工作的出发点和归宿,通过加强整合资源,加快传统媒体与新媒体的深度融合,才能持续的为高校人才培养、科学研究、社会服务功能提供强大的精神动力和思想保障。 吴东方 王志斌关键词:新闻媒体 新媒体 一种快速去细胞单叶肝脏生物支架的制备方法 一种快速去细胞单叶肝脏生物支架的制备方法,不使用存在对组织移植后易形成血栓和去细胞组织在复细胞化过程中低再植率等问题离子型去垢剂SDS,采用弱碱性的Triton溶液灌注法制备去细胞左外叶肝脏生物支架,Triton溶液中N... 王志斌 梅劲 陈纳 孟卓 张建色 余雅玲 王志翊 黎婷文献传递 脊髓脱细胞支架对大鼠脊髓缺损修复的影响 被引量:1 2020年 目的用振荡法制备脊髓脱细胞支架修复同种异体大鼠脊髓缺损,观察术后大鼠行为学及组织再生情况。为脊髓缺损后修复提供新的研究思路。方法将30只SD大鼠脊髓分别用50 ml 3%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和2%脱氧胆酸钠溶液在摇床上做振荡处理,对比处理前后细胞残留情况及组织的空间结构,了解支架本身的组织构成。将90只SD大鼠随机分成空白对照组、单纯脊髓缺损组和支架移植组。切除单纯脊髓缺损组和支架移植组大鼠腰椎9~10节段,移植脱细胞支架至支架移植组大鼠。术后饲养12周,期间进行行为学评分观察,分别在4、8及12周时取大鼠损伤部位的脊髓进行HE染色及神经再生相关蛋白免疫荧光检测。结果通过HE、Masson、甲苯胺蓝染色显示,脱细胞处理后的脊髓脱细胞支架上神经细胞及轴突彻底清除,保留了脊髓细胞外基质。扫描电子显微镜观察发现,支架保留一定多孔网状支架结构。脱细胞支架在体实验中,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分显示,移植有脱细胞支架的大鼠后肢运动功能恢复优于单纯损伤组大鼠。组织学HE染色显示,脱细胞支架能够填补缺损的脊髓节段,加快损伤脊髓的修复过程。免疫荧光显示,支架移植组大鼠的损伤部位有一定轴突再生。结论脊髓脱细胞支架保留了细胞外基质并具有一定空间结构,能够一定程度加快脊髓缺损修复,对神经再生具有一定的促进作用。 朱君毅 张宜家 杜胜虎 余方正 卢颖枫 李培丰 王志斌 梅劲 王健关键词:脊髓再生 轴突再生 苏木素-伊红染色 一种喹唑啉类抗炎化合物及其合成方法 本发明涉及一种下式(7)所示喹唑啉类抗炎化合物:<Image file="DDA0001695918570000011.GIF" he="649" imgContent="drawing" imgFormat="GIF"... 王志斌 王志翊 吴东方 陈婵 张建色 周乐斌 许文 梅劲文献传递 在体制备大鼠全肾去细胞支架的程序性分析 被引量:5 2014年 目的通过在体灌注Triton X-100、SDS溶液法制备大鼠全肾去细胞生物支架,并对支架制备过程中的关键步骤进行程序性检测、分析,为制备科学合理的实验用大鼠全肾去细胞生物支架提供基础。方法 SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。肝素化后直接切取肾脏作为对照组(control组);肝素PBS灌注组(H组);肝素PBS、Triton X-100灌注组(HT组);肝素PBS、Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)溶液灌注组(HTS组)。HE、Masson、PAS染色及透射电镜观察各组肾组织病理及超微结构改变,免疫荧光结合4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)观察各组胶原蛋白Ⅳ(collagenⅣ)、层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)、弹性蛋白(elastin)及细胞核的表达情况,总DNA测定各组DNA残留浓度。结果 Triton X-100、SDS灌注6h左右制备大鼠肾脏去细胞生物支架。在灌注过程中,肾内细胞和细胞碎片逐渐被清洗,最终变成半透明状。HE、Masson、PAS染色及透射电镜显示连续分布、形态排列类似肾小球、肾小管轮廓结构的网状结构,基膜连续完整。免疫荧光结合DAPI染色结果表明,去细胞过程中细胞外基质中的重要蛋白collagen IV、LN、FN、HSPG2、elastin都较好的得到了保存,细胞核在灌注过程中逐渐减少,直至完全消失;最终残留组织的DNA为4.90μg/g。结论通过合适浓度和灌注比例的Triton X-100、SDS制备大鼠肾脏去细胞生物支架,并对其进行程序性分析,发现能有效清除大鼠肾内所有细胞成分,较完整的保留网络状肾及肾血管细胞外基质结构和成分,是一种简单易行且较为理想的制备实验用全肾生物支架的方法。 赵丽娜 余雅玲 林刻智 邵营宽 王志斌 陈加俊 梅劲 唐茂林关键词:去细胞 肾脏 细胞外基质 化学法 灌注法 一种苯磺酰氨类抗炎化合物的合成方法 本发明涉及一种具下式(7)所示苯磺酰氨类抗炎化合物的合成方法,所述合成方法的路线如下:<Image file="DDA0001695918820000011.GIF" he="440" imgContent="drawi... 陈婵 王志翊 王志斌 吴东方 尹强 梅劲 杜晓红文献传递 一种药物中间体喹唑啉衍生物的合成方法 本发明提供一种式(I)所示喹唑啉衍生物的合成方法,所述方法包括:在有机溶剂中和氧气氛围下,以铜化合物、有机配体和2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧化物的混合物作为复合催化体系,于氧化剂和碱存在下,式(II)化合物、式(I... 王志翊 陈婵 王志斌 翁杰 王贤亲 马建设 孙来芳血液灌流对灭多威中毒兔中枢神经系统保护作用研究 被引量:3 2014年 目的观察血液灌流(HP)对灭多威中毒兔脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量影响。方法 24只兔随机分成正常对照组(N组)、中毒组(P组)、血液灌流组(HP组),每组8只,建立HP治疗兔灭多威中毒模型,分别测定各组兔脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量变化,并观察脑组织病理学改变。结果 P组实验兔脑组织SOD活性较HP组、N组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),MDA含量较HP组、N组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);光学显微镜观察下,P组脑组织可见充血、水肿等病理学改变,HP组与N组脑组织充血水肿等病理改变不明显。结论早期血液灌流可减轻灭多威中毒所致脑组织氧化应激损伤,对中枢神经系统有一定保护作用。 刘宝华 汤鲁明 马建设 王贤亲 王志斌 王志翊关键词:血液灌流 灭多威 脑组织 丙二醛