- 具核梭杆菌灭活疫苗和制备方法
- 本发明名称为具核梭杆菌疫苗和制备方法。本发明涉及生物制药技术领域,具体涉及具核梭杆菌灭活疫苗的制备方法,包括以下步骤:具核梭杆菌的分离和培养;收集;灭活;乳化制剂;无活菌检测;抗体效价检验。本发明方法工艺简单,制造成本低...
- 张革柯宏朋肖晗薛莹
- 文献传递
- 靶向抗肿瘤蛋白iRGD-CDD的原核表达及生物活性鉴定
- 2014年
- 目的:原核表达并纯化具有特异性成纤维细胞激活蛋白(FAPα)酶切位点的靶向抗肿瘤GP-CDD-iRGD融合蛋白,利用FAPα的酶切功能切除融合标签,检测其对FAPα阳性肿瘤细胞株的毒性。方法:设计并合成GP-CDD-iRGD基因,插入p GEX-4T3载体,构建重组表达质粒,转化至BL21大肠杆菌感受态细胞中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析重组融合蛋白的表达,Western blot检测融合蛋白的表达,经GST亲和柱纯化融合蛋白后,通过体外细胞毒性试验(MTT法)和细胞凋亡实验评价该融合蛋白的靶向抗肿瘤活性。结果:成功构建重组原核表达质粒p GEX-GPCDD-iRGD,可溶性表达相对分子量约为36 k Da的融合蛋白GST-GP-CDD-iRGD,纯化后蛋白纯度约为90%,经MTT实验测定其对FAPα阳性4T1细胞株的ED50约为18.5μmol/L,流式细胞术检测到其对FAPα阳性4T1细胞株具有选择性毒性作用,早期凋亡比例达到约28%。结论:原核表达的重组融合蛋白GP-CDD-iRGD对FAPα阴性4T1细胞株未显示毒性,而对FAPα阳性4T1细胞株具有显著的促凋亡作用,为进一步研究其在体内的靶向抗肿瘤活性提供了依据。
- 王启帆薛莹冯新为张革
- 关键词:靶向抗肿瘤促凋亡
- 具核梭杆菌与肠道肿瘤相关性及机制的研究进展
- 2015年
- 具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)是革兰氏阴性专性厌氧菌,与多种感染性疾病密切相关。研究发现,具核梭杆菌在人体肠道内广泛存在,依其黏附和侵袭性产生毒性,并且不同菌株具有不同的毒力。目前,越来越多的实验研究证明,具核梭杆菌与结直肠癌之间存在相关性。具核梭杆菌在结直肠癌发生发展中的作用仍在探索中。
- 薛莹张革
- 关键词:具核梭杆菌结肠癌肠道感染