江山
- 作品数:7 被引量:14H指数:3
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- 磷酸铝佐剂吸附率对9V型肺炎球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗免疫原性的影响
- :探讨磷酸铝佐剂及其吸附率对9V型肺炎球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗免疫原性的影响.方法:磷酸铝佐剂在不同条件下,与9V型肺炎球菌荚膜多糖蛋白结合物进行吸附,吸附率分别为17%,61%和80%,三种制剂经腹腔免疫NIH小鼠,E...
- 杨溢尧刘威廖红梅杜游王凯葛永红熊慧玲江山崔长法
- 关键词:吸附率免疫原性
- 肺炎球菌1型荚膜多糖多克隆抗体制备与夹心ELISA法建立及其在多糖浓度测定中的应用
- 2013年
- 目的:利用肺炎球菌1型全菌体制备多克隆抗体,并且利用该抗体建立肺炎1型荚膜多糖夹心酶联免疫吸附分析法( Enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA),用于检测发酵和纯化过程中的多糖浓度。方法用灭活的1型肺炎链球菌免疫家兔6周,获得高滴度的抗多糖血清,经过亲和层析纯化,获得高纯度的兔抗肺炎1型多糖抗体IgG。以纯化IgG作为包被抗体,加入多糖样品,再以生物素化的抗体作为检测抗体,建立夹心ELISA法检测肺炎1型多糖浓度。确定标准曲线的最佳线性范围,并对该方法进行特异性、准确性和精密度验证。结果兔免疫血清经过双向免疫扩散检测抗体滴度可达1∶32;该方法的线性检测范围为1.56~50 ng/mL;最低检测限为3.13 ng/mL。在标准品中混入其他型别多糖或培养基,回收率分别为102%和108%;该方法批内精密度和批间精密度分别为6.08%和7.01%。结论建立的夹心ELISA方法,其特异性、准确性和精密度均良好,可以特异地检测肺炎球菌1型多糖浓度。
- 刘威廖红梅谢谦黄放邹莎莎马诚江山崔长法
- 关键词:夹心ELISA
- 菌种筛选对1型肺炎链球菌产糖量的影响被引量:1
- 2014年
- 目的用无动物源性培养基筛选高产糖1型肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae semtype1,PN1)。方法配制无动物源性培养基,并用此培养基进行高产糖PN1单菌落筛选。比较筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量。结果无动物源性培养基筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量分别为420和960mg/L,筛选后PN1的产糖量明显高于筛选前PN1。结论以无动物源性培养基筛选PNI可使PN1的产糖量明显提高。
- 黄放邓杰赵兆王智杰周宇刘威张珂张伟李小波曾华英江山崔长法
- 关键词:链球菌肺炎多糖类菌种筛选
- 酸沉淀法纯化14血清型肺炎链球菌荚膜多糖工艺的建立被引量:5
- 2016年
- 目的建立一种14血清型肺炎链球菌荚膜多糖的酸沉淀法纯化工艺,以替代传统的苯酚抽提法。方法对建立的14型肺炎链球菌荚膜多糖酸沉淀法中的氯化钙终浓度(0、50、100、200、400 mmol/L)、pH值(3.5、4.0、4.5、5.0及5.7)及反应时间(0、1、2、4、6、8 h及过夜)进行优化。采用优化后的方法纯化3批14型肺炎粗制多糖,制备精制多糖,并进行理化指标、抗原性检测及核磁分析,同时与苯酚抽提纯化工艺进行比较。结果酸沉淀法的最佳工艺为:氯化钙终浓度50-100 mmol/L,pH值3.5-4.0,作用时间为过夜。采用该方法制备的3批14型肺炎精制多糖的蛋白和核酸杂质含量均较低,总磷、总氮、氨基己糖含量、多糖分子质量均符合企业注册标准,抗原活性和核磁共振图谱的分析结果表明其多糖结构无异常。结论酸沉淀法具有操作简便、效果显著及不需使用有毒有害试剂等优点,可用于纯化14型肺炎链球菌荚膜多糖。
- 李小波张锐谢媛媛程尊平陈娟江山
- 关键词:纯化荚膜多糖