罗克明
- 作品数：26 被引量：241H指数：11
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑被引量：12
- 2019年
- 为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。
- 邹修平范迪彭爱红何永睿许兰珍雷天刚姚利晓李强罗克明陈善春
- 关键词：柑橘
- 大戟科主要木本油料植物组培快繁中初代诱导研究进展被引量：1
- 2012年
- 从组培快繁工厂化育苗的角度,通过查阅相关文献资料,从外植体、基本培养基、外源激素以及培养条件等方面,对油桐、乌桕、麻疯树的组织培养快繁技术中的初代芽诱导进行了综述和分析,概括总结出适合工厂化生产的初代芽诱导的技术特点,并提出初代诱导中尚需解决的问题,为建立成熟、稳定、高效的组培快繁体系提供参考。
- 冯邦朝黄艳朱镜如罗克明
- 关键词：大戟科木本油料植物
- 油菜素内酯合成酶(Steroid 5α-Reductase)基因的超量表达对毛白杨生长的影响被引量：8
- 2008年
- 将棉花Steroid 5α-reductase基因(DET2)超量表达载体导入毛白杨中,观察其对毛白杨生长和芽休眠的影响。结果表明,超量表达DET2基因的毛白杨茎高度、直径生长和不定根的生长增强,芽的休眠破除提前。
- 邓伟吕立堂罗克明李义
- 油桐育苗技术研究进展被引量：4
- 2011年
- 油桐是我国重要的能源树种。为了加快我国油桐的良种化进程,推动油桐产业的进一步发展,从油桐的常规繁殖方法入手,介绍了我国油桐良种繁育的发展现状,分析了不同育苗技术的优缺点,对当前油桐种苗繁殖过程中存在的问题进行了探讨,并提出了相应的发展策略。
- 黄艳朱镜如冯邦朝孙一铭齐代华罗克明
- 关键词：油桐育苗实生苗扦插组培
- “红阳”猕猴桃茎段高效再生体系的建立被引量：11
- 2013年
- 以"红阳"猕猴桃茎段为外植体,MS为基本培养基,培养温度25±2℃,光照强度4 500lx,16h/d,继代周期20～30d,愈伤组织暗培养.在MS+1mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基中,外植体脱分化率达100%.在MS+2.0mg/L 2,4-D+0.4mg/L 6-BA培养基中,1～4代愈伤组织增殖倍数达3.38;在MS+5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA中,60d不定芽诱导率达83.33%.在MS+3mg/L 6-BA+1mg/L NAA中,不定芽1～6代平均繁殖系数达6.78;不定芽用0.01%IBA处理40min后在1/2MS培养基中生根率达100%;85株试管苗移栽到田间土营养钵中,15d成活81株,成活率达95.29%.
- 赵许朋周月杨立罗克明汤绍虎
- 关键词：茎段增殖植株再生
- 热诱导FLP重组酶删除转基因烟草外源基因被引量：11
- 2007年
- 利用热激启动子Hsp18．2、nP重组酶基因及其专一识别位点构建了重组酶删除系统的植物表达载体转化烟草。热激处理后转基因植株中FLP重组酶表达并识别两个同向lox P-frt重组酶识别位点，使两位点间的DNA插入片段（包含kn1、gus、nptⅡ基因）从转基因烟草基因组中删除，由kn1基因引起的转基因烟草特殊表型及gus基因产生的蓝色表型消失。
- 高媛媛赵德刚罗克明裴炎LiYi
- 关键词：基因删除
- 重庆油桐资源调查及优株筛选被引量：12
- 2013年
- 油桐是我国特有的经济树种,用油桐果实生产的桐油在诸多传统领域和新能源领域都有重要的应用价值。为了获得优良的油桐育种材料,提高油桐的种植效益,对我国油桐主要产区之一的重庆市的油桐种质资源进行了调查与收集,对从中初选出的17株优株的桐籽含油率、单株出油量等经济指标和桐油的品质指标进行了测定,最终甄选出了桐油产量较高和油脂品质优良的"渝桐1～6号"6株优株作为育种材料。
- 朱镜如黄艳罗克明
- 关键词：油桐育种材料桐油经济性状品质指标
- 应用CRISPR/Cas9技术在杨树中高效敲除多个靶基因被引量：26
- 2015年
- CRISPR/Cas9系统是一种广泛应用于细菌、酵母、动物和植物中的基因组定点编辑技术。本课题组在前期工作中利用该系统在毛白杨(Populus tomentosa Carr.)中率先实现了对内源基因—八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene dehydrogenase,PDS)基因的定点敲除。为研究靶点的设计和选择对该系统介导的杨树内源基因敲除效率的影响,本文分析了不同单向导RNA(Single-guide RNA,sg RNA)结合毛白杨PDS(Pt PDS)靶基因DNA序列后对突变效率的影响。结果发现sg RNA与靶基因间的碱基错配会导致突变的效率降低,甚至不能突变,其中3′端的碱基配对更为重要。进一步测序分析发现,该系统能同时敲除杨树基因组上两个同源的PDS编码基因(Pt PDS1和Pt PDS2),突变率分别达86.4%和50%。研究证明该系统可快速高效地敲除两个以上的内源基因,获得多重突变体杨树株系。利用该技术,本课题组已获得多个杨树转录因子及结构基因的敲除突变体株系,为将来开展基因功能研究和杨树遗传改良奠定了基础。
- 刘婷婷范迪冉玲玉姜渊忠刘瑞罗克明
- 关键词：杨树多基因八氢番茄红素脱氢酶
- 毛白杨二次遗传转化体系的建立被引量：4
- 2009年
- 为了建立有效的毛白杨二次遗传转化体系,优化了培养基激素配比、抗生素筛选浓度和乙酰丁香酮浓度。采用卡那霉素和潮霉素筛选,GUS组织染色和基因组DNA的PCR检测,通过二次遗传转化将GUS基因和潮霉素磷酸转移酶基因Hpt导入到毛白杨中,获得了60.7%二次转化频率。
- 邓伟吕立堂罗克明李义
- 关键词：毛白杨激素
- 转抗菌肽基因毛白杨的培育及其对溃疡病的抗性被引量：3
- 2011年
- 以毛白杨为转基因受体材料,利用根癌农杆菌介导法转化来源于益母草的阳离子抗菌肽基因LJAMP2。经卡那霉素筛选,共获得50株抗性植株。GUS组织染色和PCR检测显示有30株抗性植株呈阳性,初步证明外源目的基因已整合到毛白杨基因组中。RT-PCR证实抗菌肽基因LJAMP2在转基因植株中能大量表达。离体抗病性试验表明:转基因毛白杨细胞粗提液的抑菌能力明显强于非转基因植株。进一步将溃疡病菌接种在转基因和野生型毛白杨茎段上培养30天,转基因植株的病级指数均低于非转化植株。上述抗性试验结果表明:在毛白杨中超量表达益母草抗菌肽基因LJAMP2能显著提高其溃疡病抗病性。
- 贾之春孙一铭秦志超肖训焰齐代华罗克明
- 关键词：毛白杨溃疡病
