赵嫚
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：徐州医学院医学技术学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 膀胱癌T24顺铂耐药细胞系的建立及生物学特性被引量：3
- 2015年
- 目的采用浓度梯度法诱导建立人膀胱癌顺铂耐药细胞系(T24/DDP),并观察其生物学特性。方法利用人膀胱癌细胞株T24,采用顺铂(DDP)作为诱导剂在体外建立人膀胱癌顺铂耐药细胞模型T24/DDP(0.6μg/m L)。通过倒置相差显微镜下观察T24、T24/DDP细胞形态,MTT法检测细胞多药耐药性,生长曲线检测细胞的增殖能力,流式细胞术测细胞的周期,q RT-PCR检测耐药基因MRP(multidrug resistance-associated protein)的表达。结果经过顺铂14个月的诱导,成功建立了T24/DDP。倒置相差显微镜下观察与T24细胞相比较,T24/DDP排列不规则,形态出现多形性,出现巨细胞;与T24相比较,T24/DDP对顺铂、阿霉素、长春新碱、甲氨蝶呤均产生不同程度的交叉耐药,比T24细胞倍增时间明显延长,细胞周期中G1期细胞增多,G2、S期细胞减少。q RT-PCR结果显示,耐药细胞MRP基因的表达明显高于亲本细胞。结论人膀胱癌耐顺铂细胞株T24/DDP具有多药耐药性,可以作为研究膀胱癌细胞多药耐药的良好实验模型。
- 赵嫚张曼马萍
- 关键词：人膀胱癌细胞顺铂多药耐药
- P—gP在膀胱癌细胞中的差异表达研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究P-糖蛋白（P．gP）在人膀胱癌耐阿霉素细胞株（pumc-91／ADM）及不耐药膀胱癌细胞株（pumc-91）中的差异表达。方法横断面研究，采用阿霉素浓度梯度诱导法从人膀胱移行细胞癌puree-91建立人膀胱癌多药耐药细胞系pumc-91／ADM，通过SYBRGreenI实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测pumc-91／ADM和pumc-91细胞株中P—gPmRNA的表达情况，利用蛋白免疫印迹法（WesternBlot）对两种细胞中P-gP蛋白的表达进行半定量分析，同时采用免疫细胞化学技术对两种细胞中P-gP蛋白的表达进行定位及半定量分析，实验数据均使用独立样本的t检验进行分析。结果qRT-PCR结果显示，与pumc-91细胞相比，P-gPmRNA在pumc-91／ADM细胞中的表达水平上调了约7．74倍（t=11．97，P〈0．05）；利用Image J软件分析Westernblot条带光密度比值，P-gP蛋白在pumc-91／ADM中的表达量（1．393±0．328）明显高于pumc-91（0．953±0．250）（t=4．35，P〈0．05）；通过免疫细胞化学染色发现，P-gP在两种细胞的胞膜和胞浆均有表达，且在pumc-91／ADM中的表达量明显高于pumc-91（t=11．41，P〈0．05），差异均有统计学意义。结论P-gP在人膀胱癌耐阿霉素细胞株（pumc-91／ADM）中表达水平比其在不耐药膀胱癌细胞株（pumc-91）中表达水平显著上调。
- 赵嫚张曼郁舒靓张敏马萍
- 关键词：膀胱肿瘤P-糖蛋白
