李建文
- 作品数：9 被引量：33H指数：4
- 供职机构：长江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：山东省农业科学院青年科研基金国家花生产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 辣椒疫病生防菌的筛选、鉴定及其抑菌机理初探被引量：6
- 2015年
- 采用平板稀释法和平板对峙试验,从武汉、荆州、宜昌和荆门等地的辣椒根际土壤中分离到185株细菌,筛选到1株具有高效拮抗辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)的生防菌Bs04。通过形态学观察、生理生化指标测定、16S r DNA序列测定及进化树构建,确定菌株Bs04为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。Bs04对辣椒疫霉菌丝生长抑制率达80%,同时对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotiana)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sb.vesinfectum)和黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)具有明显的抑制作用。利用光学显微镜观察Bs04对辣椒疫霉菌丝形态的影响,发现菌丝分支增多、顶端畸形、原生质浓缩及生长缓慢等现象,表明Bs04具有显著的抑菌作用。
- 吴辉潘梦武高易宏李建文姚少林孙文秀
- 关键词：生防菌抑菌机理
- 辣椒疫病生防菌BS04的培养基优化研究被引量：1
- 2015年
- 利用单因素试验与正交试验相结合的方法,对辣椒疫病生防菌BS04的培养基成分进行了优化。单因素试验结果表明,碳源为蔗糖、氮源为蛋白胨和无机盐为MgSO4时有利于生防菌BS04的生长。正交试验结果表明,培养基的最优组合为蔗糖2%、蛋白胨0.5%、MgSO41.5%,在此条件下生防菌BS04抑菌效果提高20%。
- 孙文秀潘梦武吴辉李建文高易宏
- 关键词：辣椒疫病培养基优化
- 枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析
- 2016年
- 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的、含硒的黄素蛋白,在细胞增殖和分化、维持细胞内外氧化还原平衡中起重要作用。通过基因特异性引物从枯草芽孢杆菌BS04菌株中扩增TrxR编码基因,亚克隆至p ET-28a(+)原核表达载体并转化大肠埃希菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达后采用Ni离子亲和层析进行重组蛋白纯化及活性分析。结果表明,枯草芽孢杆菌BS04菌株的TrxR基因全长1 011 bp,编码336个氨基酸,与已知枯草芽孢杆菌TrxR氨基酸同源性达99%。SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发现,重组蛋白分子量约37 ku,与预期相符。DTNB还原法测定TrxR活性及酶动力学常数结果表明,其对DTNB具有较高的还原活性,其Km和Kcat值分别为3.06 mmol·L-1和324.71 min-1。该研究结果为进一步了解TrxR的功能提供了参考依据。
- 陈洪娜李建文江翱孙文秀
- 关键词：枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶原核表达活性分析
- 水稻纹枯病病菌β-微管蛋白基因克隆及其与多菌灵抗药性的关系被引量：1
- 2017年
- 测定湖北省不同地区水稻纹枯病病菌对多菌灵的敏感性,结果发现,抗性菌株的抗药性水平不高。根据常见植物病原真菌β-微管蛋白基因设计引物,从水稻纹枯病病菌对多菌灵的敏感和抗性菌株中扩增β-微管蛋白基因,均获得了大小为695 bp的基因片段,其中含有1个53 bp的内含子,与粗糙脉孢菌具有较高的同源性。序列分析结果表明,水稻纹枯病病菌抗性菌株β-微管蛋白基因的第271、第453、第612位碱基发生了突变,分别由T、T、T突变为G、C、C,但这3个位点相对应的氨基酸却没有发生变化。此外,内含子的第15位碱基由G突变为A。由此可见,水稻纹枯病病菌对多菌灵抗药性的产生与β-微管蛋白基因的变异有一定的关系。
- 陈洪娜李建文孙文秀
- 关键词：Β-微管蛋白基因克隆多菌灵抗药性碱基突变
- 大灰象甲性信息素分离鉴定及方法研究
- 采用直接萃取法、气密针取样法为基础的固相微萃取与气质联用技术,对大灰象甲性信息素分离鉴定及方法进行了研究,结果表明,直接萃取法共检测出化合物37种,其中仅交配组检出物有24种,交配组含量显著增高的化合物有4种;气密针采集...
- 李建文李晓孙文秀李伟鞠倩曲明静高华援李春雨
- 关键词：大灰象甲性信息素气质联用固相微萃取
- 文献传递
- 苯并咪唑类杀菌剂对水稻纹枯病菌的室内毒力测定被引量：4
- 2016年
- 采用菌丝生长速率法测定了多菌灵、苯甲多菌灵和甲基硫菌灵3种苯并咪唑类杀菌剂对不同抗性水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）的室内毒力。结果表明,多菌灵的抑菌效果最好,其对敏感菌株的EC50在0.293 1～0.403 5μg/m L之间,对抗性菌株的EC50在0.414 7～0.645 7μg/m L之间;甲基硫菌灵的毒力最低,其对敏感和抗性菌株的EC50分别在12.039 7～26.597 1μg/m L和20.770 1～36.953 3μg/m L之间。
- 袁梦思李建文孙文秀
- 关键词：杀菌剂毒力测定
- 生防菌BS04防治辣椒疫病机制被引量：6
- 2015年
- 从生防菌的根际定殖、防效和诱导防御酶活性3个方面探讨了生防菌BS04防治辣椒疫病的机制。结果表明,生防菌BS04能够在辣椒根际定殖,且定殖密度比较稳定,稳定维持在105CFU/g以上;盆栽试验测定防治效果表明,生防菌BS04的培养液对辣椒幼苗期疫病有较明显的防治效果,防效达85.81%;防御酶活性测定结果显示,接种辣椒疫霉菌后,辣椒叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)的活性均显著提高并出现峰值,但生防菌BS04培养液和辣椒疫霉菌共同处理后,各种防御酶的活性有所降低,并表现出相对平缓的状态。
- 李建文高易宏吴辉江翱孙文秀
- 关键词：生防菌辣椒疫病防病机制生物防治防御酶
- 大灰象甲实时定量PCR内参基因的筛选被引量：9
- 2018年
- 【目的】筛选出适合分析大灰象甲Sympiezomias velatus成虫不同组织中基因表达水平的内参基因。【方法】利用转录组测序技术获得大灰象甲管家基因序列作为候选内参基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析候选基因在大灰象甲雌雄成虫触角、头、胸、腹和足中的表达量;并利用geNorm, NormFinder和BestKeeper软件及在线工具RefFinder评价候选基因的表达稳定性。以大灰象甲气味结合蛋白1(odorant bindng protein 1, OBP1)基因为目标基因验证候选基因在大灰象甲成虫不同组织中的表达稳定性。【结果】基于大灰象甲转录组数据首次鉴定得到β-肌动蛋白基因(ACT)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)、18S核糖体RNA基因(18S rRNA)、60S核糖体蛋白L12基因(RPL12)、60S核糖体蛋白L32基因(RPL32)、40S核糖体蛋白S20基因(RPS20)、延伸因子2基因(EF2)、α-微管蛋白基因(TUA)和β-微管蛋白基因(TUB)共9个管家基因序列。geNorm分析结果显示,RPL12和RPS20是最稳定表达的内参基因,而BestKeeper和NormFinder分析结果显示最稳定表达的内参基因分别是TUA和TUB。综合各分析方法得出9个候选基因中TUB,TUA,RPS20和RPL12是最稳定表达的内参基因,而18S rRNA,ACT和GAPDH这3个广泛应用的内参基因则表现出最低的表达稳定性。最后以OBP1为目标基因对稳定性不同的4个候选基因进行稳定性验证,发现以TUB和RPL12为内参基因,OBP1在成虫不同组织之间的表达模式基本一致;而以RPL32为内参基因,表达模式与应用TUB作为内参基因时稍有不同,使用18S rRNA作为内参基因得到的OBP1表达模式则与应用TUB作为内参基因时的完全不一致。【结论】TUB,TUA,RPS20和RPL12可以作为分析大灰象甲成虫不同组织中基因表达水平的内参基因,为后续基因表达研究奠定了基础。
- 李晓李建文成波李伟孙文秀高华援鞠倩姜晓静杜龙曲春娟曲明静
- 关键词：大灰象甲实时定量PCR内参基因基因表达分析
- 1株不动杆菌发酵液对水稻纹枯病菌的抑菌作用被引量：6
- 2016年
- 测定了1株不动杆菌A2发酵液对水稻纹枯病菌的抑菌率、菌丝的生长及菌核萌发和形成时间的影响。结果表明,不动杆菌A2发酵液对水稻纹枯病菌具有一定的抑制作用,抑制率达82.6%;导致病原菌菌丝畸形,原生质外漏;经不动杆菌A2处理后降低了菌核的萌发指数,菌核萌发指数为38.2%;明显延迟了菌核的形成时间。
- 袁梦思李建文刘梦华孙文秀
- 关键词：不动杆菌发酵液水稻纹枯病病菌抑菌作用
