欧阳颖
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-221/222海绵体载体的构建及验证被引量：1
- 2015年
- 目的构建微小RNA(mi R)-221/222海绵体载体并初步探讨其在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的作用。方法利用mi RNA海绵体技术设计合成含3个has-mi R-221和3个hasmi R-222反义序列的DNA片段,经酶切连入p DC316-m CMV-EGFP质粒载体,合成mi R-221/222海绵体载体。将mi R-221/222海绵体载体转染入OSCC细胞系UM1,检测转染效率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测mi R-221和mi R-222表达水平,Western blot检测转染后PTEN蛋白表达水平,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果成功构建mi R-221/222海绵体载体,测序验证与设计序列完全一致;UM1各组细胞转染效率均在70%以上;实时荧光定量PCR显示,mi R-221/222海绵体载体组mi R-221和mi R-222表达水平较p DC316质粒组和UM1细胞组明显降低(t1=111.69,P1=0.001;t2=6.98,P2=0.002;t3=236.55,P3=0.001;t4=22.06,P4=0.001);Western blot显示,海绵体转染组较对照组PTEN蛋白水平表达明显升高;Transwell实验显示,海绵体转染组细胞侵袭能力较对照组减弱。结论实验成功构建了mi R-221/222海绵体载体,并初步验证其对OSCC细胞侵袭性的抑制作用,为后续mi R-221/222的功能研究奠定基础。
- 周李杰赵玮江方方刘子锋欧阳颖余东升
- 关键词：微小RNA
