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阻断Hedgehog信号通路对HepG2.2.15细胞增殖的影响: 2015年; 目的探讨环耙明阻断Hedgehog信号通路对肝癌细胞HepG2.2.15增殖的影响。方法培养肝癌细胞HepG2.2.15,用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h,采用MTT检测环耙明对细胞活力的影响;EDU法检测细胞DNA合成情况;Real-timePCR法检测细胞Gli1的表达情况。结果用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h后,MTT检测结果显示细胞活力降低,较空白组差异明显(P<0.05);EDU法检测结果显示25μmol/L的环耙明作用于细胞不同时间后,HepG2.2.15细胞的DNA合成率下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.01);Real-time PCR法实验结果显示5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理组与对照组相比,Gli1表达水平明显降低(P<0.05)。结论不同浓度环耙明能抑制HepG2.2.15细胞的增殖,减少HepG2.2.15细胞的DNA合成率;其作用机制可能与HepG2.2.15细胞中Gli1、mRNA的表达水平下降有关。; 沈璇黄继锦张雪范芳李长福; 关键词：HEDGEHOG信号通路肝癌增殖

Artemis影响人肝癌细胞BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的研究（英文）被引量：1: 2018年; 目的探讨Artemis对人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法将p SGU6/GFP/Neo/sh Artemis干扰质粒转染人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU(sh Artemis组),通过Real-time PCR法检测P-gp基因表达水平变化;MTT法检测sh Artemis组细胞对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及索拉菲尼的IC50值和RI值;利用Western-blot法检测p-Artemis和ATM蛋白水平表达变化;使用ATM抑制剂KU55933联合丝裂霉素作用细胞48 h,Westernblot法观察ATM、γ-H2AX和Artemis蛋白水平表达变化。结果与对照组比较,sh Artemis组的P-gp mRNA表达水平下降(P<0.05),且对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和索拉菲尼的敏感性增加,IC50值和RI值均降低(P<0.05)。sh Artemis组的pArtemis与ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);KU55933联合丝裂霉素作用细胞后,有效减少ATM蛋白的表达(P<0.05),同时γ-H2AX蛋白表达量增加(P<0.05),但Artemis蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论靶向干扰Artemis的表达能够增强细胞BEL-7402/5-FU对化疗药物的敏感性。此效应可能与Artemis作为BEL-7402/5-FU DNA损伤修复的分子开关,进而通过影响ATM参与DNA损伤修复有关。; 李宇婷张雪范芳李大玉余春波陈佳瑜刘云李长福; 关键词：ARTEMIS 化疗敏感性肝癌

Artemis对人肝癌细胞系BEL-7402/5FU DNA损伤的影响被引量：2: 2016年; 目的探讨转染sh Artemis干扰质粒对人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤的影响。方法将人肝癌细胞分为正常对照组、脂质体对照组、空质粒对照组和转染sh Artemis干扰质粒实验组(sh Artemis实验组);建立DNA损伤模型,分别用0.625、1.25、2.5、5.0和10.0μg/m L的丝裂霉素C作用BEL-7402/5FU细胞24和48 h,MTT法检测细胞活性,Western blot观察磷酸化组蛋白H_2AX(γ-H_2AX)的表达;转染Artemis干扰质粒,检测Artemis、γ-H_2AX表达;彗星实验检测DNA的损伤。结果 0.625、1.25、2.5、5.0和10.0μg/m L的丝裂霉素C作用48h后肝癌细胞活力明显下降(P<0.05);丝裂霉素C刺激细胞48 h后,γ-H_2AX的表达量随着药物浓度的增加而增加;转染sh Artemis干扰质粒后,γ-H_2AX的表达量较正常对照组增加(P<0.05);sh Artemis实验组较正常对照组拖尾DNA量增加(P<0.05)。结论丝裂霉素C能够诱导肝癌细胞损伤;转染sh Artemis干扰质粒促进丝裂霉素C诱导的人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤。; 张雪李大玉祝小波范芳刘云李长福; 关键词：ARTEMIS 丝裂霉素C DNA损伤

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张雪